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胸腺素β4基因沉默对膀胱移行细胞癌上皮间质转化的逆转作用
引用本文:王智宇,曾甫清,朱朝辉,蒋国松,吕磊,邢诗安.胸腺素β4基因沉默对膀胱移行细胞癌上皮间质转化的逆转作用[J].中华实验外科杂志,2010,27(4).
作者姓名:王智宇  曾甫清  朱朝辉  蒋国松  吕磊  邢诗安
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科,武汉,430022
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室,武汉,430022
基金项目:国家自然科学基金资助项目 
摘    要:目的 观察胸腺素β4(Tβ4)基因沉默对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的逆转,探讨其在肿瘤侵袭转移中的作用机制.方法 使用针对Tβ4的慢病毒载体(knti-Tβ4)转染膀胱癌细胞株T24.采用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测Tβ4、整合素连接激酶(ILK)和上皮性标记基因E-cadherin、β-catenin的表达改变;Immunofluorescence法检测ILK、E-cadherin、β-catenin在转染后124细胞中的表达改变;细胞划痕实验、Boyden小室体外侵袭实验、AO/EB荧光染色法反映细胞转移潜能和凋亡的变化.结果 转染后48 h的T24细胞,Tp4、ILK、β-catenin mRNA或蛋白表达开始下降,以转染后96 h明显;而上皮标记基因E-cadherin在转染96h后,表达显著增加(P<0.05);Immunofluorescence显示ILK和β-catenin在细胞质、细胞核中表达减弱,而E-cadherin在胞膜中表达增强,细胞形态向正常上皮细胞转化;转染后的324细胞体外迁移能力与侵袭力下降(10.4±1.2)%比(73.5±1.4)%],细胞凋亡增多(12.3%比36.6%).结论 肿瘤细胞中的Tβ4表达下调可以逆转肿瘤细胞的间质表型,而向正常上皮表型转化,降低肿瘤转移潜能.

关 键 词:上皮间质转化  胸腺素β4  移行细胞癌  慢病毒

The reverse effect of thymosin β4 gene silencing on epithelial-mesenchymal transition in human bladder transitional cell carcinoma
Abstract:
Keywords:Epithelial-mesenchymal transition  Thymosin β4  Transitional cell carcinoma  Lentivirus
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