高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系产生炎性因子

目的研究高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞系(HBMECs)产生炎性因子及其机制。方法以相同渗透压的甘露醇为对照,高浓度尿素(25 mmol/L)干预HBMECs 3、6、12和24 h后,免疫荧光法观察细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α、i NOS、环氧合酶-2(cycloxygenase-2,COX-2)、核因子κB(NF-κB)/P65和p-P65的表达水平。一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞NO含量。结果高浓度尿素增强细胞内TNF-α和i NOS表达。细胞TNF-α、COX-2和p-P65蛋白水平在3和6 h明显高于对照组(P0.01);i NOS蛋白水平持续增高(P0.01)。NO含量在3 h明显增多(P0.05)。结论高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞产生炎性因子。     

以运动系统为例的器官系统整合课程教学改革实践

为弥补"以学科为中心"的教学不足,以器官系统为中心的教学成为医学教学改革的趋势。本研究以"运动系统"为例,从教学实施、教学质量监督、配套考核制度和教学成效四方面探讨器官系统为中心的整合医学教学模式的实践情况。     

急性高眼压大鼠视网膜胶质细胞水通道蛋白-4的内化

目的:观察急性高眼压时大鼠视网膜胶质细胞水通道蛋白-4(AQP4)内化的时空变化及其规律,并探讨其与视网膜水肿的关系.方法:建模并分组;应用免疫荧光双标鉴定视网膜AQP4阳性细胞;观察AQP4与早期内涵体抗原1(EEA1)及晚期内涵体标记物甘露糖-6-磷酸受体(MPR)的共表达规律.结果:在正常视网膜内,表达AQP4的星形胶质细胞胞体位于节细胞层,Müller细胞的胞体位于内核层.正常及假手术组未见AQP4与EEA-1、MPR的共表达;高眼压作用不同时间,AQP4与EEA1共表达细胞的分布部位及其占AQP4阳性细胞比例都有改变,在高眼压作用60 min,AQP4与EEA1共表达细胞的比例达到最高值,AQP4与MPR共表达细胞分布的部位也有变化.结论:高眼压可诱导视网膜胶质细胞AQP4的内化,即AQP4经过内吞进入早期内涵体,再转运至晚期内涵体.AQP4的内化可能对肿胀的胶质细胞起保护作用.     

渗透压改变与星形胶质细胞水通道蛋白9表达的关系

目的:探讨渗透压对星形胶质细胞水通道蛋白9(AQP9)表达的影响.方法:通过H-E显色观察渗透压改变(对照组、低渗组和高渗组)对细胞形态的影响,台盼蓝染色评价细胞活力的变化,免疫细胞化学、原位杂交研究星形胶质细胞AQP9及其mRNA的表达变化.结果:对照组细胞形态、活力、AQP9及其mRNA的表达在各时间点均无明显变化.低渗培养导致细胞水肿,细胞活性下降,AQP9及其mRNA的表达水平明显高于对照组,并随低渗作用的增强和时间的延长而上调.高渗作用可导致细胞皱缩,细胞活性下降,AQP9及其mRNA表达在12 h内持续增加后下降,至24 h后仍高于对照组.结论:低渗液作用下AQP9及其mRNA的表达上调,作为一种病理性适应反应参与了胶质细胞水肿的形成.高渗作用早期(约12 h内),AQP9的表达上调对高渗型细胞脱水起到重要的代偿作用.     

Syntenin上调FAK磷酸化水平促进人脑胶质瘤细胞迁移的分子机制

目的探讨Syntenin促进人脑胶质瘤细胞迁移的分子机制。方法采用划痕实验和Western blot检测CHG-5、稳定表达人源性Syntenin的CHG-hS细胞在纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和多聚赖氨酸(Poly-l-lysine,PL)两种基质表面迁移能力、FAK磷酸化位点及相关信号分子的变化情况;分别在P38MAPK特异性抑制剂SB239063和PI3K特异性抑制剂LY294002处理后,FN基质上CHG-5、CHG-hS细胞迁移能力和下游信号分子JNK和AKT磷酸化水平的改变。结果细胞划痕实验结果显示,CHG-hS细胞在FN表面的运动能力显著高于CHG-5细胞(P<0.05);而在多聚赖氨酸包被的培养板上,CHG-hS细胞的运动能力与CHG-5组细胞表面无显著性差异(P>0.05)。Western blot检测结果显示,FN作用下CHG-hS细胞中FAK Tyr397、FAK Tyr576、FAK Tyr925位点的磷酸化水平随时间延长而逐渐升高(P<0.05),而FAK FAK Tyr861位点的磷酸化水平没有变化(P>0.05);相关信号Src、JNK、AKT的磷酸化水平也随时间延长而升高(P<0.05)。分别采用SB239063和LY294002处理后,伴随着p-JNK和p-AKT的磷酸化水平减弱,CHG-hS迁移能力下降。结论 Syntenin通过与p-Src结合,随后触发FAK Tyr397、FAK Tyr925、FAK Tyr576位点的磷酸化作用,最大程度的激活FAK并上调JNK、AKT等下游信号分子的磷酸化水平,最终通过Syntenin-Src/FAK/MAPK和Syntenin-Src/FAK/PI3K两条通路增强FN相关胶质瘤细胞的迁移能力。     

