基于大鼠急性心肌缺血模型冠心丹参方有效组分配伍作用评价

目的观察冠心丹参方对垂体后叶素致急性心肌缺血模型大鼠的保护作用,并对其有效组分配伍进行评价。方法采用舌下静脉注射垂体后叶素致急性心肌缺血模型的方法,观察不同配伍药物对注射垂体后叶素后不同时间点大鼠心电图ST段、T波的位移值,急性心肌缺血梗死范围及心肌组织的病理学检查。结果冠心丹参方中药物不同组分配伍均能明显对抗垂体后叶素引起急性心肌缺血大鼠心电图ST段、T波的变化,能降低急性心肌缺血梗死范围、保护心肌细胞。冠心丹参方组对心肌缺血的保护作用最佳。结论冠心丹参方中药物不同组分配伍具有显著对抗垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的作用,其效应强度为:冠心丹参方>丹参+三七>丹参+降香>丹参>三七+降香。有效组分配伍的药效结果符合中药方剂配伍原则。     

柴胡桂枝干姜汤治疗失眠的功效网络研究

目的运用网络药理学分析方法,明确柴胡桂枝干姜汤治疗失眠的作用机制。方法运用TCMSP、TCMID数据库锁定柴胡桂枝干姜汤7味药的药物靶标,TTD、DrugBank、PubMed数据库查找失眠的疾病靶点,构建"疾病-方剂-靶点"网络,用STRING和Cytoscape分析软件对其关键靶点进行富集分析,明确作用机制。结果柴胡桂枝干姜汤蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络包含靶标640个,失眠的PPI网络包括靶标175个,富集分析得29个关键靶标和其间80条互作关系;GO富集分析及KEGG途径分析结果显示柴胡桂枝干姜汤中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、槲皮素、碳酸钙、6-姜辣醇、山柰酚、汉黄芩素等171个活性成分主要通过CACNA1C、GABRA1、GABRA2、GABRB3、GABRA3等29个关键靶标及突触信号传导、膜电位的调节、G蛋白偶联受体信号通路等生物过程,神经递质受体活性、离子门控通道活动、GABA-A受体活性等分子功能,质膜、突触等细胞组成作用于神经活性配体-受体相互作用、逆行内源性大麻素信号传导、5-羟色胺能突触等多条作用通路发挥治疗失眠作用。结论柴胡皂苷a、柴胡皂苷d等171个活性成分是柴胡桂枝干姜汤治疗失眠的药效物质基础,神经活性配体-受体相互作用等通路和CACNA1C等29个靶标构成了其发挥"疏肝健脾、调和阴阳"的功效作用网络,为临床合理运用柴胡桂枝干姜汤治疗失眠提供了网络药理学证据。     

胰岛素治疗与2型糖尿病患者视网膜病变的关系

目的：探讨胰岛素治疗与2型糖尿病视网膜病变的关系。

方法：收集2016-06/2018-01于我院内分泌科住院的2型糖尿病患者415例830眼。根据不同降糖用药、眼底造影检查结果、胰岛素用量分别进行分组，收集各组患者一般资料，采集清晨空腹静脉血，测量空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹C肽等指标。分析不同用药和不同视网膜病变组间患者空腹血糖、HbA1c、空腹C肽的变化以及胰岛素用量和糖尿病视网膜病变的相关关系。

结果：不同用药组间糖尿病视网膜病变程度不同，不同视网膜病变组间患者的胰岛素用量不同(P<0.05)，2型糖尿病患者并发视网膜病变的胰岛素用量切点值为37.5U/d。胰岛素用量>37.5U/d组中2型糖尿病患者的视网膜病变较多，且胰岛素用量与2型糖尿病患者视网膜病变程度呈正相关。

结论：不同降糖治疗对糖尿病视网膜病变的影响不同，使用胰岛素治疗与2型糖尿病性视网膜病变的发病及严重程度呈正相关。     

不同提取工艺对炒决明子急性毒性和物质基础的影响

目的 研究不同提取工艺对炒决明子急性毒性和物质基础的影响,为炒决明子的临床安全用药提供依据。方法 分别制备炒决明子水提物和醇提物,用高效液相色谱法测定大黄酚和橙黄决明素含量。预试验结果表明由于受给药体积及浓度的限制,难以找出炒决明子水提物组和醇提物对小鼠的半数致死量（LD₅₀）,进行最大耐受量（MTD）或最大给药量（MFD）的测定。正常小鼠按性别、体质量随机分成3组：对照组、炒决明子水提物组、炒决明子醇提物组,每组20只。水提物组按40.0 mL/kg给药1次,12 h后无死亡情况,进行第2次给药。醇提物组按40.0 mL/kg给药1次,12 h内出现死亡情况,不进行第2次给药,对照组小鼠ig相同体积的水。观察小鼠体质量、饮食、饮水,14 d内可能出现的呼吸频率改变、呼吸困难、动度、对外反应情况、排便异常等,检测血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）水平。结果 制备的炒决明子水提物按生药量计为0.952 g/mL,大黄酚、橙黄决明素分别占生药的0.145 1%、0.018 5%;制备的炒决明子醇提物按生药量计为3.950 g/mL,大黄酚、橙黄决明素分别占生药的0.144 9%、0.024 8%。炒决明子水提物对正常小鼠的MFD为114.96 g/kg,相当于临床成年人日用量的588倍;炒决明子醇提物对正常小鼠MTD为178.40 g/kg,相当于临床成年人日用量的832.5倍。炒决明子水、醇提取物的急毒主要表现为：出现间歇扭体反应、便溏、呼吸频率减慢、呼吸困难、精神萎靡、俯卧昏睡等,其中便溏现象尤为明显,且醇提物>水提物。给药后,炒决明子水提物组和醇提物组小鼠的ALT、AST、BUN、Cr指标升高,与对照组比较,水提物组ALT、BUN、Cr水平呈显著性差异（P<0.01、0.001）,AST未见显著性差异;醇提物组ALT、BUN、Cr水平呈显著性差异（P<0.001）,AST未呈现显著性差异。结论 大剂量炒决明子水、醇提物对正常小鼠的肝、肾功能均有影响,其中对肾脏的影响较为严重;临床应用中,尽量选用炒决明子水提工艺以保证安全有效。     

