Periostin过表达对鼻咽癌6-10B细胞侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨外源表达periostin蛋白对鼻咽癌(NPC)6-10B细胞侵袭和迁移能力的影响及机制。方法采用脂质体转染技术建立稳定高表达periostin的6-10B细胞,RT-PCR结合Western blotting检测转染效率,Tanswell分析periostin高表达后6-10B细胞侵袭和迁移能力的改变,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性的变化;免疫组织化学检测整合素(integrin)αvβ5在转染periostin前后6-10B细胞中的表达以及其与periostin在鼻咽癌和正常鼻咽黏膜组织中的表达,image-pro Plus 6.0软件进行图像分析及吸光度测定,统计学分析鼻咽癌组织中periostin和integrinαvβ5表达强度的相关性。结果 Periostin过表达的6-10B细胞侵袭、迁移能力明显增强,细胞培养上清中MMP-2、MMP-9活性增加,integrinαvβ5在periostin过表达的6-10B细胞及NPC组织的表达明显强于对照组,Spearman相关性分析显示,integrinαvβ5和periostin在NPC组织中的表达强度成正相关(r=0.682,P=0.000)。结论外源表达periostin能促进NPC的侵袭和转移,其机制可能是通过与NPC细胞膜上integrinαvβ5受体结合而提高MMPs的活性。     

鼻咽癌组织中巨噬细胞帽蛋白的表达

目的探讨巨噬细胞帽蛋白（CapG）在鼻咽癌（NPc）组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学检测NPC组织和正常鼻咽粘膜（NNM）组织中CapG的表达;采用统计学方法分析CapG表达水平与NPC病人临床病理因子的关系。结果CapG在NPC间质中的表达较NNM间质明显上调（P〈0．01）;CapG的表达与NPC的分化程度和临床分期相关（P〈0．01）;在不同性别、年龄组患者NPC组织中CapG表达无明显差异（P〉0．05）。结论CapG在NPC间质中高表达,CapG在肿瘤中的高表达倾向于更晚的临床分期、更差的分化程度（P〈0．01）,提示NPC间质高表达的CapG在NPC发生发展过程中可能起着一定作用。     

一氧化氮合酶在急性胰腺炎大鼠胰岛中的表达

在SD大鼠以胰胆管结扎法建立急性胰腺炎模型，在急性胰腺炎大鼠胰岛β细胞神经元型一氧化氮合酶(nNOs)表达和血清一氧化氮(N0)水平下降，血清葡萄糖和淀粉酶水平升高，提示急性胰腺炎时内分泌紊乱可能与胰岛β细胞nNOS表达下调有关。     

温热对小白鼠精子穿透能力的影响

本文选用15组(每组3～4只)健康的成年雄性小白鼠,从附睾尾和输精管中取出精子,分别在37℃、40℃、43℃温育3小时后,进行体外受精,测定精子穿透率,分别为54.1％、56.2％和46.4％,对照组与温热组穿透率差异无统计学意义。从而进一步说明小白鼠精子对温热不敏感。     

人胚胎胃肠及胰腺D细胞发生的研究

用免疫细胞化学方法研究人胚胎各时期胃肠胰的Ｄ细胞发生及其形态与功能的关系。结果发现：Ｄ细胞最早出现于６周零５天胚的十二指肠，７周零３天胚的胰、胃、空肠，７周零６天胚的回肠，８周零４天胎的结肠及１０周零５天胎的阑尾；细胞密度在胚期低，胎期逐增，至胎晚期又依次在胰、胃窦、十二指肠、胃体、空肠、回肠、升结肠及阑尾中降低，且肠绒毛顶端可见衰老的Ｄ细胞。提示胚胎Ｄ细胞的发生与胃肠胰的发育有关。     