严重烧伤后大鼠脑组织AQP4的表达变化及其与血浆AVP的相关性

背景：严重烧伤后脑水肿常发生在烧伤后早期,是导致病人死亡的重要原因之一。研究烧伤后脑水肿发生、发展规律,探讨其发生机制,对临床早期诊断、治疗具有十分重要的意义。 目的：研究严重烧伤后脑水肿病理过程中AQP4 及其mRNA表达变化及其与血浆AVP水平的相关性。 设计和实验时间：本实验于2007年在重庆医科大学神经科学试验中心设计,并于2008年在重庆医科大学神经科学研究中心完成。 材料：健康成年wistar大鼠180只,雌雄不拘,体重250g-300g,由重庆医科大学实验动物中心提供。免疫组化试剂盒、原位杂交试剂盒购自北京中山公司和博士德生物公司。 方法：采用30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,干湿重法测脑组织含水量,免疫组化、原位杂交、Western blotting、RT-PCR检测AQP4及其 mRNA的表达变化,并用放射免疫分析法（RIA）观察血浆AVP水平的动态变化。 结果：严重烧伤后脑含水量有不同程度增加,AQP4及其 mRNA在视上核、视交叉上核、室旁核、海马、脉络丛、大脑皮质等部位表达上调,Western blotting、RT-PCR结果与免疫组化和原位杂交结果基本一致。血浆AVP水平在烧伤后也有不同程度升高,烧伤后6h达高峰。在整个脑水肿过程中,AQP4及其mRNA的表达分别与血浆AVP水平呈高度正相关（r=0.848,P<0.01;r=0.807, P<0.01）。 结论:严重烧伤后AQP4及其 mRNA表达增强,提示其在烧伤后脑水肿形成过程中起重要作用。血浆AVP水平上调与AQP4及其mRNA表达规律一致,AVP可能对AQP4 及其mRNA在脑组织的表达有一定调节作用。     

非临床专业解剖学线上教学的效果分析与思考*

为有效应对疫情,确保疫情防控期间"停课不停学"[1-4],重庆医科大学积极开展疫情期间线上教学工作.非临床专业的解剖学学时少,本教研室结合其教学目标制定了全新的线上教学模式,并积累了一些经验.在后疫情时代,对于这些专业,仍延续线上教学为主的教学模式.现将本教研室在疫情期间线上课程建设的过程及存在的问题进行浅析,供同行参考.     

多媒体网络应用于人体解剖学教学中的体会

网络教育正以一种势不可挡的趋势伴随着人类发展，其基本特征是集多种媒体功能于一身，将图、文、声、画、视频等诸多信息媒体有机地进行组合、显示共同完成新的教育技术条件下的视听教学。将这种教学理念引入到人体解剖学教学中。充分利用多媒体技术和网络丰富的信息资源，真正实现资源共享，将对医学教学大有裨益。文章主要探讨利用多媒体技术和网络资源改进医学人体解剖学教学的体会。     

谈教育心理学在解剖学教学中的应用

为适应新世纪医学教育的发展，将教育心理学的原理和方法应用到教学实践中，从制定合理可行的教学计划、采用现代化的教学手段及使用创造性的教学方法入手，在多个教学环节发挥教育心理学的作用，以提高教学质量，为社会输送合格的医学人才。     

脑组织中水转运的分子机制

脑组织中水的代谢平衡对于其正常功能的维持具有极其重要的意义，近年来研究发现水通道蛋白(aquaporin，AQP)和一些离子转运体广泛分布于脑组织，在水的代谢调节过程中发挥了不可忽视的作用。因而，研究脑组织中分布的多种AQP(AQP1，AQP3，AQP4，AQP5，AQP8，AQP9)以及离子转运体的生理功能及调节机制，对揭示脑组织水代谢障碍疾病的病理机制有重要意义，可为临床治疗和新药开发提供理论基础。