HSV-2感染ECV304的形态学变化

目的观察人脐静脉内皮细胞（ECV304）受到单纯疱疹病毒2型（HSV-2）感染后的连续病变过程及形态学特征。方法采用ECV304传代培养，接种HSV-2后用相差显微镜、组织染色观察贴壁生长细胞的病变全过程。结果接种HSV-2后，ECV304于1d逐渐出现细胞肿胀、变圆、胞浆颗粒增多粗大；2d逐渐出现细胞融合，细胞核着色变浅。结论HSV-2接种后在ECV304出现的形态学变化，造成细胞死亡的主要形式是细胞坏死，未见明显的细胞凋亡现象。     

阳山鸡出生后早期左卵巢组织结构发育的变化

目的：观察阳山鸡卵巢生后早期发育。方法：采用常规组织学方法,比较1 ～ 7 d 龄阳山鸡左卵巢组织结构 的发育变化过程。结果：出生时双侧卵巢已经显示左右明显的不对称,右侧卵巢于5 d 龄开始退化,而左侧卵巢持 续发育,形状为扁椭圆形,分为2 叶;颜色为灰白色。切片观察可见,出生时鸡左侧卵巢实质由皮质、外髓质和内 髓质构成。皮质主要由处于减数分裂前期的卵母细胞构成,3 d 龄时卵母细胞的染色体进一步凝缩;5 d 龄时皮质的 卵母细胞全部消失,外髓质已开始有成形的卵泡出现;大约7 d 龄时,外髓质的卵泡大而清晰,皮质几乎完全消失, 外髓质最终成为真正的皮质。结论：在生后1 周内,阳山鸡左卵巢皮质发生明显衰退、崩解和丢失,外髓质最终成 为真正的皮质。     

细胞凋亡及其基因调控的研究进展

细胞凋亡 (Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD)是有机体为保持自身组织稳定、调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡、由基因控制的细胞主动性死亡过程 ,具有特殊的形态学和生化特征 ,不导致明显的炎症反应[1 ] 。细胞凋亡是细胞在其生长、发育过程中具有十分重要作用的生理现象 ,其生物学意义是在发育中清除多余的细胞、发育不正常的细胞、已完成任务的细胞以及有害的细胞 ,参与免疫系统细胞的发育和克隆选择等 [2 ] 。近年来 ,国内外通过对细胞凋亡发生的分子生物学机理的研究 ,对其本质的认识不断深入 ,这一过程和细…     

人巨细胞病毒诱导ECV304血管内皮样细胞凋亡

目的 探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染ECV304血管内皮样细胞的致病机制。方法 常规方法传代细胞和接种病毒。以PCR法和间接免疫荧光法检测病毒即刻早期基因（IE gene）及其蛋白表达；相差显微镜及电子显微镜观察病毒感染后细胞和细胞器形态变化；DNA梯度法和流式细胞术检测细胞凋亡。结果 病毒感染后72h开始出现胞体变圆、缩小、脱壁，胞质内颗粒增多，细胞边缘模糊不清的特征，可明显检测出病毒特异IEgene及其蛋白表达；电镜结果显示病毒感染96h后，胞质内明显空泡化，细胞膜微绒毛减少，核染色质浓集、边缘化，线粒体出现溶酶体化、空泡化和自噬现象，呈早期凋亡特征；DNA梯度电泳结果显示感染细胞DNA片段化特征的条带：流式细胞仪检测发现感染4d和6d时，细胞调亡率分别为4．1％和45．7％。结论 巨细胞病毒在体外细胞培养中可诱导ECV304血管内皮样细胞的凋亡。     

HCMV 60-mer寡核苷酸诊断芯片的探针与微阵列设计

目的设计用于人巨细胞病毒（HCMV）诊断的60-mer长链寡核苷酸探针及微阵列。方法利用生物学软件Array Designer2．0，针对HCMV特异且保守的序列设计60-mer探针，利用BLAST功能将设计探针在GenBank数据库进行序列比对分析，筛选得到HCMV特异性Oligo探针，根据各探针的属性特点设计芯片阵列。结果设计得到24条解链温度（Tm值）相近、长度均一的60-mer Oligo探针及其芯片阵列，拟打印成DNA芯片用于HCMV检测。结论利用病原体的生物信息学资料及Array Designer2．0生物软件．能有效的进行病毒检测芯片的设计。     

