药品抽验中检出鲍曼不动杆菌案例的风险评估回顾和策略探讨

药品微生物污染是引起药品安全性问题的重大风险因素,然而药品微生物实验室当前面临的普遍现实是应急反应能力慢、鉴定水平能力不足、对检出的具有潜在危害性的微生物评估手段应对不够,本文通过对2018年度国家药品抽样检验中检出鲍曼不动杆菌的案例回顾,依据《中国药典》进行潜在危害性的微生物的风险评估,从而为药品微生物检测实验室进行有关风险评估提供参考。     

颗粒剂检出鲍曼不动杆菌复合菌及其危害性探讨

目的:对12批次颗粒剂中检出的鲍曼不动杆菌复合菌进行分析,加强药品检验过程中对该菌的认识和重视。方法:按照2015年版《中国药典》四部1105微生物计数法和1106控制菌检查法,对184批次颗粒剂进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、大肠埃希菌检测;对麦康凯琼脂培养基上出现的疑似菌落用MALDI-TOF-MS或VITEK2-compact进行鉴定;用6种不同温度水冲泡鲍曼不动杆菌复合菌,放凉后观察其存活情况。结果:184批次颗粒剂需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、大肠埃希菌检验结果均符合规定。其中12批次样品检测出鲍曼不动杆菌复合菌;鲍曼不动杆菌复合菌的检出,与需氧菌总数的关系不大;用低于70℃的水冲服药剂,鲍曼不动杆菌存活不受影响。结论:免疫力低下人群服用污染鲍曼不动杆菌复合菌的药品,具有较高的感染风险。     

16S rRNA/ITS基因序列分析与微生物分类鉴定及其在药品微生物质量控制中的应用

经典的微生物鉴定有赖于微生物的纯培养,其在一些难培养、生长缓慢或需要特殊营养的微生物鉴定方面有明显的局限性。全自动细菌鉴定及药敏分析系统和基质辅助激光解离飞行时间质谱对微生物鉴定属表型鉴定,严重依赖仪器生产厂商提供的数据库,对类型多样的环境微生物的鉴定分型有明显缺陷。基于遗传物质的分子生物学鉴定技术为微生物的准确鉴定及分型提供了新的思路。16S rRNA/ITS遗传信息具有相对稳定性和易变异的双重特点,不依赖于微生物的营养及生长状态,在微生物的鉴定、分型中得到广泛应用。微生物是影响药品质量的重要因素,而药品微生物控制是药品质量控制的重要方面。本文对16S rRNA/ITS序列与微生物鉴定、分型及其在药品微生物质量控制领域中的应用进行综述,为相关工作提供参考。     

HPLC法检测替硝唑葡萄糖注射液中5-HMF

目的建立一种快速、灵敏、准确的高效液相色谱法测定替硝唑葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛（S-HMF）的含量。方法HPLC法，以Hypersil ODS2 C18（4.6mm×250mm，5pm）为色谱柱，流动相：甲醇：水：冰乙酸（38：62：0.8），柱温：30℃；流速1.0ml/min，检测波长为284nm。结果5-羟甲基糠醛在0.5~2.5μg/ml浓度范围与峰面积有良好线性关系，r=1.000。平均回收率为101.1%，RSD=1%（n=9）。结论本方法准确、简便、快捷。排除了替硝唑的干扰，可用于测定替硝唑萄萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量。     

注射用阿奇霉素细菌内毒素的检测

目的 :建立注射用阿奇霉素的细菌内毒素检查方法。方法 :参照药典方法进行实验。结果 :经干扰实验证明 ,注射用阿奇霉素对鲎试剂的凝聚反应无干扰作用 ,用灵敏度为 0 5EU·ml 1的鲎试剂检查细菌内毒素的方法有效。结论 :可用细菌内毒素检查法替代家兔热原法控制其质量     

