关于重症医学教育的思考

重症医学是既与其它学科关系密切又有自己独特理论体系的一门朝阳学科,在某种程度上代表现代医学的发展方向。加强重症医学教育,培养合格的重症医学专科人才是现代医学教育的不可忽视的重要组成部分。这不仅是现代医院管理模式本身发展的要求,也是社会发展和对高质量医疗服务的需求增加的需要,是学科建设自身发展的需要。医学院校在临床医学教育阶段应该注重对医学生进行重症医学兴趣的培养,加强重症医学科临床基地建设,注重临床技能的训练以及知识的更新,培养学生整体看待疾病和患者的观念,培养正确的临床思维。要注重传授循证思维,使学生在运用循证医学方法进行学习过程q-掌握学会循证专业评价的知识,达到寻找最佳性的循证原则,同时注重培养医学生从实习阶段具备科研意识、创新精神的科学素质。     

关于重症医学教育的思考

重症医学是既与其它学科关系密切又有自己独特理论体系的一门朝阳学科,在某种程度上代表现代医学的发展方向。加强重症医学教育,培养合格的重症医学专科人才是现代医学教育的不可忽视的重要组成部分。这不仅是现代医院管理模式本身发展的要求,也是社会发展和对高质量医疗服务的需求增加的需要,是学科建设自身发展的需要。医学院校在临床医学教育阶段应该注重对医学生进行重症医学兴趣的培养,加强重症医学科临床基地建设,注重临床技能的训练以及知识的更新,培养学生整体看待疾病和患者的观念,培养正确的临床思维。要注重传授循证思维,使学生在运用循证医学方法进行学习过程中掌握学会循证专业评价的知识,达到寻找最佳性的循证原则,同时注重培养医学生从实习阶段具备科研意识、创新精神的科学素质。     

ICU再喂养综合征早期危险因素的探查及模型预测

目的:探讨首次收入重症医学科(ICU)患者初次喂养后发生再喂养综合征(RFS)的早期危险因素,并构建预测模型,为入院早期的急危重症患者营养选择策略提供参考依据。方法:回顾性分析2020年1月1日—2021年7月31日首次收住蚌埠医学院第一附属医院ICU且符合病例入排标准患者的病例资料。根据是否并发RFS,分为RFS组和非RFS组,分析比较2组的临床数据指标,并构建RFS早期预测模型。结果:纳入分析的患者200例,分为RFS组134例,非RFS组66例,发病率为66.7%。单因素分析显示:NRS2002营养评分,APACHEⅡ评分,入院3 d是否诊断脓毒症,3 d内胰岛素应用病史,前白蛋白,尿素氮,C反应蛋白等与RFS发生相关(P<0.05)。筛选患者入院初期即可获得的危险因素并经二元logistic回归分析显示:前白蛋白、尿素氮、C反应蛋白为RFS的独立危险因素(P<0.05)。构建入院早期RFS预测模型Logit(P)=0.114X1+0.011X2-0.005X3,模型预测急危重症患者RFS发病率的ROC曲线下面积为0.742(95%CI:0.6708~0.8132),灵敏度为81.34%,特异度为57.58%。模型拟合优度显示:χ2=3.808(P>0.05)。结论:在剔除了入院初始合并肝肾功能不全的急危重症患者后,其首次喂养获得了更高的RFS发病率,脏器功能的损害或抑制了电解质水平的下降。前白蛋白、尿素氮、C反应蛋白是急危重症患者早期即可获得的危险因素指标,基于此构建的RFS风险预测模型有着良好的区分度及校准度,可以有效评估急危重症患者RFS发病风险,为医师营养策略选择提供参考意见。     