整合药理学方法的心可舒片干预动脉粥样硬化作用网络机制探讨

目的探究心可舒片干预动脉粥样硬化(AS)作用的分子机制,对于心可舒片二次开发和临床应用提供参考。方法用整合药理学平台对心可舒片干预AS的关键靶点和通路进行预测,探究其干预AS的分子机制。结果通过建立心可舒片"中药-成分-靶点-通路"网络进行预测和分析,得到相关有效成分80个,确定了B4GALT4、B4GALT2、PRKCD、GCK、GNB1等关键靶点,明确了内分泌系统、甲状腺激素、神经系统、雌性激素和趋化因子等富集通路与其抗AS作用相关。结论心可舒片通过对PI3K/Akt/eNOS和Raf/MEK/ERK途径的共同调节,保护血管内皮细胞,从而达到干预AS的效果。     

屋尘螨Der p7基因的克隆表达、纯化及过敏原性鉴定

目的探讨屋尘螨Der p7基因的克隆表达、纯化及过敏原性分析。方法逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)扩增屋尘螨Der p7基因,经酶切、连接后转化大肠杆菌,挑取阳性单克隆菌落,扩增培养后测序鉴定正确后大量表达;采用亲和层析法纯化表达产物,免疫印迹(Western blot)法鉴定其过敏原性;生物信息学方法分析其基因的同源性。结果 RT-PCR显示Der p7基因片段大小约700 bp;大量表达后进行的SDS-PAGE电泳分析显示,Der p7蛋白表达于沉淀物中,以包涵体蛋白为主,分子质量约39 kDa。Western blot显示该重组基因所表达的蛋白可与尘螨过敏患者的血清起反应,表明该重组蛋白具有过敏原性。生物信息学分析显示克隆的Der p7基因与Der f7基因的同源性约79.14%。结论本实验成功获得大量表达及纯化后具有过敏原性的Der p7蛋白,对临床上完善对过敏性疾病的检测与治疗具有积极的意义。     

基于“四海”理论针刺联合申脉穴与升陷汤治疗心肺两虚型睡眠障碍的临床研究

目的 前瞻性比较基于“四海”理论针刺联合申脉穴及升陷汤与口服阿普唑仑片治疗心肺两虚型睡眠障碍患者的临床疗效。方法 将60例心肺两虚型患者随机分为观察组（30例，脱落1例）和对照组（30例，脱落2例）。观察组予针刺结合中药治疗，取百会穴、风府穴、大椎穴、人迎穴（双）、申脉穴（双），留针30min,1次/d，同时服用升陷汤，药物组成：黄芪30g、知母15g、升麻10g、桔梗10g、柴胡5g，以水450mL煮取150mL，分2次温服，以上治疗/d次，每周5次。对照组予口服阿普唑仑片治疗，0.4mg/次，每晚睡前30min口服。两组均治疗3周，治疗结束后1个月随访，比较两组治疗前、治疗后、随访时的匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）评分、中医证候积分情况。结果 观察组总有效率为93.10%(27/29)，优于对照组的82.14%(23/28,P<0.01)。两组患者治疗后及随访时PSQI评分、中医证候积分均较治疗前降低（P<0.01），且观察组均低于对照组（P<0.05）。随访时与治疗后比较，观察组差异无统计学意义（P>0.05），对照组PSQI评分高于治疗后，差异有统计学意...     

胆汁酸和MAPK信号通路对HepG2细胞中PPARα转录表达的调控作用

目的 探究胆汁酸(bile acids, BAs)和MAPK信号通路对HepG2细胞中人类过氧化物酶体增殖物激活受体α(human peroxisome proliferation activated receptor α,hPPARα)转录表达的调控作用。方法 PCR扩增hPPARα基因启动子片段P1(-764～+228 bp)、P2(-2090～-744 bp)、P2-1(-744～-1287 bp)、P2-2(-1548～-1265 bp)、P2-3(-2090～-1540 bp),将扩增得到的片段分别插入荧光素酶报告基因质粒(pGL4-luc2P-Hygro)的启动子上游。将包含hPPARα基因启动子片段的荧光素酶报告基因质粒转染HepG2细胞，分别用U0126(ERK1/2信号通路选择性小分子抑制剂)、SP600125(JNK1/2信号通路选择性小分子抑制剂)、石胆酸(lithodeoxycholic acid, LCA)、脱氧胆酸(deoxycholic acid, DCA)、鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid, CDCA)、甘氨脱氧胆酸(glycode...