HSV-2的生物信息学分析及其Oligo探针设计

目的设计单纯疱疹病毒2型（HSV-2）诊断芯片的Oligo探针。方法利用BLAST软件对HSV-2的DNA序列进行序列比对，得到有意义的特异序列；用生物学软件Olig06．0设计特异性高、Tm值相近、长度均一的Oligo探针。结果获得13条60-mer Oligo探针。结论利用BLAST系统和生物学软件Olig06.0设计HSV-2诊断芯片的探针，可为后期打印成DNA芯片，用于HSV-2的检测打下基础。     

细胞凋亡与疾病

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是有机体为保持自身组织稳定、调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡、由基因控制的细胞主动性死亡过程 ,具有特殊的形态学和生化特征［１］。细胞凋亡是细胞在其生长、发育过程中具有十分重要作用的生理现象 ,是多细胞器官控制自身增殖率和死亡率 ,以保持自身组织稳定的一种重要方式 ,其生物学意义是在发育中清除多余的细胞、已完成任务的细胞以及有害的细胞等 ,参与免疫系统细胞的发育和克隆选择等［２］。近年来 ,国内外通过对细胞凋亡发生的分子生物学机理的研究 ,对其本质的认识不断深入 ,这一过程和细胞…     

先天性心脏病有关的风疹病毒Oligo探针与功能基因芯片的设计

目的风疹病毒（Rubella virus,RV）是先天性风疹综合征（先天性心脏病、先天性白内障和耳聋的三联综合征）的致病因素,本研究针对RV全基因组序列的生物信息学特点,设计RV 60-m er长链寡核苷酸探针,探讨寡核苷酸探针和功能基因芯片的设计方法。方法利用生物信息学软件Array Designer 2.0针对RV全基因组设计Tm值相近、长度均一的60-m er探针,利用其BLAST功能将所得探针在GenBank数据库进行序列比对分析,筛选得到RV特异性O ligo探针并设计成功能基因芯片。结果获得11条60-m er O ligo探针,用于打印成DNA芯片,拟用于RV检测与病毒基因表达功能分析。结论利用Array Designer 2.0软件设计芯片探针比常见其他方法更有效,尤其适合于病毒检测和病毒基因功能分析复合型芯片的设计。     

2000～2009年H1N1甲型流感病毒血凝素基因HA1的演变特征

目的研究2000～2009年世界各地不同物种的新型H1N1流感病毒HA1基因演变特征。方法从NCBI数据库下载所需序列,采用生物信息软件对其氨基酸序列进行基因特性分析以及构建种系发生树。结果病毒株HA1基因抗原决定簇和多个受体结合位点发生变异,并且新型病毒与猪H1N1流感病毒在大多数变异位点的氨基酸相同。结论新型毒株HA1基因可能由早期来自北美洲的H1N1猪流感病毒进化而来,在进化过程中,一些重要位点的变异导致HA1基因发生抗原性变异,从而导致流感的大爆发。     

风疹病毒野生株感染ECV304血管内皮样细胞的细胞病变效应

目的通过体外培养和风疹病毒野生株感染ECV304血管内皮样细胞,初步探讨中国大陆流行的风疹病毒野生株的致病变性特征.方法常规方法培养ECV304血管内皮样细胞和病毒接种,RT-PCR和间接免疫荧光法检测风疹病毒包膜糖蛋白E1基因的表达,相差显微镜及电子显微镜下观察细胞受病毒感染后形态变化,脱氧核糖核酸末端转移酶法（TUNEL）检测细胞凋亡.结果感染后2～3 d即可检测到风疹病毒包膜糖蛋白E1基因表达;感染后4 d,相差显微镜观察呈现明显的细胞病变效应,即细胞悬浮脱壁、细胞体变圆缩小、细胞膜皱缩、染色质浓缩等;电镜下观察可见明显病毒颗粒,核染色质浓集、边缘化,线粒体聚集于细胞核周围呈溶酶体化、空泡化和自噬现象.TUNEL法检测细胞凋亡指数（AI）在病毒感染组与对照组间有显著性差异（P＜0.01）.结论风疹病毒野生株在ECV304细胞中有明显的致细胞病变效应,在体外细胞培养下可诱导ECV304血管内皮样细胞凋亡.