MALDI-TOF MS在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性分析的应用研究

摘要：目的 探究基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)同源性在临 床中的应用价值。方法 收取某院2018年9月-2020年10月临床分离的肺炎克雷伯菌非重复菌株295株,经耐药表型筛选出 CRKP;利用MALDI-TOF MS采集CRKP的质谱图,分别运用SARAMIS软件中的相似性分型和identical masses分型进行同源性 分析;以脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)为参考标准,将CRKP分为高度、中度、低度同源性3组,评价 MALDI-TOF MS在分析CRKP同源性分析中的应用价值。结果 经耐药表型筛选出55株CRKP;3组同源性分析显示：高度同 源组中,应用SARAMIS软件自带的identical mass分型和相似性分型分析,大多identical mass集中分布(60%~80%),相似性＞ 80%,与PFGE结果较为一致;中度同源组中,identical mass＞70%,相似性＞85%,显示菌株间高度集中,跟PFGE结果存在较 大的差异;低度同源组中,identical mass＜70%,相似性＜80%,与PFGE结果类似,能较好体现菌株间的差别。结论 MALDITOF MS自带的SARAMIS软件目前仅在高度同源和低度同源菌株中,可作为分析同源性的初筛方式。     

鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠中性粒细胞中抗氧化蛋白6、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1和翻译控制肿瘤蛋白表达变化

目的：：通过蛋白印迹技术验证鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠中性粒细胞中抗氧化蛋白6(PRDX6)、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(SERPIN B1)和翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)在不同时间点的表达情况。方法：将18只清洁级雄性成年Wistar大鼠随机分为正常对照组(N组)、脓毒症6 h组(6 h组)和12 h组,每组6只。利用鲍曼不动杆菌腹腔注射制作鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠模型,提取N组、6 h组和12 h组大鼠的中性粒细胞总蛋白,用免疫印迹实验检测PRDX6、SERPIN B1和TCTP的表达变化,并与前期双向凝胶电泳结果做对比分析。结果：6 h组和12 h组中性粒细胞中PRDX6表达量均明显低于N组(P<0.01),12 h组较6 h组下降更明显(P<0.01);6 h组和12 h组SERPIN B1的表达量均高于N组(P<0.01),6 h组和12 h组差异无统计学意义(P>0.05);6 h组和12 h组TCTP的表达量均显著高于N组(P<0.01),而6 h组和12 h组差异无统计学意义(P>0.05),3种蛋白的表达与前期蛋白质组学实验结果基本一致。结论：鲍曼不动杆菌脓毒症组大鼠中性粒细胞中 PRDX6、SERPIN B1和TCTP表达与正常组之间存在明显差异,PRDX6、SERPIN B1和TCTP可能会成为鲍曼不动杆菌脓毒症早期诊断和治疗的分子靶点。     

脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白B1的变化规律及血必净的干预效果研究

目的观察脓毒症大鼠血清中高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1 protein, HMGB1）的变化规律及血必净的干预效果。方法大鼠尾静脉注射内毒素（Lipopolysaccharide,LPS）5 mg/kg体重,制备脓毒症动物模型。实验一：50只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组（A组,10只）,LPS模型组（B组,10只）,LPS＋血必净治疗组（C组,30只）,C组依不同血必净起始治疗时间再分为C1、C2、C3组即LPS造模前2 h治疗组、造模后2、8 h治疗组,每组10只。各组大鼠分别于造模后4、12、24、48、72 h尾静脉采血,采用Western blot法检测血清中HMGB1含量。实验二：另取30只Wistar大鼠分为LPS模型组（D组）和LPS＋血必净治疗组（E组）,每组15只,处理分别同B组和C1组,于造模后12、24、48 h各处死5只,留取血及组织标本,检测ALT、AST、Cr、BUN指标并观察肝、肺、肾组织病理变化。结果（1）与A组比较,B组不同时间点血清中HMGB1含量均明显升高（P〈0.05）;与B组比较,C1、C2、C3组在12、24、48、72 h时间点血清HMGB1含量均下降,C3组下降幅度小于C1和C2组（P〈0.05）。（2）与A组比较,D组ALT、AST、Cr、BUN均明显升高且于24 h达峰值（P〈0.05）;与D组比较,E组ALT各时间点及AST、Cr、BUN 在24、48 h亦下降明显（P〈0.05）。（3）D组大鼠肺、肝、肾组织病理切片显示：有局部充血出血、细胞水肿、变性坏死、炎症细胞浸润、特征性结构破坏等,且在24、48 h出现严重病变;E组相应时间点较D组镜下病变明显减轻。结论脓毒症大鼠血清中HMGB1含量增高,峰值出现晚,高值持续时间长;HMGB1在脓毒症大鼠过度的炎症反应与多脏器功能损害中具有重要作用;血必净注射液可以降低脓毒症大鼠血清中HMGB1的含量,改善生化指标,减轻肝、肺、肾组织严重的炎症反应,且尽早使用效果更好。     

