RNAi沉默CDC25a基因对人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的影响

目的:研究细胞分裂周期素25a(cell division cycle 25a,CDC25a)基因RNAi(RNA干扰)的重组慢病毒载体对人肝癌细胞Hep G2 CDC25a基因表达和裸鼠移植瘤生长的影响。方法:实验组以CDC25a基因重组慢病毒颗粒感染Hep G2细胞;阴性对照组以RNAi-NC慢病毒颗粒感染Hep G2细胞;空白对照组常规培养。三组细胞分别接种至裸鼠皮下,建立人肝癌裸鼠移植瘤模型。连续28 d观察裸鼠成瘤情况及移植瘤生长情况,28 d后测定肿瘤体积和重量。用RT-PCR、Western blot及免疫组织化学法检测移植瘤中CDC25a的表达情况。结果 :各组裸鼠接种Hep G2细胞后第7天均有肿瘤形成,实验组的肿瘤生长速度、体积和重量明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。实验组瘤体中CDC25a的m RNA及蛋白表达与阴性对照组及空白对照组相比明显下降(P<0.05)。结论:LV-CDC25a-RNAi重组体沉默Hep G2细胞的CDC25a基因后能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,提示CDC25a基因可被认为是肝癌治疗的关键靶点。     

沉默FABP-5基因对人肝癌HepG2细胞的影响

目的:研究RNA干扰技术的重组慢病毒载体沉默人肝癌Hep G2细胞中表皮脂肪酸结合蛋白-5(fatty acid binding protein-5,FABP-5)基因对其增殖、凋亡和侵袭力的影响及作用机制.方法:构建3个靶向FABP-5基因sh RNA载体,并筛选出最有效的靶点.将Hep G2细胞分为3组:实验组用FABP-5基因沉默重组慢病毒颗粒(LV-sh RNA-FABP-5)感染HepG2细胞;阴性对照组用空载慢病毒颗粒(LV-sh RNANC组)感染Hep G2;空白对照组正常培养.应用RT-PCR、实时荧光定量PCR检测FABP-5基因m RNA的表达;Western blot技术检测各组细胞FABP-5蛋白的相对表达;MTT法测定细胞体外增殖能力;Giemsa染色法检测细胞的克隆形成;细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力;流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测各组细胞增殖和凋亡的变化情况.结果:通过测序验证构建的FABP-5-shRNA表达载体,感染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜观察到细胞感染率90%.Real-time PCR和Western blot结果得出:相比空白对照组和阴性对照组,实验组的3种靶点FABP-5-sh RNA干扰序列中,LV-sh RNA-FABP-5(1)靶点中FABP-5表达的敲减率最高(P0.05),筛选出此组为最佳靶点;MTT法结果提示:实验组细胞490 n m处的吸光度(A)值在转染后第1-5天时均低于阴性对照组、空白对照组,差别有统计学意义(P0.05).Giemsa染色法结果显示:稳定转染Hep G2细胞后细胞的增殖能力明显下降(P0.05);细胞侵袭小室实验显示:与空白对照和阴性对照组相比,实验组细胞的侵袭力明显受到抑制(P0.05);流式细胞技术检测发现实验组的细胞相对于阴性对照组出现了明显的凋亡(P0.05).实验组较阴性对照组、空白对照组G2/M期延长,G1期缩短,差别具有统计学意义(P0.05).结论:人肝癌Hep G2细胞中沉默FABP-5基因可以有效抑制其表达,能够降低肝癌细胞的侵袭力,抑制肝癌细胞的增殖,将细胞周期阻滞于G2/M期,使其凋亡显著增加.     

经皮椎间孔镜微创手术治疗腰椎间盘突出症的临床疗效分析

目的 探讨经皮椎间孔镜技术治疗腰椎间盘突出症（LDH）的临床疗效。方法选择2014年7月～ 2015年7月应用局麻下经皮椎间孔椎间盘摘除术（PELD）治疗64例腰椎间盘突出症患者为研究对象,所有患者均为单节段腰椎间盘突出症者,平均病程19.6个月。采用腰腿痛视觉模拟评分（VAS）、JOA评分、ODI功能障碍指数评分评价患者疼痛及腰椎功能改善情况,改良MacNab标准评定疗效。结果 术后VAS、ODI评分较术前明显降低（P＜0.01）, 术后JOA评分较术前明显增高（P＜0.01）。术后12个月时用改良MacNab标准评定疗效,优44例,良16例,可4例,优良率93.8%。结论 应用PELD治疗腰椎间盘突出症近中期疗效肯定,随着恢复时间延长,腰椎功能逐渐改善。     

髂腰肌囊扩张的CT、MRI诊断

髂腰肌囊扩张可继发于滑囊炎症或多种髋关节病变,临床上以腹股沟区肿块,邻近结构受压,髋关节疼痛、功能障碍为主要表现,国内文献报道较少。CT和MRI可对其作出明确的诊断,从而可避免不必要的外科有创检查。笔者收集22例经随访复查或手术病理证实的髂腰肌囊扩张患者的CT、MRI影像     

