人神经营养素-4基因的克隆及表达

目的 通过基因工程的方法扩增人神经营养素-4(hNT-4)cDNA,在大肠杆菌中表达hNT-4,为研究hNT-4的生物学作用提供材料.方法 以人胎脑RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hNT-4 cDNA,将其插入的质粒pGEM-T中.将经过序列分析确定的hNT-4 cDNA插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达载体pGEX-6p-1-NT-4,用SDS-PAGE法测定融合蛋白在大肠杆菌中的表达.结果 经序列测定分析,克隆的hNT-4 cDNA核苷酸序列与已发表序列(GenBank,M86528)完全一致,并获得了高效表达hNT-4的重组菌株.结论 体外成功扩增hNT-4 cDNA,并在原核细胞中高效表达了hNT-4.     

术中并发高渗性糖尿病昏迷呼吸停止抢救成功1例报道

本文介绍术中并发高渗性糖尿病昏迷呼吸停止抢救成功1例的经验。     

胃癌术后复发原因及再手术26例分析

目的分析胃癌术后复发因素及其诊断治疗。方法对1994～2008年间经胃镜活检或胃肠钡餐证实为胃复发癌的临床资料进行分析。结果复发胃癌37例，再手术26例，实行胃空肠吻合术15例，吻合口瘘死亡1例，根治性胃癌切除6例，食管-P形空肠Roux-en-y吻合5例，其后1年内生存7例，存活3年内4例。结论早期诊断，严格掌握手术适应证、合理的手术方法以及术后的综合治疗是改变病人预后的重要因素。     

腹腔镜胆囊切除术致胆管损伤19例诊治体会

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术致胆管损伤的原因、预防和诊治方法.方法:对19例LC术后胆管损伤的临床资料进行回顾性分析.结果:LC手术19例中7例为一期修补或吻合加T管引流,1例经ERCP胆管内球囊扩张疗法,余11例均行胆管空肠Roux-en-Y吻合术.19例获随访4年,其中2例死亡,优良率89.47%. 结论:医源性胆管损伤是LC的常见并发症,是可以避免的,胆管空肠Roux–en-Y吻合术是医源性胆管损伤或损伤性狭窄修复重建的首选方法.     

低剂量奥氮平治疗老年慢性失眠症的临床观察

目的:探讨对老年慢性失眠症的有效治疗方法.方法:用随机对照方法,将120例老年慢性失眠症患者按随机数字表法分为奥氮平组和阿普唑仑组,治疗4周.采用匹兹堡睡眠质量指数(pittsburgh sleep quality index,PSQI)及药物不良反应量表评定临床疗效和不良反应.结果:奥氮平组在治疗第四周时PSQI总分、汉密顿焦虑量表(Hamilton anxiety scale,HAMA)、汉密顿抑郁量表(Hamilton depression raling scale,HAMD)、临床显效率分别为(5.2±1.8)分、(11.5±5.4)分、(5.1±2.3)分、91.7％,明显优于阿普唑仑组(6.8±2.5)分、(17.5±7.8)分、(9.9±5.8)分、68.3％,差异具有显著性(P＜0.05).结论:低剂量奥氮平不仅能显著改善慢性失眠症患者的睡眠状况,而且可以明显减少患者日常功能的缺失.     

Hsp100/Clp ATPase对变异链球菌毒力表达的调控及机制的研究进展

变异链球菌是龋病的始动因子,依赖其产酸、耐酸及形成生物膜等能力成为了口腔致龋环境中的优势菌。三磷酸腺苷（ATP）依赖的内肽酶Clp（Clp ATPase）属于热休克蛋白100家族（Hsp100）成员,通过调控基因表达和控制关键蛋白的活性影响细菌的多种生物学性能。Hsp100/Clp ATPase中某些成员可结合ATP依赖的丝氨酸蛋白水解酶ClpP形成功能复合体,活化、重组和降解变性蛋白质,维持细菌的蛋白质稳态,辅助细菌抵抗严苛的口腔环境。特异性靶向变异链球菌Hsp100/Clp ATPase有望为龋病防治提供新的思路和方法。本文就Hsp100/Clp ATPase的结构和分类,对变异链球菌基因、蛋白及生物学行为调控,及Hsp100/Clp ATPase靶向药物作用等研究进展进行系统阐述,为进一步分析Hsp100/Clp ATPase与变异链球菌致龋毒力的关系,研发抗龋药物候选靶标奠定基础。     

