基于问号钩端螺旋体rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2融合抗原的ELISAs建立及应用

目的：建立基于问号钩端螺旋体（简称钩体）rLipL32／1-LipL21-OmpLl／2融合抗原的ELISAs，并应用于检测钩体病患者血清特异性IgG和IgM。方法：采用显微镜凝集试验（MAT），检测钩体病患者血清及rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2兔抗血清对我国问号钩体参考标准株的效价。分别以rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2、rLipL32／L、rLipL21和rOmpL1／2为包被抗原，建立检测血清特异性IgM和IgG的ELIsAs，并用于检测107份MAT阳性钩体病患者血清标本。结果：MAT结果证实，66％（71／107）患者感染黄疸出血群问号钩体，rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2兔抗血清对我国15株问号钩体参考标准株的凝集效价为1：20～1：160。rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2、rLipL32／1、rLipL21、rOmpL1／2抗原用于检测IgM的ELISA阳性率分别为89．7％、75．7％、85．1％和79．4％，用于检测IgG的ELISA阳性率分别为99．1％、99．1％、94．4％和86．09／6。rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2-IgM—ELISA检测阳性率高于其它3种检测IgM的ELlSAs（P〈0．05），rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2-IgG—ELISA检测阳性率高于rOmpLl／2IgGELISA（P〈0．05），但与rLipL21-IgGELISA及rLipL32／1-IgGELISA接近（P〉0．05）。结论：rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2-ELISAs可作为敏感、特异的通用型钩体病血清学早期诊断方法。     

杭州市肠道病毒71型的分离与VP1区域序列分析

目的了解杭州市2008年和2011年肠道病毒71型(EV71)流行株VP1基因特征。方法手足口病患者咽拭子、粪便等样本先通过荧光RT-PCR方法初筛,然后选部分肠道病毒71型阳性样本进行病毒分离、培养;通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定上述培养物,并扩增VP1区全长基因和序列测定,利用生物信息学软件对序列进行分析,构建基因进化树。结果从2008年和2011年手足口样本中分离到EV71阳性毒株各4株,VP1基因全序列测定结果显示其与C4亚型代表株核苷酸和氨基酸的相似性最高,分别为93.8%～95.2%、99.0%～99.7%。结论杭州市手足口病患者感染EV71病毒的流行株属C基因型的C4亚型。     

杭州市儿童流感样病例中肠道病毒血清型分析

目的:研究杭州市儿童流感样病例中肠道病毒(enterovirus,EV)病原谱构成及特征。方法:收集2019年杭州市1 060份儿童流感样病例咽拭子样本,实时荧光RT-PCR方法对流感病毒和EV进行筛查,采用SPSS16.0软件卡方(χ 2)检验对春夏秋冬四季的流感病毒和EV检测阳性率进行比较。EV阳性的标...     

离子色谱法测定水中草甘膦含量

目的:探索、建立大体积直接进样,离子色谱法测定水中草甘膦的含量的方法。方法:以AS19柱分离,在30 mmol/L KOH为淋洗液、流速为1.2 ml/min、进样量为500μl、电导检测条件下进行试验。结果:测定的草甘膦含量在5μg/L~1000μg/L浓度范围内呈良好线性关系,相关系数r大于0.9999,测定相对标准偏差均小于3%,回收率在78%~98%之间。结论:该方法操作简便,灵敏,结果可靠。     

杭州市大气中挥发性芳烃浓度变化分析

许多挥发性有机物（VOCs）在大气中通过光化学反应而生成臭氧等有毒物质，一些VOCs还具有致畸、致癌、致突变等作用，在发达国家已引起了广泛重视。在美国EPA方法TO-14划定的41种大气有毒物质中，芳烃就有9种。了解大气中VOCs的浓度水平是治理这类污染的基础。通过对杭州市区大气中芳烃的监测，查滑这类污染物的种类和浓度，具有实际意义。     

杭州市2005年卫生检测样品分类分析

杭州市疾病预防控制中心于1996年通过浙江省计量认证，2001年通过中国国家实验室认可，2004年通过浙江省职业卫生技术服务资质评审。中心以国家卫生法规、标准为依据，按照ISO／IEC-17025：1999的标准要求完成检验工作。样品收发室是计量认证管理工作中联系卫生监督所、检验科室和受检单位的桥梁和纽带，是计量认证工作的重要组织结构之一。对2005年分类通过实验室管理系统登记的检测样品进行分析如下。     

条形码在疾病预防控制机构检测样品管理中的应用

目的将条形码技术应用于样品管理可以提高工作效率,减少差错。方法在原实验室资源管理系统软件上连接条形码技术,用于样品受理、送检、接收的整个样品收发工作流程。结果样品条形码有效地提高了工作效率,规范了工作流程,减少了差错,方便检验人员和相关工作人员获取信息。结论条形码技术是实现疾病预防控制机构检测样品管理信息化的重要途径之一,有较高的推广应用价值。     

问号钩端螺旋体lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因原核表达及其产物免疫原性分析

目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,优化目的产物表达条件并对表达产物免疫原性进行鉴定.方法:采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因,并用常规基因工程方法建立其原核表达系统.采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图象分析系统,检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2表达量.采用免疫双扩散试验及Western Blot,鉴定rLipL32/1- LipL21-OmpL1/2的免疫原性.结果:获得了序列正确的lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统E.coli BL21DE-3pET42a-lipL32/1-lipL21-ompL1/2.表达条件优化后的rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2产量为37.78 mg/L,是优化前的3.7倍.rLipL32/1-LipL21- OmpL1/2兔抗血清免疫双扩效价为1∶4.rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2抗血清能识别rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2以及rLipL32/1、rLipL21、rOmpL1/2.rLipL32/1- LipL21-OmpL1/2能与问号钩体56601株全菌兔抗血清以及黄疸出血群、流感伤寒群、波摩那群、秋季群问号钩体感染患者血清出现阳性杂交信号.结论:成功地构建了lipL32/1-lipL21-OmpL1/2融合基因及其原核表达系统,表达产物具有良好的抗原性和交叉免疫反应性,可作为研制通用型问号钩体基因工程疫苗及通用型钩体病血清学检测的抗原.     

压力蒸汽灭菌技能考核能力验证结果

压力蒸汽灭菌广泛应用于医疗、卫生、科研、教学、制药、食品、农业等行业的一种最常用灭菌技术.生物监测是检验压力蒸汽灭菌质量的关键环节,也是微生物检验人员必须掌握的基本技能之一,只有正确掌握微生物检验技能,灭菌效果质量检测才能得到保障.理想的灭菌效果应在保障灭菌物品不被损伤、其品质不受影响的情况下,迅速有效地致死于存在其中的微生物,达到灭菌保证水平.