全反式维甲酸对兔颈动脉内皮损伤后血清hs-CRP和TNF-α影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对兔颈动脉内皮损伤后内膜增生、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)血清浓度影响。方法新西兰雄性大白兔36只,随机分为3组,各12只。空白对照组(A组)给予基础饮食,暴露颈动脉;手术处理组(B组)给予高脂饮食并行颈动脉内膜空气干燥手术;手术处理并ATRA治疗组(C组)给予ATRA灌胃治疗,其余操作同B组。各组分别于手术后第7、14、28天处死4只兔,对病变血管进行形态学观察,苏木精-伊红染色观察内膜增生情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清hs-CRP和TNF-α浓度。结果 A组各时间点血管壁外观光滑,未见动脉壁损伤与修复病灶,无内膜增生;血清TNF-α、hs-CRP浓度在正常范围内。B组术后第7天开始出现内膜增生,第14、28天增生显著,粥样硬化斑块形成,管腔狭窄;血清hs-CRP和TNF-α浓度显著升高,与A组比较,差异均有显著意义(F=23.08~193.94,P<0.05)。C组内膜增生较轻,第7天内膜厚度和B组比较差异无显著性(P>0.05);第14、28天,内膜面积均显著低于B组(F=12.70~51.42,P<0.05),血清hs-CRP和TNF-α浓度也显著低于B组(F=4.72~193.94,P<0.05)。结论 ATRA对兔颈动脉内皮损伤后的内膜增生有较好的抑制作用,能降低内皮损伤后血清hs-CRP、TNF-α浓度。     

毛花甙C对阵发性心房颤动的复律效果与发作间歇期左心功能状态的关系

目的：研究非瓣膜病阵发性心房颤动（房颤）患者的左心功能与毛花甙Ｃ（西地兰）复律效果的关系。方法：１２４例阵发性房颤患者使用毛花甙Ｃ复律，用彩色多普勒超声心动图随访记录发作间歇期的心功能，观察复律效果与心功能的关系。结果：复律有效组（ｎ＝７１）与无效组（ｎ＝５３）之间左心室收缩功能（Ｐ＜０．００１）、舒张功能（Ｐ＜０．０５）分别有显著差异。有效组收缩功能障碍者占６１．９７％，射血分数在正常下限者（４５％～４９％）占３２．３６％，尚有少数左心室舒张功能障碍及心功能正常者；无效组舒张功能障碍者占８８．６８％，尚有少数收缩功能障碍及心功能正常者。有效组冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者占８８．７３％，无效组高血压患者占８１．１３％。结论：毛花甙Ｃ的强心作用与迷走神经兴奋作用可能分别参与了阵发性房颤伴有与不伴有左心室收缩功能障碍患者的复律机制；阵发性房颤伴有收缩功能障碍是毛花甙Ｃ复律良好的适应证。     

全反式维甲酸对球囊剥脱大鼠胸主动脉内皮后平滑肌细胞增殖和P21表达的影响

目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对球囊损伤大鼠胸主动脉后管腔狭窄、血管平滑肌细胞（VSMC）增殖及细胞周期依赖性激酶抑制蛋白P21表达规律的影响。方法：54只SD大鼠随机分为三组。对照组不进行球囊损伤，术后28天处死；手术组和ATRA治疗组行球囊剥脱胸主动脉内皮术，分别于术后2d、7d、14d、28d处死。取胸主动脉应用HE染色、免疫组化和计算机图像分析法进行形态学、PCNA和P21表达水平检测。结果：①正常动脉壁不表达PCNA及P21。②手术组中膜VSMC术后2d PCNA表达达高峰，后迅速下降；而新生内膜在术后7d现并高表达PCNA，14d、28d内膜迅速增厚，其中PCNA表达逐渐下降。P21在术后14d新生内膜中可见少量表达，28d表达增多。③ATRA治疗组术后7d新生内膜中已有P21表达，14d、28d大量表达，而PCNA的表达明显低于手术组，显著抑制VSMC的迁移和增殖、内膜增生和管腔狭窄（P〈0．01）。④P21表达与PCNA表达呈负相关（P〈0．001）。结论：ATRA可通过诱导P21蛋白表达，抑制VSMC迁移和增殖，从而抑制球囊剥脱大鼠胸主动脉内皮后新生内膜过度增生和管腔狭窄。     