CBX4 在前列腺癌中的表达及意义

目的：探究 CBX4 在前列腺癌组织中的表达情况、对前列腺癌细胞铁死亡的影响以及临床意义。方法：利用 Oncomine、UALCAN 和 Human Protein Atlas（HPA）数据库分析 CBX4 在前列腺癌组织与正常组织中的表达差异、CBX4表达与前列腺癌患者的临床病理参数的关系及其对患者生存期的影响，String 数据库分析与 CBX4 相互作用的蛋白；通过免疫组织化学方法检测前列腺癌组织芯片中 CBX4 的表达情况，实时荧光定量 PCR 测定 CBX4 在不同前 列腺癌细胞水平的表达；透射电镜评价干扰 CBX4 表达后前列腺癌细胞的铁死亡情况，实时荧光定量 PCR 检测铁死亡下游分子 SLC7A11 的表达变化。结果：Oncomine 分析结果显示前列腺癌组织中 CBX4 mRNA 的表达较正常组织显著升高（P ＜ 0.001）；Meta 分析、HPA 和 UALCAN 的结果进一步证实 CBX4 的 mRNA 和蛋白水平在前列腺癌组织中明显增高（P ＜ 0.05）；免疫组织和细胞水平的实验结果证实 CBX4 在前列腺癌异常高表达（P ＜ 0.05）；UALCAN分析发现 CBX4 的表达与前列腺癌的 Gleason 评分和淋巴结转移呈正相关（P ＜ 0.05）。同时，CBX4 高表达组患者的生存期明显短于低表达组（P ＜ 0.05）。String 分析的结果表明，CBX4 可能与 E3 泛素蛋白连接酶 RING2 和 RING1、多梳复核蛋白 BMI-1 及 DNA 甲基转移酶 DNMT3A 蛋白相互作用；干扰 CBX4 的表达，可促进前列腺癌细胞的铁死亡，且抑制铁死亡上游分子 SLC7A11 的表达变化。结论：基于生物信息和细胞水平的实验提示，CBX4 在前列腺癌组织中异常高表达，可能参与了细胞的铁死亡，且其表达水平与前列腺癌患者总体生存周期呈负相关，表明 CBX4 可能为前列腺癌预后的生物学标志物，参与前列腺癌的发生发展，为重要的诊断和治疗靶点。     

老年性白内障患者外周血环状RNA差异表达谱研究

目的　利用微阵列芯片技术筛选老年性白内障患者外周血中差异性表达的环状 RNA(circular RNAs,circRNAs)进行生物信息学数据预测和分析,以探究外周血circRNAs在老年性白内障发病中的作用。方法　选取成都医学院第一附属医院已诊断为老年性白内障患者3例（试验组）和健康体检者3人（对照组）作为研究对象,运用Arraystar circRNAs基因芯片技术检测两组外周血中circRNAs表达谱及分析两组间差异表达的circRNAs。同时,运用在线生物信息学软件对差异circRNAs进行分析以及对下游相互作用的微小RNA（miRNA）进行预测。结果　与对照组比较,试验组外周血中异常表达的circRNAs共有242个(fold change绝对值≥2.0),其中上调的100个(fold change≥2.0),下调的142个 (fold change≤-2.0);生物信息分析数据提示,差异circRNAs在调节细胞代谢、发育及RNA转录等功能方面高度富集;4个circRNAs与白内障相关的miR-15a-3p、miR-34a-5p等吸附相关miRNA可能具有miRNA海绵吸附作用。结论　试验组与对照组外周血之间存在差异表达的circRNAs,这些circRNAs可能参与老年性白内障的致病调控,未来可能成为老年性白内障新型诊断和治疗的潜在生物学标志物。     

产ESBLs大肠埃希菌耐药基因分型研究

目的对本院分离的31株产ESBLs大肠埃希菌进行耐药基因分型研究。方法用PCR对根据CLSI标准进行产ESBLs大肠埃希菌的初筛确证实验得到的产ESBLs大肠埃希菌31株,进行耐药基因的分型研究。结果31株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM型为15株,SHV型为3株,CTX-M型为6株,TEM型对氨苄西林100%耐药,而SHV和CTX-M型主要对三代头孢类抗生素耐药,其治疗的首选药物为亚胺培能。结论本院检出的产ESBLs大肠埃希菌主要型别为TEM型,耐药基因分型研究将为临床用药和医院感染监控提供较有价值的参考。     

二乙氨乙基葡聚糖对霍乱菌苗的佐剂效应

二乙氨乙基葡聚糖(DD)是肠道外接种的病毒疫苗的强有力佐剂。实验菌苗为普通霍乱全细胞菌苗(PV)和PV与50μgDD结合菌苗(DDV)。DDV制备方法是将DD溶于蒸馏水中,用浓缩的Tris溶液将pH值调至7.5～7.6,120℃高压灭菌20分钟,将DD溶液与磷酸盐缓冲液(PBS)(pH7.2)和霍乱弧菌悬液混合。测定方法为(1)小鼠自动保护试验:两组小鼠用从4×10~6个菌数开始5倍稀释所得的4个稀释度的菌苗腹腔免疫,每个稀释度的