湖北省第二类疫苗采购的组织和实施效果分析

目的分析湖北省第二类疫苗采购系统的建立和实施效果。方法建立全省第二类疫苗采购系统平台,采用描述流行病学方法对第二类疫苗网上采购、分发数据进行分析。结果 2017年1-10月全省县级疾病预防控制中心(CDC)通过搭建的采购系统向直接挂网的生产企业发出的第二类疫苗订购数为7 390 359支(瓶),企业实际发货数占订购数的87.71%,CDC收货数占企业发货数的93.25%。2017年10月省级通过系统同时组织完成了2017-2018年度第二类疫苗集中采购,企业申报疫苗品种129个,其中审核通过121个,全部谈判议价成功;在议价前交易的94个品种中,63.83%的品种议价后价格降低,从11月开始县级CDC根据省级采购价格在系统上进行第二类疫苗采购。结论湖北省第二类疫苗采取先县级网上采购后省级组织集中采购的方式是可行的、高效的。     

人白血病细胞株重组激活基因表达及T细胞受体基因重排的检测

背景：淋巴细胞特异性重组激活基因编码的重组激活基因1与重组激活基因2蛋白是参与V（D）J重排机制的重要的重组酶。除参与V（D）J重排以外，近年的研究结果表明重组激活基因介导的转位作用可能与染色体易位及淋巴性恶性肿瘤的发生有关，但迄今尚未有明确定论。目的：检测重组激活基因、DNA修复因子Ku70／Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴癌细胞株的发生情况。设计：重复测量实验。单位：南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所。材料：T淋巴白血病细胞株Jurkat和6T-CEM购自上海细胞生物研究所；T淋巴白血病细胞株Molt-4，皮肤T细胞淋巴癌细胞株HuT102，Burkitt’s淋巴癌细胞株Raji和Daudi以及原髓细胞白血病细胞株HL-60和慢性髓原白血病细胞株K562均由本实验室保存。细胞用含有体积分数0．1胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃，体积分数0．05C02条件下培养。方法：实验于2005-10／2006-01在南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所完成。采用反转录聚合酶链反应检测重组激活基因1，重组激活基因2，非同源末端连接装置途径中的DNA修复因子Ku70／Ku80。以及末端脱氧核苷转移酶mRNA表达；采用巢式、半巢式聚合酶链反应、连接介导的聚合酶链反应等方法检测T细胞受体重排删除DNA环和T细胞受体B链重组信号序列两端的断裂点。了解参与V（D）J重排过程的基因表达和T细胞受体基因重排中间体的产生情况。主耍观察指标：重组激活基因、DNA修复因子Ku70／Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴癌细胞株的发生情况。结果：反转录聚合酶链反应检测结果显示：重组激活基因1mRNA在4种T细胞株中均被检测到，在两种B细胞株和两种髓性白血病细胞株中未检测到；重组激活基因2和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达仅在Jurkat，Molt-4和6T-CEM3种T细胞株中检测到，但在6T-CEM表达较弱；除HL-60细胞未检测到Ku80表达外，所有细胞株均检测到Ku70和Ku80表达。对4种T细胞株T细胞受体重排中间体检测结果表明：仅在Jurkat细胞中检测到DB2-J132 sjTRECs与DB25’端和3’Rss断点，表明Jurkat细胞发生T细胞受体基因重排。同时发现Jurkat TCR Dβ2-Jβ2重排删除环结合区具有明显的多样性特征。结论：重组激活基因可能与T细胞白血病具有更为密切的关系。Jurkat细胞有可能成为研究重组激活基因与T细胞淋巴性肿瘤的一个潜在的细胞模型。     

