肝癌相关新基因的研究进展

随着分子生物学、细胞生物学、分子遗传学和人类基因组学等学科的飞速发展 ,人们对肿瘤发病机制的认识更加深入。肝癌作为我国高发恶性肿瘤之一 ,它的发生是多因素、多阶段、多基因相互作用的结果。自 1984年顾健人等对原发性肝癌及肝癌 740 2细胞株DNA转染NIH 3T3所得转化细胞     

叔丁基对羟基茴香醚和苯巴比妥对黄曲霉毒素B_1诱发的大鼠肝癌前病变发展过程的影响

本文应用AFB_1致肝癌作用短期实验模型,采用三种酶偏差状态的重叠观察和γ-GT( )灶平面及立体指标的连续、定量分析,研究BHA对AFB_1诱发的大鼠肝癌前病变发展过程的影响,发现BHA当用于AFB_1之后,对AFB_1诱发的大鼠肝癌前病变无促进作用,而有轻度的抑制作用。结合考虑肿瘤研究所病理室过去的实验所显示的当BHA与AFB_1同时使用时具有明显的抑肝癌作用的结果,认为将BHA作为我区肝癌高发人群的化学预防剂已具有一定的现场试用价值。     

Survivin在AFB1高暴露地区肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Survivin在黄曲霉毒素B1(AFB1)高暴露地区肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用.方法:用逆转录聚合酶链反应检测来自广西南部黄曲霉毒素B1高暴露地区患者手术切除肝癌及其癌旁组织中Survivin mRNA的表达情况.结果:Survivin mRNA在55例HCC及其癌旁组织中的检出率分别为85.5%(47/55)及40.0%(22/55),两者差异有显著性(P＜0.01).Survivin mRNA在HCC组织中的表达率与临床分期(P＜0.05)和肿瘤直径(P＜0.05)相关.结论:Survivin在HCC发生发展过程中起重要作用,HCC组织中的Survivin mRNA可作为AFB1高暴露地区HCC预后不良的参考指标.     

金蒲抑瘤片在实验诱发大鼠肝癌过程中的作用

目的探讨金蒲抑瘤片对黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)致肝癌作用的影响。方法实验动物随机分为高剂量、低剂量和对照组。用AFB1处理各组动物,高、低剂量组大鼠在接受AFB1期间分别喂含量为9.3和2.3g/kg的金蒲抑瘤片混合饲料,对照组喂基础饲料。8周后处死动物,观察各组动物肝组织内γ-谷氨酰转肽酶阳性肝细胞增生(γ-glu-tamyltranspeptidase-positive hyperplastic livercell,γ-GT)灶的数量和大小。结果高、低剂量金蒲抑瘤片均能减少AFB1诱发的γ-GT灶的数量和大小高、低剂量组的数量分别为0.90和3.72个/cm2,均低于对照组6.10个/cm2,抑制率分别为85%和39%,高剂量组与对照组相比差异有统计学意义,t=2.597,P=0.028。高、低剂量组的大小分别为0.24和1.94mm2/个,均低于对照组2.36mm2/个,抑制率分别为90%和17%,但差异无统计学意义,P>0.05。结论金蒲抑瘤片有减少AFB1诱发大鼠肝γ-GT灶的数量和大小的作用,而高剂量金蒲抑瘤片的减少趋势更强。     

抑癌基因PTEN与消化系统肿瘤相关性研究进展

随着对肿瘤相关基因研究的深入,越来越多的抑癌基因被发现.PTEN[1](phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10)为1997年发现的一个肿瘤抑制基因.该基因一经发现就受到肿瘤分子生物学等研究领域的广泛关注,随后的研究证实PTEN在许多肿瘤中均存在突变和/或缺失.目前PTEN已成为肿瘤学基础研究和临床研究的热点基因之一.     

RNAi沉默MCM7基因对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤影响研究

目的探讨微小染色体维持蛋白7(miniehromosome maintenanceprotein7,MCM7)基因RNAi(RNA interference)的重组慢病毒载体,对人肝癌细胞SMMC-7721 MCM7基因表达和裸鼠移植瘤生长的影响。方法构建重组逆转录慢病毒载体MCM7-shRNA,以MCM7基因沉默重组慢病毒颗粒(LV-shRNA-MCM7)感染SMMC-7721细胞,作为实验组;以对照慢病毒颗粒(LV-shRNA-NC)感染SMMC-7721细胞,作为阴性对照组;空白对照组常规培养,不做任何处理。通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。3组细胞分别接种至裸鼠皮下,建立人肝癌裸鼠移植瘤模型。观察裸鼠成瘤情况、移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线;4周后测定肿瘤体积和质量,并用RT-PCR、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测移植瘤中MCM7的表达情况。结果 MCM7-shRNA慢病毒载体构建成功。裸鼠接种癌细胞后第6天均有肿瘤形成,与空白对照组和阴性对照组相比,实验组的肿瘤生长速度明显减慢,实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均体积分别为(27.72±7.80)、(81.86±10.91)和(79.75±16.61)mm3,差异有统计学意义,F=61.949,P<0.05;实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均质量分别为(0.19±0.06)、(0.501±0.14)和(0.509±0.18)g,差异有统计学意义,F=18.41,P<0.05。实验组MCM7mRNA的相对表达量为0.253±0.198,阴性对照组1.213±0.548,空白对照组1.201±0.744,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=4.091,P<0.05;实验组MCM7蛋白相对表达量为0.207±0.015,阴性对照组1.116±0.062,空白对照组1.088±0.040,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=292.778,P<0.05。MCM7蛋白在阴性对照组和空白对照组中阳性表达率均为100%(10/10),在实验组中为30%(3/10),实验组明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义,χ2=18.261,P<0.001。结论慢病毒沉默SMMC-7721细胞MCM7基因表达能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,MCM7基因可能成为肝癌基因治疗的有效靶点。     

