叶酸受体及其在肿瘤核医学中的应用

叶酸受体是一种在肿瘤细胞膜表面高度表达的蛋白膜受体，有α和β两种亚型。来源于上皮细胞的癌组织高度表达α亚型受体，非上皮来源的癌组织主要表达β亚型受体，两种亚型受体对叶酸及其类似物都有很高的亲和力。叶酸受体在几乎所有的卵巢癌和大部分的恶性肿瘤如乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、直肠癌、鼻咽癌等中都有表达，同时在正常组织的表达又高度保守。通过对其分类、结构、染色体定位、分布、配体及其在肿瘤核医学中应用的研究，将有助于肿瘤的早期诊断和针对肿瘤细胞的靶向性治疗。     

胸腺素β4基因沉默对膀胱移行细胞癌上皮间质转化的逆转作用

目的 观察胸腺素β4(Tβ4)基因沉默对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的逆转,探讨其在肿瘤侵袭转移中的作用机制.方法 使用针对Tβ4的慢病毒载体(knti-Tβ4)转染膀胱癌细胞株T24.采用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测Tβ4、整合素连接激酶(ILK)和上皮性标记基因E-cadherin、β-catenin的表达改变;Immunofluorescence法检测ILK、E-cadherin、β-catenin在转染后124细胞中的表达改变;细胞划痕实验、Boyden小室体外侵袭实验、AO/EB荧光染色法反映细胞转移潜能和凋亡的变化.结果 转染后48 h的T24细胞,Tp4、ILK、β-catenin mRNA或蛋白表达开始下降,以转染后96 h明显;而上皮标记基因E-cadherin在转染96h后,表达显著增加(P<0.05);Immunofluorescence显示ILK和β-catenin在细胞质、细胞核中表达减弱,而E-cadherin在胞膜中表达增强,细胞形态向正常上皮细胞转化;转染后的324细胞体外迁移能力与侵袭力下降[(10.4±1.2)%比(73.5±1.4)%],细胞凋亡增多(12.3%比36.6%).结论 肿瘤细胞中的Tβ4表达下调可以逆转肿瘤细胞的间质表型,而向正常上皮表型转化,降低肿瘤转移潜能.     

The Relationship of Expression of bcl-2, p53, and Proliferating Cell Nuclear Antigen （PCNA） to Cell Proliferation and Apoptosis in Renal Cell Carcinoma

To investigate the relationship of bcl-2, p53, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) to cell proliferation, apoptosis and pathological parameters, the patterns of cell growth and turnover in renal cell carcinoma (RCC), formalin-fixed and paraffin-embedded tissue blocks from 34 patients with RCC were examined. Cell proliferation activity was detected by PCNA immunostaining and the proliferation index (PI) was expressed as a percentage of the PCNA-positive cells in the tumor cells. Apoptosis was detected by terminal deoxy- nucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL), and the apoptotic index (AI) was expressed as a percentage of the TUNEL-positive cells in the tumor cells. Expressions of bcl-2 and pS3 were assessed immunohistochemically. Our results showed that the PI ranged from 6.0 % to 24.0 % (median 12.3 %) and the AI from 2.0 % to 8.0 % (median 5.4 ~) in RCC. The expression of the bcl-2 protein was demonstrated in 15 cases (44. 1%); the expression of the p53 protein, however, was seen in only 3 case. bcl-2 positivity was not associated with PI or AI or any pathological parameters. There were close associations between PI and tumor grade and stage, and a significant relationship between AI and the tumor grade of RCC. Our study suggests that bcl-2 positivity was not associated with PI or AI or any pathological parameters. There are close associations between PI and AI and tumor grade and stage of RCC. Active cell proliferation may be accompanied by frequent apoptosis in RCC.     

凋亡抑制因子Livin在膀胱移形细胞癌中的表达

目的检测抗凋亡（IAP）家族中Livin基因在膀胱移形细胞癌（BTCC）组织及癌旁组织的表达，探讨Livin的表达在膀胱癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录．荧光定量聚合酶链反应（RT-QPCR）方法对30例膀胱癌患者中Livin基因在癌组织和癌旁组织中的表达进行检测。结果免疫染色标本中，在癌旁组织和膀胱癌组织中Livin的阳性表达率分别为0．60％。Livin在膀胱癌组织中的-△△CT值是癌旁组织的8．0454（7．4264—8．6644）倍，与分级和分期没有相关性。结论Livin基因在癌旁组织中有少量表达，而在BTCC组织中的表达量远远高于癌旁组织。     