呼吸内科护理中重症患者的护理效果观察分析

目的探讨分析呼吸内科护理中重症患者的护理效果。方法本文研究对象选取我院呼吸内科于2016年2月至2017年2月收治的104例重症患者,根据护理方式将其分为观察组和对照组,每组52例,给予观察组患者实施心理护理、生命体征监测、机械通气护理、氧疗护理、饮食护理等组成的个性化护理措施,给予对照组患者实施单纯常规护理,对比两组患者治疗效果、护理后各项指标等情况。结果观察组治疗总有效率为96.15%,对照组治疗总有效率为78.84%,两组差异对比具有显著统计学意义(P0.05)。观察组患者经有效护理后,其呼吸困难、咳嗽、咳血、痰多堵塞等发生率明显低于对照组,两组差异对比具有显著统计学意义(P0.05)。结论对呼吸内科重症患者实施有效个性化护理措施效果显著,能有效缓解患者咳嗽、胸闷、咳血、痰多等临床症状,提高治疗效果,一定程度也能减少患者不良心理情绪,患者满意度较高,值得临床推广和应用。     

应用斑点ELISA快速研究鸡卵黄抗体IgY的理化性质

目的应用斑点ELISA研究卵黄抗体的理化性质,使多克隆抗体的性质得以确定,为今后更好地研究和利用该抗体奠定基础。方法将制备的卵黄抗体用不同的方法(加热、酸、碱、酶等)处理后,再用斑点ELISA检测卵黄抗体的剩余活性。结果IgY有很好的耐热性,巴氏消毒不会使IgY失活。卵黄抗体在pH>5和<9的环境下,37℃3h后仍保持部分活性。卵黄抗体在室温存放4个月后仍保持部分活性。在pH<5时,胃蛋白酶能发挥作用,使卵黄抗体失去活性。结论IgY的高度稳定性,使得这一多克隆抗体的保存和运输较方便,有利于IgY的推广和使用。     

高频振荡通气治疗新生儿呼吸衰竭的疗效观察及护理体会

目的探讨高频振荡通气(HFOV)治疗新生儿呼吸衰竭的疗效及护理方法.方法回顾分析14例新生儿呼吸衰竭病例,分别记录HFOV开始时、8～12 h、24～48 h、48 h后患儿FiO2、PaO2、PaCO2、pH值.结果14例中痊愈10例,治愈率达71.43%;死亡2例,放弃治疗2例,共占28.57%.治疗8～12 h后,肺氧合状况开始改善.结论HFOV治疗新生儿呼吸衰竭是一种疗效肯定、安全性好的新型机械通气方法.护理过程中,呼吸气道的管理和呼吸机参数的调整是治疗关键.     

幽门螺杆菌与阿尔茨海默症相关性的研究进展

幽门螺杆菌(H.pylori)是一种可在人类胃肠黏膜长期定植的革兰阴性微需氧、有鞭毛的螺旋状细菌,其鞭毛不仅在定植过程中发挥决定性作用,还可以引起免疫炎症帮助细菌逃避人体的免疫反应[1].H.pylori在人群间广泛传播,是已知细菌中对人感染率最高的致病菌,在西方高度工业化国家H.pylori的感染率一直在下降,而在发展中国家和新兴工业化国家,H.pylori感染率一直稳定在一个较高的水平.     

幽门螺杆菌致病因子作用机制研究概述

幽门螺杆菌(Hp)与胃癌、胃炎和胃溃疡等胃肠道相关性疾病密切相关,但其详尽致病机制尚不清楚。既往的研究常集中在Cag A(细胞毒素相关蛋白A)、Vac A(空泡毒素A)、Urease(脲酶)和Dup A(十二指肠溃疡启动蛋白A)等毒力因子上,但这些对于致病机制的揭示仍存在不足。近年来的研究揭示了既往致病因子的新进展,同时发现鞭毛、黏附素相关蛋白及溶血素等在致病机制中也扮演着重要角色。     