基于数学形态学的图象骨架提取与重建

提出了基于数学形态学理论来提取图象中的骨架并由骨架重建图象的方法。通过在MATLAB中的仿 真,验证了此方法是提取骨架与重建图象的一种有效方法。     

H2O2、LPS 和 TNF-α诱导人类脐静脉内皮细胞损伤的实验研究

目的探讨人类脐静脉内皮细胞损伤模型建立方法,为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法分离培养人类脐静脉内皮细胞,分别采用不同浓度的过氧化氢（H2O2）、脂多糖（LPS）、肿瘤坏死因子（TNF）‐α刺激细胞,孵育不同时间后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞活力（OD值）。结果各浓度H2O2损伤组较对照组OD值显著降低（P＜0．01）,不同浓度H2O2损伤组间OD值无统计学差异（P＞0．05）。0．1μg／mLLPS损伤组与对照组OD值无统计学差异（P＞0．05）;其余各浓度LPS损伤组较对照组OD值显著降低（P＜0．05）,且LPS浓度在一定范围内,OD值随LPS浓度的增加及作用时间的延长而降低,具有一定的浓度与时间依赖性。各浓度TNF‐α损伤组较对照组OD值显著降低（P＜0．01）,且TNF‐α浓度在一定范围内,OD值随TNF‐α浓度的增加及作用时间的延长而降低,具有一定的浓度与时间依赖性。结论H2O2、LPS和TNF‐α能体外损伤人类脐静脉内皮细胞,成功建立人类脐静脉内皮细胞损伤模型,且在一定浓度范围内各损伤因子对人类脐静脉内皮细胞损伤程度呈浓度和时间依赖性。     

广西和云南树鼩群体遗传多样性的比较分析

目的 比较分析我国广西、云南两个树鼩群体的遗传差异和分化程度，推动树鼩优良品系的培育和优化实验动物模型。方法 提取广西和云南各32只树鼩的全血基因组DNA，分别采用9对荧光标记微卫星引物进行PCR扩增，通过毛细管电泳技术检测扩增片段，并利用POPGENE等软件比较两个树鼩群体的遗传相关指标。结果 广西和云南两个树鼩群体平均期望杂合度（He）为0.703，平均多态信息含量（PIC）为0.725，Fis均值>0。CCBL1B、CCDC61、EDA1和OPA3四个位点表现为极显著偏离哈迪-温伯格平衡。两群体的遗传距离及无偏遗传距离分别为1.277和1.268，遗传相似系数约为0.28。遗传结构变异的分布情况显示61.57%的微卫星遗传变异来自于群体内部，38.43%存在于群体之间。STRUCTURE分析发现广西和云南树鼩为中缅树鼩群体的两个不同的亚种。结论 广西和云南树鼩两个群体的遗传多样性都较丰富，两个群体间具有较大的遗传差异和分化程度，遗传变异主要来源于群体内部。     

肾上腺创伤的CT表现

目的 探讨肾上腺损伤(AGT)的CT表现特征.方法 回顾性分析1712例因腹部钝伤行CT检查的患者中AGT患者的CT检查结果.结果 1712例中,共发现AGT 29例(1.7%),右侧损伤23例,左侧3例,双侧3例,共32个病灶.主要CT表现:(1)肾上腺血肿:22例25个病灶,呈孤立立圆形或卵圆形肿块,平扫为高密度或混杂密度,三期动态增强扫描均无强化,肿块周围见推移张开的肾上腺肢体,呈弧形线状明显强化.(2)肾上腺肿胀:4例,表现为受损部肾上腺肢体肿胀,体积增大.(3)肾上腺弥漫性出血:3例,肾上腺被出血包埋,正常肾上腺结构消失.1例伴对比剂外溢,手术证实为肾上腺碎裂伴活动性出血.伴随征象主要包括伤侧肾上腺周围条纹状出血浸润影,膈肌脚增粗等.合并其他胸腹部脏器损伤25例.结论 AGT具有特征性CT表现,采用合理扫描技术并正确认识AGT的CT征象有助于避免漏诊和误诊.     

山东省三级甲等妇幼保健院1995-2004年发表论文的文献计量学研究

对山东省3家三级甲等妇幼保健院近十年发表的科技论文使用文献计量学方法进行统计学处理。这3家妇幼保健院10年间发表论文905篇，年院均30．16篇，研究性论著占42．21％，在核心期刊上发文占35.47％，妇产科与儿科论文占50．5％，基金资助论文仅占0．77％，高产作者有49人。结果显示，妇幼保健机构发表论文数量增多，     

山东省三级甲等妇幼保健院1995-2004年发表论文的文献计量学研究

 

对山东省3家三级甲等妇幼保健院近十年发表的科技论文使用文献计量学方法进行统计学处理。这3家妇幼保健院10年间发表论文905篇，年院均30.16篇，研究性论著占42.21%，在核心期刊上发文占35.47%，妇产科与儿科论文占50.5%，基金资助论文仅占0.77%，高产作者有49人。结果显示，妇幼保健机构发表论文数量增多，质量提高，成绩显著，但仍存在不少问题，有待今后进一步改善。