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1.
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目的构建携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc),并对该病毒在Lewis大鼠体内的表达和生物学活性进行初步研究,探讨以该重组腺相关病毒载体应用于类风湿关节炎基因治疗的可行性.方法首先以RT-PCR分别从大鼠脾细胞和大鼠淋巴细胞总RNA中扩增出大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段基因,并以重叠延伸PCR的方法将二者融合后克隆入pSNAVⅠ载体质粒进行重组病毒生产.在获得重组病毒后于Lewis大鼠肌肉注射,于不同时间ELISA测定血清ratTNFR:Fc表达,并以TNF-α细胞毒中和实验测定重组病毒表达产物的生物学活性.结果所构建的重组病毒rAAVⅠ/ratTNFR:Fc基因结构与预期一致;病毒于Lewis大鼠肌肉注射后可表达ratTNFR:Fc蛋白,含有ratTNFR:Fc蛋白的血清可以有效中和大鼠TNF-α对L929细胞的杀伤作用.结论本研究所构建的携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)可以用来作为阻断TNF-α的手段于大鼠类风湿关节炎模型上进行基因治疗研究. 相似文献
4.
重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)国家标准品的研制 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:建立符合WHO重组细胞因子要求,用于rhTNF质量控制的国家标准品.方法:用NIBSC提供的国际标准品为标准,采用L929细胞体外活性测定系统,按统一方案组织了4家实验室,对这批rhTNF-α国家标准品(批号960508)的效价进行协作标定.结果:经统计学分析,均数的95%可信区间为3289~4266IU/支,单次测定的95%标准值范围为1735~8087IU/支.这批国家标准品效价确定为3500IU/支.4种不同温度存放27个月的样品,效价测定结果表明其效价稳定.结论:这批rhTNF-α经统一协作,质量可靠,效价稳定,可用作国家标准品使用. 相似文献
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我国防治非典型肺炎(SARS)的新生物制品研发现状 总被引:2,自引:0,他引:2
生物制品(包括疫苗、抗毒素、诊断试剂等)为人类防治传染病一直发挥着不可替代的作用,在防治SARS的科研攻关中,针对抗SARS的生物制品又占据了很重要的地位。由于人们对SARS冠状病毒以及致病规律的研究很有限,新生物制品研究的特殊性决定了不同种类产品的研究开发有着不同的特点。只有认真把握规律性事物,遵循客观规律,讲科学、赶进度,才能保证我国科技攻关药品和疫苗项目的顺利进行。现将目前我国针对SARS研究开发的新生物制品的现状作一介绍。 相似文献
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目的:证实鬼臼毒素自旋标记物GP4和GP7体外对Molt4B细胞周期和大分子合成的抑制作用.方法:MTT、同位素标记法和流式细胞分光光度仪BrdU/DNA分析法.结果:GP4,GP7和依托泊苷(002-100mmol·L-1,48h)抑制细胞生长量效曲线不同,其IC50值分别为0.11,4.7,1.6mmol·L-1,并降低DNA、蛋白质合成.GP4(10mmol·L-112h)增加有丝分裂指数,为对照组的5倍;GP7和依托泊苷都降低有丝分裂指数,分别为对照组的1/3和1/10.GP4主要阻止细胞于G2/M期,而GP7与依托泊苷相似,将细胞阻滞在S和G2期.结论:GP4和GP7抑制Molt4B细胞生长和大分子合成,其作用机制不同 相似文献
8.
本文报告抗高血压药碘杂环—64(IHC—64)对小鼠免疫功能的影响,并同免疫抑制剂CY和强的松龙进行比较。IHC—64 1.5,3mg/kg ip×7对小鼠胸腺重、牌重无显著影响,但对PHA6mg/kgim×3诱导的体内淋巴细胞转化有明显促进作用。相同剂量给药4天,IHC—64不但对SRBC所致的血清溶血素、凝集素的产生无明显影响而且对小鼠脾脏抗体形成细胞(PFC)特异性玫瑰花形成细胞(SRFC)和脾细胞总数均无显著影响。说明IHC—64对免疫功能有选择性促进作用。 相似文献
9.
由于生物制品的复杂性,化学仿制药物的研究方法并不完全适用于生物仿制药物。本文将就国内外对于生物仿制药注册申请的相关技术要求进行简要回顾,并从药品评价角度提出一些对于生物仿制药药学研究问题的个人观点和看法。 相似文献
10.
目的:应用蛋白质N-末端序列分析仪测定重组人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)C-末端氨基酸序列。方法:应用多肽分析软件选择合适的蛋白内切酶完全酶切aFGF,酶切后用RP—HPLC进行分离,收集软件预测C-末端肽段保留时间处的肽段峰,用蛋白质N-末端序列分析仪直接测得该肽段氨基酸全序列。结果:实测肽图图谱与软件预测理论图谱一致,所得到的肽段为aFGF C-末端肽段,经测序其结果与理论序列完全一致。结论:通过选择合适的蛋白内切酶,可运用RP—HPLC和蛋白质N-末端序列分析仪测定基因工程产品C-末端氨基酸序列。 相似文献