RP-HPLC法测定复方盐酸普莫卡因乳膏中盐酸普莫卡因的含量

目的 测定复方盐酸普莫卡因乳膏中盐酸普莫卡因得含量。方法采用RP—HPLC法测定复方盐酸普莫卡因乳膏中盐酸普莫卡因得含量。色谱柱：CLC—ODS（4．6×150mm,5μm）,流动相：乙腈-pH7．5磷酸盐缓冲液（55：45）,柱温：40℃,流速：1．5ml／min,检测波长：224nm,进样量：20μL。结果盐酸普莫卡因在0．2—0．9mg／ml浓度范围内线性关系良好,其平均回收率为99．6％,RSD值为0．53％,制剂中其他成分及辅料对含量测定无干扰。结论该含量测定法准确简便,专属性强,重现性及稳定性良好,适用于复方盐酸普莫卡因乳膏的质量控制。     

治疗性单克隆抗体类药物分析技术及其应用

治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用。单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高。单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域。根据生产技术和工艺的不同,单抗类药物发展已经经历了4代。我国最近批准上市的信迪利单抗注射液、特瑞普利单抗注射液、注射用卡瑞利珠单抗和替雷利珠单抗注射液等均属于第3代人源化单克隆抗体药物。单抗类药物分子结构复杂,容易发生二聚体、多聚体、末端氨基酸突变等不均一性变化,严重影响临床用药的安全性和有效性。对单抗类药物的原液和成品进行有效的质量控制是确保该类产品安全性和有效性的重要措施。目前,单抗类产品质量控制与分析的主要方法包括高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、毛细管区带电泳(CZE)法、毛细管等电聚焦电泳(cIEF)法、成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法和十二烷基硫酸钠-毛细管电泳(CE-SDS)法等。本文就单抗类药物质量控制分析方法及应用进行综述,为相关研究及产品质量控制提供参考。     

气相色谱法测定鹿血酒中的甲醇和杂醇油

目的 建立气相法测定鹿血酒中甲醇和仲丁醇、正丙醇、正丁醇、异丁醇、异戊醇5种杂醇油成分.方法 Agilent HP-INNOWax(30 m×320 μm×0.25 μm)柱;程序升温;进样口温度230 ℃,进样量1 μL,分流比50∶1;氢火焰离子化检测器(FID),温度250 ℃;外标法定量.结果 鹿血酒中甲醇与5种杂醇油成分分离良好,在一定浓度范围内线性关系良好;加样回收率为91.6%~106.3%,定量限为2~11 μg·mL-1,检出限为1~6 μg·mL-1.结论 本法简便,准确,可用于鹿血酒中甲醇和5种杂醇油成分的含量测定.     

动态浊度法测定加替沙星注射液细菌内毒素含量

加替沙星 ( gatifloxacin)注射液为治疗呼吸道感染和泌尿系统感染安全有效的药物。原热原检查采用家兔法 ,但干扰因素较多。为探索快速、方便且定量的内毒素测定方法 ,本研究采用动态浊度法测定加替沙星注射液中内毒素的含量。1　材料与仪器细菌内毒素工作标准品 (中国药品生物     

注射用多西他赛胶束无菌检查方法验证

目的 建立针对2种注射用多西他赛胶束的无菌检查方法。方法 参照2015年版《中国药典》（四部）通则1105无菌检查法,取注射用多西他赛胶束15瓶,用500 mL 0.9%氯化钠溶液溶解,作为供试液,平均分配至3个滤筒过滤。同法制备6个滤筒。每个滤筒用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗3次,每次100 mL,然后加入相应培养基,并分别接种<100 CFU/mL的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、生孢梭菌和黑曲霉,于适宜温度下观察培养。以等量无菌氯化钠溶液替代注射用多西他赛胶束供试液后采用相同的后续操作,作为对照组。采用薄膜过滤法,用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每个滤筒冲洗3次,每次100 mL,检测各菌株生长情况。结果 6种验证菌株均在48 h内生长良好,样品的抑菌活性被完全消除。结论 注射用多西他赛胶束可用上述方法进行无菌检查。