Caveolin-1表达及其与胃癌生物学行为关系的研究

目的 :探讨候选抑癌基因Caveolin 1在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学SABC法对 43例胃癌存档蜡块组织及 15例胃炎活检标本进行Caveolin 1蛋白检测 ,采用 χ2 检验进行统计学分析。结果 :Caveolin 1在胃癌的阳性表达率为 3 0 2 % ( 13 / 43 ) ,明显低于胃炎组 10 0 % ( 15 / 15 ) ,P <0 0 1;其中高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌中的阳性率分别为 6/ 6、3 / 5、17 4% ( 4 / 2 3 ) ,而印戒细胞癌及黏液腺癌中无阳性表达 ,五者之间差异有统计学意义 ,P <0 0 1;浸润至浆膜或超过浆膜组的Caveolin 1表达阳性率13 8% ( 4 / 2 9)明显低于未达浆膜组 64 3 %( 9/ 14 ) ,两组之间差异有统计学意义 ,P <0 0 1;淋巴结转移组Caveolin 1阳性率 7 7%( 1/ 13 )明显低于无淋巴结转移组 40 0 %( 12 / 3 0 ) ,两组之间差异有统计学意义 ,P <0 0 5。结论 :候选抑癌基因Caveolin 1的表达与胃癌细胞的分化、浸润和转移密切相关 ,对胃癌生物学行为评估有重要意义     

应用激光捕获显微切割及蛋白质组学技术筛选鼻咽癌间质相关蛋白

目的筛选与鼻咽癌（NPC）发生发展相关的特异性间质蛋白。方法采用激光捕获显微切割技术（LCM）,获取高纯度的NPC间质和正常鼻咽黏膜（NNM）间质,二维凝胶电泳（2-DE）及质谱技术,分离鉴定间质相关蛋白。Western blot及组织芯片免疫组织化学技术,验证差异蛋白S100A9在鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜组织中的表达水平。结果建立了鼻咽癌间质和正常鼻咽间质的2-DE图谱,高通量筛选与肿瘤发生相关的间质蛋白,质谱鉴定得到60个差异蛋白。Western blot及免疫组织化学技术验证结果与蛋白质组学结果一致。结论这些差异表达的蛋白将有助于揭示鼻咽癌细胞和周围间质的关系。对间质蛋白功能的进一步研究,将有助于解析间质在肿瘤发生发展中的作用机制,从间质途径寻找肿瘤治疗的靶标。     

新生大鼠成纤维细胞原代培养

目的探讨新生sD大鼠成纤维细胞的培养方法。方法采用胰酶消化法和组织块贴壁法原代培养成纤堆细胞。采用HE染色及波形蛋白（Vimentin）免疫细胞化学染色对培养细胞进行鉴定。结果两种方法均能培养出成纤维细胞,其中酶消化法一次性可获得较多细胞,但细胞状态较差,贴壁慢,生长慢;组织块贴壁法短时间内可长出大量成纤维细胞,一周即可传代。HE染色后倒置相差显微镜下观察细胞形态典型,免疫细胞化学染色结果显示Vimentin呈阳性反应。结论组织块贴壁培养法是获取成纤维细胞简单,可行,快速的方法。     

新生期脂多糖暴露对大鼠睾丸发育及波形蛋白表达的影响

目的探讨新生期脂多糖暴露对睾丸发育及波形蛋白表达和分布的影响。方法选取新生雄性SD大鼠150只,随机分为对照组和实验组,实验组于生后第4～12d期间,隔日皮下注射脂多糖（75μg/kg）,共5次,对照组在相同时间皮下注射等容生理盐水。常规饲养至生后14d、21d、28d、包皮分离日、60d、77d分批取材,采用组织学和免疫组化技术,观察脂多糖对大鼠睾丸发育、波形蛋白的表达与分布的影响。结果①与同龄对照组相比,实验组大鼠生精小管横径变小,生精上皮变薄,细胞排列紊乱,生精细胞与支持细胞分离,脱落至管腔,性成熟以后,管腔内精子生成减少;②对照组波形蛋白阳性染色从基膜围绕支持细胞核形成棕黄色的环,并呈辐射状延伸至管腔;实验组支持细胞变矮、变圆,波形蛋白仅见于核周或核的基部胞质,伸向管腔的辐射状条带变短或消失。结论新生期脂多糖暴露,可改变支持细胞波形蛋白的有序分布,造成生精细胞脱落,干扰生精细胞的发育成熟,这种影响可延续至成年期,导致成年期精子生成减少。