重组腺病毒Ad-HGF转染骨髓基质干细胞及其表达的实验研究

目的 构建人肝细胞生长因子(HGF)重组腺病毒表达载体,体外转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),检测HGF基因表达,探讨转HGF基因的BMSCs治疗股骨头缺血性坏死(ANFH)的可行性.方法 利用RT-PCR方法,从共表达人HGF-Met的NIH3T3-H0细胞株中扩增人HGF cDNA,插入腺病毒穿梭质粒pDC316,与辅助质粒共转染HEK293细胞,重组产生重组腺病毒Ad-HGF,PCR鉴定毒种正确后,在293细胞中扩增、纯化,TCID50法测定感染性滴度,然后感染BMSCs,RT-PCR、原位杂交、免疫组化检测转染后细胞中HGF的转录和表达.结果 成功制备了Ad-HGF,感染性滴度为2.6×1010TCID50/ml,转染后的BMSCs在mRNA和蛋白水平均有HGF表达.结论 获得高表达人HGF基因的BMSCs,为其用于早期ANFH的治疗奠定了基础.     

重组腺病毒Ad-sTNFRI-IgGFc转染人气道上皮细胞及其表达的实验研究

目的 构建携带人可溶性肿瘤坏死因子受体I胞外区和IgGFc融合基因的重组腺病毒载体(Ad-sTNFRI-IgGFc),体外转染正常人气道上皮细胞株(HBE135-E6E7),探讨重组腺病毒Ad-sTNFRI-IgGFc转染气道上皮治疗支气管哮喘的可行性.方法 将sTNFRI-IgGFc基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316,与辅助质粒pBHGlox△E1,3Crc共转染HEK293细胞,重组产生Ad-sTNFRI-IgGFc,PCR鉴定毒种正确后,进行扩增、纯化和滴度测定,转染培养HBE135-E6E7,流式细胞术检测转染效率,RT-PCR、免疫组化检测转染后细胞中sTNFRI-IgGFc的表达和转录.结果 成功构建了Ad-sTNFRI-IgGFc,感染性滴度达3×1010TCID50/ml,转染后HBE135-E6E7在mRNA和蛋白水平均有sTNFRI-IgGFc表达.结论 构建的Ad-sTNFRI-IgGFc可有效转染HBE135-E6E7,并在其中高效表达,并能拈抗TNF活性,为将表达sTNFRI-IgGFc腺病毒基因治疗哮喘的实验研究提供了基础.     

荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA基因及其与胃癌转移的关系

Objective To investigate the relationship between tumor metastasis-related Rac1 mRNA expression levels and gastric carcinomas metastasis, and to investigate the significance of Rac1 as a tumor marker for the evaluation of gastric carcinomas metastasis and distinguish between benign and malignant lesions. Methods This experiment used fluorescence quantitative RT-PCR TaqMan probe technology, chose Rac1 target gene fragment, which was cloned into the pET-20b (+) vector, constructed recombinant plasmid, and established the Rac1 mRNA fluorescence quantitative RT-PCR standard curve. And then the Rac1 mRNA levels were detected in 52 cases of gastric carcinoma tissues,52 cases of para-carcinoma tissues and 12 cases of benign gastric disease tissues. Its association with the metastasis of gastric carcinomas was analyzed. Results The positive rates and levels (median, P25-P75) of Rac1 mRNA were 100. 0% ,7.41 ×105 (3. 50 × 105-4. 36 × 106) copies/μl in gastric carcinomas, 46. 2% ,0(0-1.73 × 104) copies/μl in parscarcinoma tissues, 33. 3%, 0(0-3.55 × 103) copies/μl in benign tissues. The positive rates and leves(x2 =43.16,x2Xk-w = 64. 19, P ＜0. 01)among the three groups were significantly different. When the critical value of Rac1 mRNA level was 1.73 × 104 copies/μl determined by ROC, the sensitivity and specificity were 88. 5% and 100% respectively. When the critical value of Rac1 level was 7.49 × 105 copies/μl, the sensitivity and specificity were 57.9% and 78. 6% respectively. ConclusionThe Rac1 mRNA level detected with fluorescence quantitative RT-PCR has reference value to distinguish between benign and malignant lesions and evaluate gastric carcinoma metastasis.