Periostin过表达对鼻咽癌6-10B细胞侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨外源表达periostin蛋白对鼻咽癌(NPC)6-10B细胞侵袭和迁移能力的影响及机制。方法采用脂质体转染技术建立稳定高表达periostin的6-10B细胞,RT-PCR结合Western blotting检测转染效率,Tanswell分析periostin高表达后6-10B细胞侵袭和迁移能力的改变,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性的变化;免疫组织化学检测整合素(integrin)αvβ5在转染periostin前后6-10B细胞中的表达以及其与periostin在鼻咽癌和正常鼻咽黏膜组织中的表达,image-pro Plus 6.0软件进行图像分析及吸光度测定,统计学分析鼻咽癌组织中periostin和integrinαvβ5表达强度的相关性。结果 Periostin过表达的6-10B细胞侵袭、迁移能力明显增强,细胞培养上清中MMP-2、MMP-9活性增加,integrinαvβ5在periostin过表达的6-10B细胞及NPC组织的表达明显强于对照组,Spearman相关性分析显示,integrinαvβ5和periostin在NPC组织中的表达强度成正相关(r=0.682,P=0.000)。结论外源表达periostin能促进NPC的侵袭和转移,其机制可能是通过与NPC细胞膜上integrinαvβ5受体结合而提高MMPs的活性。     

成人腹主动脉分支长度和外径的测量

目的掌握腹主动脉及其分支血管的位置、长度和管径,以指导外科临床各种插管操作。方法采用血管X线造影、剥离、血管铸型,分别对32具成人尸体的腹主动脉及其分支血管的位置、长度、外径进行观测和相关统计分析,提供腹主动脉及其部分分支血管的位置、管径及长度的具体数据。结果肝总动脉外径4.72±0.12 mm,胃左动脉外径3.11±0.09 mm,胃右动脉外径1.89±0.05 mm,脾动脉长度66.0±15.0 mm、外径9.74±3.0 mm,胰十二指肠下动脉长度12.9±8.20 mm、外径2.81±0.96 mm,中结肠动脉长度36.8±21.3 mm、外径3.50±1.70 mm,右结肠动脉长度39.7±18.0 mm、外径2.48±0.60 mm等。结论为临床上进行选择性动脉造影、微创术、动脉栓塞疗法和动脉插管化疗提供具体的参考数据。     

锌指基因ZNF569的转录活性分析

目的构建GAL4-ZNF569和pCMV-Tag2C-ZNF569重组质粒。通过它控制报告基因的表达情况来确定它的转录激活/抑制活性以及它是否参与了细胞信号途径调控。结果GAL4-ZNF569和pCMV-Tag2C-ZNF569重组质粒转染细胞后发现ZNF569具有转录抑制活性并能抑制SRE和AP-1的转录活性。对ZNF569的分段结构域的转录活性分析表明ZNF569的KRAB结构域和C2H2锌指结构域都具有抑制转录因子转录活性的作用。结论由此笔者得出结论认为ZNF569的KRAB框和C2H2锌指都具有抑制因子作用,为进一步研究ZNF569在真核细胞中的信号调控奠定了一定的实验基础。     

鼻咽癌组织中巨噬细胞帽蛋白的表达

目的探讨巨噬细胞帽蛋白（CapG）在鼻咽癌（NPc）组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学检测NPC组织和正常鼻咽粘膜（NNM）组织中CapG的表达;采用统计学方法分析CapG表达水平与NPC病人临床病理因子的关系。结果CapG在NPC间质中的表达较NNM间质明显上调（P〈0．01）;CapG的表达与NPC的分化程度和临床分期相关（P〈0．01）;在不同性别、年龄组患者NPC组织中CapG表达无明显差异（P〉0．05）。结论CapG在NPC间质中高表达,CapG在肿瘤中的高表达倾向于更晚的临床分期、更差的分化程度（P〈0．01）,提示NPC间质高表达的CapG在NPC发生发展过程中可能起着一定作用。     

人类心脏发育候选基因ZNF569的生物信息学分析

目的 分析人类心脏发育候选基因ZNF569的生物信息学,对其功能研究提供指导意见.方法 利用生物信息学网站及生物软件对人类心脏发育候选基因ZNF569进行生物信息学分析.结果 ZNF569是一个新的人类KRAB/C2H2型锌指蛋白基因.此基因在基因组DNA上长约56.28 kb,定位于19q13.12.开放阅读框全长2061个碱基,含6个外显子,5个内含子,编码一个长686个氨基酸残基的蛋白质.该蛋白包含一个KRAB结构域和18个锌指结构域,进化分析表明各种真核生物中都存在ZNF569的同源蛋白,而ZNF569蛋白与鼠ZNF74蛋白的相似度达到94%,它们之间的蛋白质序列保守度更高.ZNF569本身18个锌指结构蛋白质序列也高度保守.结论 ZNF569及其同源蛋白构成了一个在进化中高度保守的新的KRAB-ZF基因,而它的功能尚未见报道.     