99mTcN(NOEt)2与99mTc-MIBI在肿瘤模型显像中的对比研究

目的　探讨99mTc 氮 二 (N 乙基 N 乙氧基二硫代氨基甲酸盐 ) [99mTcN (NOEt) 2 ]应用于肿瘤诊断的可能性并与99mTc 甲氧基异丁基异腈(99mTc MIBI)肿瘤模型显像进行比较。方法　制备99mTcN (NOEt) 2 ,用上行薄层色谱法测定放化纯。各取 4只移植性艾氏腹水癌小鼠分别尾静脉注射99mTc MIBI或99mTcN(NOEt) 2 ,30min、2h、4h后进行全身后位静态显像。利用感兴趣区技术 ,分别计算不同时相肿瘤与头部 (T/H)、胸部 (T/C)、及健侧肢体对称部位 (T/L)的放射性比值。 4h后处死99mTcN (NOEt) 2 显像组小鼠 4只 ,取血并剥离脏器组织及肿瘤组织 ,称重 ,测量放射性计数 ,计算肿瘤与各脏器放射性比值。结果　99mTcN (NOEt) 2 室温下 4h保持稳定。99mTcN (NOEt) 2 选择性地有效的聚集于肿瘤组织。除腹部外其它组织靶 /非靶比值较高 ,注射2h后T/L比值达最高 ,为 4.87。99mTcN (NOEt) 2 显像组与99mTc MIBI显像组比较T/L比值差异有显著性 (P <0 .0 1)。体外测量肿瘤与血、肌肉、肺等脏器的单位重量放射性比值较高 ,与肝、小肠等腹部脏器的单位重量放射性比值较低。结论　在移植性艾氏腹水癌小鼠模型中99mTcN (NOEt) 2 从血液中清除很快 ,肿瘤摄取率高 ,有一定的滞留量 ,靶与非靶比值高 ,图像质量明显优于99mTc MIBI肿瘤     

膀胱癌干细胞关键转录因子Oct4的表达及与肿瘤干细胞的关系

目的检测干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织及细胞系BIU-87中的表达，探讨Oct4的表达在膀胱癌发生发展中的意义及与肿瘤干细胞的关系。方法采用免疫组织化学方法对49例膀胱癌组织病理标本、采用免疫细胞荧光和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对膀胱癌细胞系BIU-87进行Oct4表达的检测。结果Oct4在膀胱癌中的表达率为81．6％（40／49），Oct4阳性细胞率约为0．6％，Oct4表达的阳性细胞率及强度与膀胱癌的分级、复发和转移无明显相关性（P〉0．05）。在BIU-87细胞中存在少量的Oct4阳性细胞，RT-PCR证实存在Oct4的弱表达。结论膀胱癌中有少量细胞表达全能干细胞标志物Oct4，这些细胞很可能是膀胱癌干细胞，这将为其最终分离和鉴定人膀胱癌干细胞提供重要的基础。     

Modification of Alternative Splicing of Bcl-x Pre-mRNA in Bladder Cancer Cells

The development , progression, and mainte-nance of cancer involve deregulation of apoptosis .Genetic and biochemical studies have revealed thatPCDis under complex and delicate regulation. Ani mportant level of such regulation may be pre-mR-NAsplicing. Many apoptotic regulatory genes un-dergo alternative splicing to control the gene ex-pressionlevel .Forinstance ,Bcl-x has two alterna-tive 5' splice sites and produces two distinct pro-teins :Bcl-xL and Bcl-xS.Bcl-xL,like Bcl-2 ,is a-ble t…     

人膀胱移行细胞癌上皮间质转化与胸腺素β4的关系

目的 探讨人胸腺素β4(Tβ4)与膀胱移行细胞癌(BTCC)上皮-间质转化的相关性,以及与临床病理特征之间的关系.方法 选用膀胱移行细胞癌手术切除标本60例,每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织及其远端正常黏膜对照.采用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和免疫组织化学技术检测切除标本中的Tβ4、整合素连接激酶(ILK)、E-cadherin和β-catenin的表达,并分析与各临床病理因素之间的关系.结果 Tβ4在BTCC组织中的表达明显高于正常黏膜(91.7%比15.0%,P<0.05),其在深层浸润组中的表达高于浅层浸润组(97.4%比81.00,P<0.05);ILK在BTCC组织中的表达明显高于正常黏膜(80.0%比18.3%,P<0.05);β-catenin在BTCC组织中的表达高于正常黏膜(76.7%比26.7%,P<0.05);E-cadherin在BTCC组织中的表达明显低于正常黏膜(30.0%比90.0%,P<0.05);Tβ4与E-cadherin表达呈负相关,与ILK、β-catenin表达呈正相关.结论 胸腺索β4与膀胱移行上皮癌分化和转移有关,可能通过调控上皮-间质转化从而在膀胱移行上皮癌的侵袭转移过程中发挥作用.