丙型肝炎病毒感染树鼩的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染是世界范围内肝病流行的主要病因,是当前全球关注的严重的公共健康问题之一。建立适用、可靠的HCV感染动物模型,是推动研究HCV感染和慢性化机制、研制HCV疫苗和防治药物所必需。但HCV像其他嗜肝病毒一样具有非常严格的种属特异性,目前除     

乙肝病毒X基因转基因树鼩模型的建立和病理学研究

目的:探索以精原细胞作为载体建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型的可行性.方法:首先构建带乙肝病毒pcDNA3.1- HBx基因的表达载体;然后以脂质体2000包被之.将此复合物以微量注射器注入8只雄性树鼩之睾丸组织中,1周后重复注射1次.注射后6周,使处理过的雄树鼩与雌性树鼩交配.在仔树鼩出生后1个月,取其肝组织作活检,并以多聚酶链式反应(PCR)对其DNA表达进行鉴定,观察其内是否存在乙肝病毒X基因.结果:处理的8只雄性树鼩中,6只具有生育能力,产仔树鼩11只.其中,1只仔树鼩乙肝病毒X基因阳性(阳性率9.09%).基因测序结果证实为乙肝病毒X基因.病理检查结果显示仔树鼩肝组织的改变包括:肝细胞坏死、慢性炎细胞在汇管区的浸润.结论:以精原干细胞作为载体,建立带乙肝病毒X基因的树鼩转基因动物模型是可行的.     

树应用于疾病动物模型的研究进展

树(tupaia,tree shrew)是最低等的灵长类哺乳动物,主要分布于亚洲东南部的热带和亚热带地区。由于具有体小、比较容易饲养、价廉及新陈代谢和大体解剖远比啮齿类动物更接近人类等优点,树已广泛用于病毒、细菌、寄生虫和神经、内分泌、泌尿、肿瘤等方面的研究。疾病动物模型为研究疾病的发病机理、治疗及防治提供了平台。本文对树作为疾病动物模型的研究作一概述。1病毒1·1甲型肝炎病毒(HAV)詹美云等[1]用甲肝病毒感染9只成年健康树。78%的树血清中测出了HAV抗体,转阳率75%。感染后7~13d由粪便中开始排毒。部分动物转氨酶升高,…     

实性肺癌能谱CT参数与Ki-67表达水平的相关性研究

目的探讨实性肺癌能谱CT定量参数与Ki-67表达水平之间的关系。方法回顾性分析了152例经手术或活检证实的实性肺癌患者的临床资料。采用免疫组织化学检测Ki-67阳性癌细胞百分率(Ki-67值),反映Ki-67表达水平。根据Ki-67值分为3组:高水平组(大于30%),中水平组(10%~30%),低水平组(小于等于10/%)。用GSI Viewer软件测量和计算增强胸部能谱CT(静脉期)的定量参数,包括碘浓度(IC)、40和70 keV的CT值(CT40keV、CT70keV)、能谱衰减曲线的斜率(K)和标准碘浓度(NIC)。用单因素方差分析比较3组间能谱参数的差异。计算定量参数与Ki-67表达水平之间的Spearman相关系数。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析,计算曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度来衡量各参数的诊断性能。结果单因素方差分析显示3组间各定量参数均有显著差异(P<0.05)。LSD-t两两比较分析显示,高水平组分别与低水平组、中表达组间的IC、NIC、CT40keV、CT70keV、K有显著差异(P<0.05)。各定量参数与Ki-67表达水平呈负相关(|r|均<0.45,P<0.001)。ROC曲线分析表明,IC和K在鉴别高水平组和非高水平组方面表现最好(AUC分别为0.745和0.746)。IC和K的敏感度均为69.4%,特异度74.4%。结论能谱CT定量参数(IC、NIC、CT40keV、CT70keV、K)可用于鉴别实性肺癌Ki-67高表达与非高表达水平,并与Ki-67表达水平呈负相关,为评估实性肺癌癌细胞增殖能力提供了参考。