川陈皮素对糖尿病肾病大鼠AMPK和eNOS表达的影响研究

【摘要】目的 观察川陈皮素对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，并从腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）和内皮型一氧化氮酶（eNOS）途径探讨其作用机理。方法 采用高脂高糖饲料喂养+链脲佐菌素（STZ）腹腔注射复制2型糖尿病肾脏损害大鼠模型，模型构建成功后，将其随机分为正常组、模型组、贝那普利干预组以及川陈皮素低、中和高剂量治疗组（n=20）。实验中密切监测大鼠一般情况，治疗期结束后收集尿液检测24h蛋白尿，收集血液检测肾功能指标、抗氧化指标，收集肾脏观察肾脏病理学，同时检测肾脏组织中AMPK及eNOS蛋白和mRNA的表达结果。结果 正常组肾小球正常，无明显病理特征；模型组出现肾小球增大，系膜和肾间质纤维组织增生；贝那普利组和川陈皮素三个剂量组相较于模型组明显减轻。与正常组相比，模型组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显升高(P＜005)；SOD和GSH明显降低(P＜005)，与模型组相比，贝那普利和川陈皮素三个剂量组24h尿蛋白定量、UREA、CREA和MDA明显降低(P＜005)，SOD和GSH明显升高(P＜005)。与正常组相比，模型组p AMPK、AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜005)；与模型组相比，贝那普利组和川陈皮素低、中和高剂量组AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达明显升高(P＜005)。结论 川陈皮素可保护肾功能，提高血清和肾脏抗氧化指标，同时增加AMPK和eNOS蛋白和mRNA表达，最终保护糖尿病肾脏损害。     

八段锦干预抑郁、焦虑的研究现状与思考

从八段锦的基本内涵、中医基础、应用效果、实施方法4个方面,分析、探讨近10年八段锦干预抑郁、焦虑的研究进展。研究证实,八段锦对原发性及继发性抑郁、焦虑都有良好的干预效果；认为在“健康中国”战略背景下,八段锦预防和治疗抑郁、焦虑具有广阔的应用前景。     

白鲜皮水提物对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化晚期病变形成的影响

目的研究白鲜皮水提物(cortex dictamni aqueous extract,CDAE)对载脂蛋白E基因缺损小鼠主动脉弓粥样硬化晚期病变形成的影响及其机制。方法将40只ApoE-/-小鼠随机分成空白对照组和CDAE高、中、低3剂量组(CDAE3.2、1.6、0.8 g·kg-1),每组10只。从第12周龄开始给药至18周龄。实验结束时测定给药前后总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平。取各组小鼠主动脉弓,OCT包埋,每只小鼠制作80张病理切片(厚6μm),计算各组主动脉弓粥样硬化病变的面积。体外实验测定CDAE给药后平滑肌细胞的增殖和迁移能力。结果CDAE给药后可明显减少动脉粥样硬化斑块面积,CDAE中、高剂量组给药后ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变面积均小于对照组(P<0.05,P<0.01),各给药组血脂水平均有不同程度的下降。体外实验表明,CDAE可明显抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖和PDGF诱导的平滑肌细胞迁移。结论CDAE对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化晚期病变形成具有明显的抑制作用,其作用机制可能与降低血脂水平,抑制平滑肌细胞的增殖和迁移能力有关。     

药用菊花中10种化学成分的含量测定及主成分分析

摘 要 目的：建立UPLC UV法同时测定药用菊花中10种化学成分的含量;找到控制不同品种菊花质量的关键因素。方法: 采用ACUITY UPLC BEH RP18（2.1mm×100 mm,1.7μm) 色谱柱;流动相A为含0.1%甲酸的甲醇:乙腈（5 ∶〖KG-*4〗2）溶液和B为0.1%甲酸进行梯度洗脱;流速0.2 ml·min-1;检测波长348 nm,柱温30℃,进样量1 μl;采用SPSS软件进行相关性分析与主成分分析（PCA）。结果: 各成分即绿原酸、木犀草素 7 O 葡萄糖苷、木犀草素 7 O 葡萄糖醛酸苷、3,5 二咖啡酰基奎宁酸、香叶木素 7 O 葡萄糖苷、大波斯菊苷、异绿原酸C、蒙花苷、田蓟苷基本达到基线分离,且线性关系良好（r>0.999）。平均加样回收率90%～105%,RSD均<1.5%,重复性和稳定性良好;相关性分析显示测定以上3类成分中各一种可反映菊花中主要成分的含量;PCA显示不同品种菊花各自聚在一起,相互分离。结论: 所建立的测定方法快速、稳定、可靠,适用于药用菊花中的10种化学成分的含量测定。该含量测定方法结合PCA可以用于不同品种药用菊花的分类和质量评价。     