P27kip1在血管平滑肌细胞中的研究进展

细胞周期的正常运行决定细胞的增生、分化和凋亡，并受细胞周期素（Cyclin）、细胞周期素依赖激酶（cyclin-dependent kinase，CDK）和细胞周期素依赖激酶抑制蛋A（cyclin-dependent kinase inhibitor，CKI）在多个层次上的共同调节。前二者结合可催化细胞周期进程，CKI是细胞周期的负性调控因子，通过抑制Cyclin-CDK复合物的形成及生物活性，作用于细胞周期的不同时相，抑制细胞过度增生，延缓或阻滞细胞周期进程，并参与血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的增生。VSMC的异常增生、迁移和分化是许多血管增生性疾病如动脉粥样硬化（atheroselerosis，AS）、高血压（essensial hypertension，EH）和经皮冠状动脉腔内成形术（PTCA）后再狭窄（restenosis after angioplasty，RAA）的主要病理学特征。因此研究CKI表达对VSMC的作用已成为防治AS、RAA等血管增生性疾病的国内外研究热点。     

全反式维甲酸对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠胸主动脉球囊损伤后MMP2和MMP9表达的影响,探讨ATRA治疗血管再狭窄的可能机制与作用。方法54只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和ATRA治疗组。所有大鼠从术前4d至术后处死接受植物油或ATRA混悬液灌胃,球囊剥脱模型组与治疗组大鼠胸主动脉内皮,分别在术后2d、7d、14d及28d取胸主动脉,通过组织学检查、免疫组化结合图象分析技术测定血管壁形态学变化,MMP2和MMP9的蛋白表达水平及ATRA灌胃对其影响。结果1MMP2术后2d开始上升,7d最高,14d后开始下降。2MMP9术后2d在中膜大量表达,7d后表达极少。3术后7d新生内膜开始增生,14d大量新生内膜形成,28d以后内膜继续增厚。4使用ATRA后,血管新生内膜明显减少,MMP2及MMP9蛋白表达也有不同程度下降。结论ATRA能下调血管成形术后MMP2与MMP9的表达,可能在调节细胞外基质的降解、成形术后血管重塑中起作用。     

全反式维甲酸对兔颈动脉粥样硬化性狭窄中平滑肌细胞凋亡及其机制的研究

目的观察全反式维甲酸（ATRA）对兔颈动脉粥样硬化性狭窄后平滑肌细胞凋亡的影响。方法新西兰兔40只，随机分为3组：对照组（CON）、手术组（SUR）、治疗组（TRE），均给予高脂饮食，两周后手术组和治疗组用空气干燥法建立颈动脉粥样硬化模型，治疗组于术前给予全反式维甲酸灌胃。分别于术后两周、四周处死动物取病变处血管，HE染色后观察观察内膜增生情况，并用TUNEL法检测细胞凋亡、免疫组化检测凋亡抗原基因Fas。结果形态学观察显示内膜增生程度由强到弱为：SUR〉TRE〉CON。在治疗组凋亡细胞TUNEL阳性细胞数最多，Fas表达最明显。结论ATRA具有诱导平滑肌细胞凋亡的作用，在一定程度上抑制血管内膜增生，抑制血管损伤后再狭窄，其机制可能是通过FAS／FASL途径。     

全反式维甲酸对兔颈动脉粥样硬化病变中Cdk2表达及血管平滑肌细胞增生的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对兔颈动脉粥样硬化病灶中血管内膜的增生、血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞周期素依赖性激酶Cdk2表达规律的影响。方法36只新西兰雄性大白兔随机分为3组:正常饮食组、手术组、ARTA治疗组,每组12只。手术组和治疗组均给予高脂饮食,两周后用空气干燥法制作颈动脉内膜损伤模型,治疗组于术前3d开始给予ATRA灌胃。于术后1、4周处死动物,取病变血管应用HE染色、免疫组化和计算机图像分析法进行形态学、PCNA和Cdk2表达水平的检测。结果①正常动脉壁未见PCNA及Cdk2表达。②手术组在术后第1周时内膜开始增生,第4周增生明显,且出现泡沫细胞、脂质核心形成、管腔狭窄;增生内膜中Cdk2表达水平增高。③治疗组Cdk2的表达明显低于手术组(P<0.05),VSMCs的迁移、增殖、内膜增生和管腔狭窄显著减轻(P<0.05)。④PCNA表达与Cdk2表达呈显著正相关(P<0.01)。结论ARTA可通过抑制Cdk2表达,抑制VSMCs的迁移和增殖,从而抑制兔颈动脉粥样硬化新生内膜过度增生和管腔狭窄。     