应用MALDI-TOF MS快速鉴定blaKPC-2基因型肺炎克雷伯菌

 目的 探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_KPC-2基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法 收集2018年9月-2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。应用聚合酶链反应(PCR)方法筛选携带bla_KPC-2基因型肺炎克雷伯菌。MALDI-TOF MS鉴定菌株并收集携带bla_KPC-2基因型和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的质谱图,各自选取其中70株菌株图谱,建立携带bla_KPC-2基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra)。采用超级图库鉴定除建库以外的肺炎克雷伯菌,根据耐药表型和PCR结果,判断鉴定结果是否准确。结果 共收集295株肺炎克雷伯菌,经耐药表型筛选耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)143株和CSKP 152株。CRKP中鉴定出140株携带碳青霉烯酶基因(134株检出bla_KPC-2基因,3株检出bla_KPC-18基因,2株检出bla_NDM-1基因,1株检出bla_IMP基因),3株不携带碳青霉烯酶基因;其中2株同时检出bla_KPC-2基因和bla_NDM-1基因。根据建库要求,建立携带bla_KPC-2基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra);设置error值<0.5,二者重合率达80%;对比图发现,4 154.4、8 310.7、10 880.8、3 579、10 079.3 m/z五个峰可作为区分携带bla_KPC-2基因肺炎克雷伯菌和CSKP的特征峰。选取除建库以外的155株肺炎克雷伯菌进行验证,准确率为92.90%(144/155);其中携带bla_KPC-2基因肺炎克雷伯菌准确率为94.52%(69/73),CSKP准确率为91.46%(75/82)。结论 通过MALDI-TOF MS建立Super-Spectra,可快速预测bla_KPC-2基因型肺炎克雷伯菌,为临床CRKP感染的诊疗及医院感染防控提供可靠的实验室依据。     

鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠体内miR-155和Th17表达的关系

目的 观察不同时间段鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠血清中miR-155的表达和Th17细胞所占的比例,探究彼此之间关系。 方法 将32只清洁级SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(N组)、脓毒症6 h组、12 h组和24 h组,每组8只。鲍曼不动杆菌混悬液腹腔注射制作鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠模型,对照组腹腔注射生理盐水,外周血分离血清和淋巴细胞,荧光定量RT-PCR法检测大鼠血清中miR-155的表达,流式细胞术检测血液中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)测血清白介素17(IL-17)的表达量。分析比较脓毒症6 h组、12 h组、24 h组和正常对照组的组间差异,Pearson相关分析评估miR-155的表达和Th17之间的关系。 结果 各时间段(6 h、12 h、24 h)脓毒症大鼠miR-155、IL-17和Th17细胞水平较正常对照组升高(均P<0.05)。Pearson相关分析显示血清中miR-155表达与Th17比例水平和IL-17表达均呈正相关(均P<0.05)。 结论 鲍曼不动杆菌脓毒症大鼠血清miR-155、IL-17和血液中Th17水平与正常对照组之间差异有统计学意义,血清miR-155表达与Th17比例水平和IL-17表达均呈正相关,miR-155有可能会成为鲍曼不动杆菌脓毒症治疗的新靶点。