五味子乙素对香烟烟雾提取物和脂多糖损伤的肺上皮细胞干预作用研究

目的:观察五味子乙素(Sch B)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用香烟烟雾提取物(CSE)联合脂多糖(LPS)作用于肺上皮细胞株A549,制备COPD急性加重期体外模型,并给予相应浓度的五味子乙素进行干预,通过MTT法测定各组细胞存活率、RT-PCR法测定细胞炎症因子白细胞介素8(IL-8)、环氧合酶2(COX-2)的mRNA水平; ELISA法测定细胞上清中IL-8、COX-2水平; Western blot法测定细胞磷酸化NF-κB蛋白水平。结果:4%CSE联合0. 1μg/ml LPS作用24 h能够促进肺上皮细胞增殖,炎症因子表达明显上升,给予Sch B能够明显抑制CSE联合LPS对细胞的增殖作用,改善细胞炎症状态;降低损伤细胞IL-8、COX-2 mRNA表达水平;减少细胞上清中IL-8、COX-2含量;降低细胞中磷酸化NF-κB的蛋白表达水平。结论:Sch B可改善CSE联合LPS引起的肺上皮细胞炎症,其作用机制可能与抑制肺上皮细胞增殖,抑制炎症因子表达,发挥抗炎作用有关。该研究为Sch B应用于COPD急性加重期的临床治疗提供实验依据。     

基于小粒径色谱柱的哮喘颗粒HPLC指纹图谱研究及多成分快速测定

目的采用小粒径色谱柱建立哮喘颗粒(XCG)HPLC指纹图谱,同时快速测定其中7个有效成分(莫诺苷、苦杏仁苷、马钱苷、升麻素苷、5-O-维斯阿米醇苷、木兰脂素、五味子醇甲)的方法。方法采用HPLC,色谱柱为Kromasil C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm);流动相为甲醇-乙腈-水;体积流量1.0 m L/min;梯度洗脱;检测波长:210 nm(苦杏仁苷、木兰脂素)、240 nm(莫诺苷、马钱苷、升麻素苷、5-O-维斯阿米醇苷、五味子醇甲及指纹图谱);柱温40℃;采用UPLC-Q-TOF/MS结合对照品对共有峰进行指认。结果得到分离度和重现性良好的HPLC指纹图谱,标定了20个共有峰,10批样品相似度在0.90以上;采用UPLC-Q-TOF/MS对共有峰进行指认,11个成分经对照品比对,分别为莫诺苷、苦杏仁苷、马钱苷、升麻素苷、5-O-维斯阿米醇苷、木兰脂素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素,并对其中与功效相关的成分莫诺苷、苦杏仁苷、马钱苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、木兰脂素、五味子醇甲进行定量分析,平均回收率在97.3%~103.8%(RSD均小于2.0%),10批次样品中7个成分量分别为莫诺苷0.51~0.69 mg/g,苦杏仁苷5.01~5.95 mg/g,马钱苷1.02~1.33 mg/g,升麻素苷0.35~0.45 mg/g,5-O-维斯阿米醇苷0.45~0.55 mg/g,木兰脂素0.38~0.48 mg/g,五味子醇甲0.89~1.08 mg/g,各成分量的RSD均小于11.0%。结论建立的指纹图谱和7个成分定量测定的方法,快速、准确、可靠,可以用于XCG的质量评价。     

LC-MS/MS分析银杏二萜内酯葡胺注射液在人尿液中的代谢产物

目的:研究银杏二萜内酯葡胺注射液在人尿液中的主要代谢产物及其代谢途径。方法:3名受试者静脉滴注银杏二萜内酯葡胺注射液后收集0~6 h的尿样,分别按酸化和不酸化样品处理后,以液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对样品进行分析。采用ACE C_(18)-AR色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),酸性HPLC条件流动相Ⅰ为乙腈-0.4%甲酸铵水溶液(p H3.2)梯度洗脱,中性HPLC条件流动相Ⅱ为乙腈-水梯度洗脱,流速0.7 m L·min~(-1)。通过比较空白尿样和给药后尿样的总离子流和提取离子流色谱图以及各个色谱峰的保留时间、准分子离子和二级碎片离子,分析银杏内酯A(GA),银杏内酯B(GB)和银杏内酯K(GK)在人体内可能的代谢产物。结果:除原型药外,共鉴定了12个代谢产物,其中GA相关的代谢产物有6个,包括5个Ⅰ相和1个Ⅱ相代谢产物;GB相关的有4个,包括1个Ⅰ相和3个Ⅱ相代谢产物;GK相关的有2个,包括1个Ⅰ相和1个Ⅱ相代谢产物。结论:GA在人体内主要的代谢途径为羟基化和内酯环水解,并可进一步共价结合成硫酸酯;GB主要的代谢途径为羟基化和内酯环水解,并可进一步共价结合成硫酸酯、葡萄糖醛酸苷或谷胱甘肽结合物;GK在人体内主要的代谢途径为甲基化葡萄糖醛酸结合反应。     

RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗体联合检测的诊断价值

【摘要】目的 探讨对类风湿性关节炎(RA)患者行血清类风湿因子(RF)、基质金属蛋白酶(MMP 3)及抗氨基甲酰化(CarP)抗体联合检测的诊断价值。方法 以我院2018年1月~2019年12月期间收治的RA患者94例作为观察组,非RA良性免疫性疾病患者92例作为对照组,以及健康体检者96例作为健康组。对比分析三组人群的RF、MMP 3及抗CarP抗体水平以及分析其相关性。采用Logistic回归分析进行多因素分析,并联合检测RF、MMP 3及抗CarP抗体水平判断RA的诊断效能。结果 观察组患者的血清RF、MMP 3及抗CarP抗体水平均高于对照组和健康组（P＜005）,对照组高于健康组（P＜005）。三组血清RF、MMP 3及抗CarP抗体水平间呈的正相关性(P＜005)。血清RF、MMP 3及抗CarP抗体水平均是RA疾病的独立危险因素。除特异度稍低于MMP 3指标检测外,联合检测的敏感度、特异度、约登指数及ROC曲线下面积均高于独立检测。结论 RF、MMP 3及抗CarP抗体联合检测在RA疾病诊断中具有较高敏感性和特异性,具有较好的临床应用价值。     

成都地区433例0～6岁学龄前儿童结肠镜检查病因学分析

【摘要】目的 分析成都地区0~6岁学龄前儿童接受结肠镜检查患者的临床特征、肠镜诊断,并进行结肠镜检查的安全性分析。方法 回顾性分析2018年1月～2020年8月在成都市妇女儿童中心医院接受结肠镜检查的0～6岁学龄前儿童433例临床资料,将其分为两组,其中0～3岁组227例,4～6岁组206例。比较两组便血、腹痛、便秘、腹泻、肛门/肠道包块等检查原因。比较两组在慢性结肠炎、过敏性结肠炎、息肉、血管异常疾病检出率。分析儿童结肠镜检查的安全性。结果 433例患儿共完成440例次结肠镜检查,382例次结肠镜插入到盲肠,完成全结肠检查,盲肠插镜率为868%。主要检查原因包括便血281例,不明原因腹泻114 例,腹痛13 例,肛门/肠道包块12 例,便秘5例,肠道术后3例,下消化道异物2例。两组在便血、腹痛、便秘、腹泻、肛门/肠道包块等检查原因方面比较差异有统计学意义（P＜005）。433例患儿共396例检出病变,其中慢性结肠炎158例,结直肠息肉127例,过敏性结肠炎62例,炎症性肠病5例,血管异常5例,其他过敏性紫癜、肠结核、痔疮、肛瘘、消化道异物等共39例。两组在慢性结肠炎、过敏性结肠炎、息肉、血管异常疾病检出比较差异有统计学意义（P＜005）。观察到不良事件45例,9例腹痛,22例术后发热,14例出血,多为一过性轻微不良反应,无穿孔发生。结论 儿童无痛结肠镜检查安全,对慢性腹泻、便血等疾病病因有重要诊断作用,学龄前儿童结肠镜下检出疾病有其特定疾病谱,0～3岁和4～6岁疾病分布也有差异。     

Sysmex XN-9000血液分析仪前体白细胞通道（WPC）原始/异常淋巴细胞报警可靠性的评价

目的评价Sysmex XN-9000血液分析仪(简称"XN-9000")前体白细胞通道(WPC)检测外周血触发WBC报警的可靠性。方法采用与手工血涂片白细胞形态镜检结果比对的方法,复核520例分别经Sysmex XE-2100血液分析仪(简称"XE-2100")和XN-9000检测触发WBC报警的标本,按报警种类统计判读结果。结果 XN-9000 WPC通道的Blast(原始细胞)报警比XE-2100特异性高(χ~2=6.98,P0.05),XN9000将假阳性率从XN2100的64%降低至36%(χ~2=6.18,P0.05)。XN-9000 WPC的Blast/Abn Lympho(原始/异常淋巴细胞)综合有效率90.4%、94.4%,高于XE2100的72.2%和80.1%(χ~2分别为5.6、6.33,P均0.05)。在WPC通道自动复测模式下,在所有被检标本(体验健康者和患者,包括新生儿)中,WPC通道Blast/Abn Lympho(原始/异常淋巴)报警的特异性和总有效率高于WDF(χ~2=6.15、4.14、6.02、4.88,P0.05),降低了WDF通道误报率;XN-9000(WDF/WPC)总报警复片率低于XE-2100(χ~2=4.33,P0.05);而XN-9000(WDF/WPC)Blast/Abn Lympho(原始/异常淋巴)报警的复片率为32%(84/260),低于XE-2100的41%(107/260)(χ~2=4.38,P0.05)。结论XN-9000 WPC通道相较于XE-2100,提高了Blast/Abn Lympho(原始/异常淋巴)报警的综合有效性,降低了误报率和复片率,提高了临床实验室的工作效率。