大鼠胸主动脉球囊损伤后平滑肌细胞PCNA和P27表达的变化

目的探讨大鼠胸主动脉球囊损伤后增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P27表达变化规律。方法30只400～500g的雄性SD大鼠随机分为2组。手术组(n=24)行球囊损伤大鼠胸主动脉术;对照组(n=6)不行球囊损伤,作为正常对照。于术后2d、7d、14d、28d取胸主动脉应用HE染色、免疫组化和计算机图像分析法进行形态学、PCNA和P27表达水平检测。结果(1)正常动脉壁不表达PCNA,球囊损伤后开始表达,术后2d时中膜表达显著(24.08±2.35);术后7d出现新生内膜,PCNA在内膜高度表达(35.32±3.46)而中膜表达已明显下降(9.47±1.56);后内膜、中膜表达均逐渐下降,28d时形成显著的新生内膜(0.173±0.030)mm2,管腔狭窄;(2)正常动脉壁显著表达P27(19.29±1.54),球囊损伤后中膜表达迅速下降,2d达最低水平(2.93±0.55),后逐渐回升;14d、28d新生内膜中可见P27表达,并逐渐增多;(3)P27表达与PCNA表达呈显著负相关(r=0.868P<0.001)。结论球囊损伤大鼠主动脉后管壁P27表达下调伴随PCNA表达上调,血管平滑肌细胞恢复增殖能力并向内膜下迁移并过度增殖,从而形成显著的新生内膜、管腔狭窄。     

球囊损伤血管内皮后AT-1受体mRNA的变化及AT1R拮抗剂的作用

目的 研究球囊致血管损伤后血管内膜增生的过程、血管紧张素ⅡAT－1受体mRNA的变化及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（氯沙坦）对它们的影响。方法 球囊剥脱大鼠主动脉内皮，并随机分为对照组（n=24）、手术组（n=24）和氯沙坦治疗组（n=24）和氯沙坦治疗组（n＝24）。分别在术后3、7、14和28d，取主动脉，通过组织学检查和逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测内膜增生的情况、血管紧张素ⅡAT－1受体mRNA的水平及非肽类血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦（30mg/kg/d）对它们的影响。结果 ①AT－1受体mRNA于术后3d已明显增高，并持续至术后14d。②内皮损伤后3d已有增殖的血管平滑肌细胞（VSMC）移行至内膜层；损伤后7d内膜开始增生；伤后14d VSMC的增殖及内膜增生更为明显；术后28dVSMC的增殖明显减弱，细胞外基质增加，内膜继续增生。③使用氯沙坦后AT－1受体mRNA的表达增加，但VSMC的移行、增殖减弱，骨膜增生程度减轻。结论 血管损伤后内膜增生的过程中AT－1受体mRNA的表达增加，氯沙坦增加AT－1受体mRNA的表达，但能抑制内膜增生的程度。     

全反式维甲酸对兔颈动脉内膜损伤病灶中内膜增生和IL-8及PECAM-1表达影响

目的观察全反式维甲酸(ATRA)对兔颈动脉内膜损伤病灶中内膜增生和白细胞介素-8(IL-8)、血小板内皮细胞黏附分-1(PECAM-1)表达的影响。方法将54只新西兰大白兔随机分为假手术组、对照组和治疗组3组。对照组和治疗组给予高脂饮食,2周后,用空气干燥法制作颈动脉内膜损伤病灶模型,治疗组于术前3d开始给予ATRA灌胃。假手术组给予普通饮食,2周后分离暴露颈动脉但不损伤内膜。于术后第7、14、28天分别处死各组动物,取损伤血管进行形态学观察,采用免疫组化法检测IL-8和PECAM-1的表达水平。结果假手术组未见内膜增生,IL-8无表达,PECAM-1仅有微量表达;对照组术后7d内膜开始增生,14、28d时内膜增生明显,管壁有粥样斑块形成,管腔狭窄,IL-8和PECAM-1表达量增多;治疗组内膜增生相对于对照组较轻,14和28d时内膜面积显著低于对照组(t=4.041、3.896,P<0.05),治疗各组IL-8和PECAM-1的阳性表达指数也显著低于对照组(t=3.368～4.421,P<0.05)。结论 ATRA可通过抑制IL-8和PECAM-1的表达从而抑制动脉内膜损伤病灶中的内膜增生,维持粥样斑块的稳定性。