人类心发育候选基因ZNF569融合EGFP真核表达载体的构建及表达

目的:构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569,并鉴定其在哺乳动物COS-7细胞系能否正确表达.方法:把ZNF569基因ORF定向克隆入带有EGFP报告基因的真核表达载体,构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569,脂质体介导将pEGFP-ZNF569转染入哺乳动物COS-7细胞,以一步法RT-PCR检测其在哺乳动物COS-7细胞中的表达情况.结果:双酶切及测序鉴定表明成功构建真核表达重组体pEGFP-ZNF569,并在COS-7细胞中成功地表达了融合荧光蛋白.RT-PCR检测显示RT-PCR扩增产物与ZNF569目的基因片段大小相符,确实源于重组质粒转录后的mRNA.结论:真核表达重组体pEGFP-ZNF569的成功构建及在体外真核细胞中有效表达,为进一步研究ZNF569在心发育过程中的信号调控奠定了一定的实验基础.     

隐睾下降固定术后生殖细胞的凋亡及eNOS和iNOS的表达

目的:探讨隐睾下降固定术后生精细胞的凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在隐睾下降固定后生精细胞中的表达。方法:将雄性SD大鼠(22日龄)随机分为隐睾组和假手术组,建立右侧隐睾模型。术后12天将隐睾组大鼠随机分为隐睾对照组和隐睾固定组,建立隐睾下降固定模型。术后第24天脱颈椎处死大鼠,取血清测定NO含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,常规组织学切片观察各组大鼠右侧睾丸生精上皮形态,原位末端标记法(TUNEL)结合流式细胞术(FCM)检测各组睾丸生精细胞凋亡情况,Western blot和免疫组化分别检测各组大鼠右侧睾丸组织eNOS、iNOS蛋白表达的变化。结果:隐睾对照组血清中NO浓度、NOS活性以及生精细胞凋亡率最高,隐睾固定组则高于假手术组。Western blot检测发现隐睾固定组中eNOS和iNOS含量均高于假手术组,免疫组化结果显示在假手术组睾丸生精上皮中仅有eNOS和iNOS的弱表达,而隐睾固定组生精上皮中两者均有较强表达。结论:隐睾下降固定术后睾丸生精功能的改善与生精细胞凋亡减少有关。NO是隐睾下降及固定后生精细胞仍过度凋亡的重要生物活性因子。     

在心脏组织表达的一个人类新基因

KRAB/C2H2型锌指蛋白是一类具有重要功能的转录调节因子。初步克隆了一个新的人类KRAB/C2H2型锌指蛋白基因,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF569。此基因在基因组DNA上长约56.28 kb。定位于19q13.12.ORF全长2061个碱基,含6个外显子,5个内含子,编码一个长686个氨基酸残基的蛋白质。该蛋白包含一个KRAB结构域和18个锌指结构域。Northern杂交结果表明,ZNF382 mRNA在早期胚胎时期就开始表达,在不同时期人类胚胎组织中广泛表达,包括脑,心脏,肝和骨骼肌。在成人组织中重点表达在心脏,在肝,胰和骨骼肌中也有表达,其结构和表达特征预示着ZNF569在心脏发育和功能的发挥起着潜在的作用。     

组织学与胚胎学实验教学中融入互动式教学法的实践

组织学与胚胎学是一门重要的医学基础课。为了解决组织学与胚胎学实验教学中抽象、微观、晦涩难懂、易混淆的形态学教学难题,通过多年在组织学与胚胎学实验教学中应用互动式教学法,总结出互动式教学法在组织学与胚胎学实验教学改革实施中的应用措施及实施互动式教学法的体会和应注意的事项。     

建构主义教育理论在组织胚胎学教学中的应用

建构主义教育理论强调以主动的、互动的方式进行知识的学习。本文根据建构主义教育理论的观点,结合组织胚胎学课程的特点,构建了“自主学习”的教学模式,通过教师自主学习情境的创设和问题的提出、学生自主学习和知识构建、学生协作学习与讨论交流、学生自我评价与创新,激发学生自主学习、互动学习的积极性,引导学生独立思考,培养学生的创造性思维能力,提高学生的综合素质。