1例2型糖尿病合并肝硬化患者的护理

正糖尿病授权教育是一种以患者为中心的合作性方式来适应患者现实生活状况的教育模式[1]。以授权理论为指导的糖尿病教育是在充分尊重患者的责任与能力的前提下开展的,它要求教育过程应始终以患者为中心,教育者主要是对行为改变的过程予以充分的关注,帮助患者学会控制自己的行为和培养行为改变的内在驱动力,与患者共同制定符合个体的正确策略[2]。肝硬化由于目前尚无有效的治愈方法,患者病情迁延、久治不愈,丧失劳动能力等不仅造成患者生活质量不佳,而且给家庭和社     

清血汤治疗肾性高尿酸血症疗效观察

[目的]观察中药清血汤治疗肾性高尿酸血症的疗效。[方法]将60例患者随机分两组,每组各30例。对照组采用常规治疗加别嘌醇,治疗组用常规治疗加清血汤,8周后统计疗效。[结果]治疗组可以降低血肌酐、尿素氮、血尿酸和升高肾小球滤过率,与治疗前相比差异有统计学意义(P0.01);治疗组降低血肌酐、尿素氮和升高肾小球滤过率与对照组相比差异有统计学意义(P0.01);对照组降低血尿酸与治疗组相比差异有统计学意义(P0.01)。[结论]清血汤可以改善慢性肾脏病3期继发高尿酸血症(肾性高尿酸血症)患者的临床症状、肾功能,并降低升高的血尿酸。     

甘草酸磷脂复合物自乳化浓缩液的稳定性考察

目的考察甘草酸磷脂复合物自乳化浓缩液的稳定性。方法通过低温试验(4℃),冷热循环试验(4℃,37℃)和长期试验,观察自乳化时间及乳化效果,并用HPLC测定不同条件下甘草酸的含量。结果经低温存放7 d、冷热循环7 d、常温留样6个月,自乳化浓缩液均为澄清透明溶液,无药物析出,所考察指标未见明显改变。结论甘草酸磷脂复合物自乳化浓缩液澄清透明,性质稳定。     

伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白类似基因的原核表达和抗体制备

目的 克隆伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白（PbTIP）类似基因,原核表达PbTIP重组蛋白,并制备其抗血清。 方法 在GenBank中检索PbTIP类似基因序列,设计特异性引物,从伯氏疟原虫ANKA株扩增获得该基因cDNA片段,克隆入原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠埃希菌BL21（DE3）。经异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）鉴定重组蛋白。用重组蛋白GST-PbTIP包涵体免疫BALB/c小鼠,以间接荧光抗体试验(IFAT)和Western blotting鉴定产生的抗体。 结果 获得了纯化的重组蛋白GST-PbTIP及其相应抗体,该抗体可以识别相对分子质量（Mr）约为60 000的伯氏疟原虫感染红细胞内的PbTIP蛋白。 结论 获得PbTIP重组蛋白及其相应抗体。     

Tet-on和Cre／loxP双调控肝靶向表达Cre重组酶转基因小鼠的制备和功能评价

目的制备Tet-on和Cre/loxP系统双重调控下肝靶向性表达Cre重组酶的转基因小鼠rtTALAP-1/LC-1并评价其功能,为最终建立可突破胚胎期免疫耐受的双调控型HCV转基因小鼠模型奠定基础。方法选取适龄rtTALAP-1转基因小鼠与LC-1转基因小鼠交配,PCR法检测子代rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠基因组中是否插入了rtTA元件和Cre基因片段。双阳性rtTALAP-1/LC-1小鼠dox诱导1周后,以小动物活体成像系统检测小鼠肝脏的Luc萤光素酶信号,免疫组化检测Cre重组酶在小鼠肝脏等组织中的表达状况。结果 rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠在dox诱导后,仅在其肝脏检测到清晰的Luc萤光素酶信号,而其他脏器均未检测到萤光信号;免疫组化法也仅在小鼠肝细胞核中检测到Cre重组酶的表达,心脏、肾脏和骨骼肌等其他组织均未检测到Cre重组酶的表达。结论成功制备了rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠,其靶基因表达的诱导反应性和肝靶向性均良好,为最终制备双调控型丙型肝炎病毒（HCV）转基因小鼠模型奠定了良好的基础。     

调控型表达丙型肝炎病毒NS3／4A蛋白酶转基因小鼠的建立

目的建立调控因素存在下表达丙型肝炎病毒（HCV）NS3/4A丝氨酸蛋白酶的转基因小鼠。方法采用分子克隆技术构建可受Tet-On调控系统和Cre-LoxP基因敲除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的真核表达质粒PBI-Ⅲ/LoxP-Luc-PolyA-LoxP-NS3/4A。该重组质粒线性化后,经显微注射制备转基因小鼠。首建鼠及经PCR检测阳性的子代鼠与C57BL/6小鼠交配传代。选择部分F2鼠与已经稳定建系的转基因小鼠Lap杂交,利用在体生物发光成像系统（BLI）检测肝脏稳定表达荧光素酶（Luc）报告基因的经盐酸强力霉素（Dox）诱导的双转基因子代鼠,并选择性针对稳定表达系传代扩群。结果酶切鉴定和测序分析显示重组载体构建成功。经PCR检测得到6只转基因首建鼠,其中3只可繁殖传代并持续检测到阳性子代鼠。BLI结果显示,由其中1只首建鼠传代而来的不同F2鼠与Lap鼠杂交得到的部分双转基因鼠肝脏部位发光信号强烈,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达。结论建立了转基因小鼠NS3/4A,并筛选到调控因素存在时转入外源基因特异稳定表达的转基因小鼠,为进一步建立严格调控型表达NS3/4A蛋白酶的小鼠模型奠定基础。     

甘草酸磷脂复合物自乳化胶囊与肠溶胶囊的药动学比较

目的以市售甘草酸二铵肠溶胶囊为参比制剂,考察自制甘草酸磷脂复合物自乳化胶囊在Beagle犬体内的相对生物利用度。方法Beagle犬6只,自身交叉对照、单剂量灌胃甘草酸磷脂复合物自乳化胶囊或市售肠溶胶囊。采用HPLC测定血浆中的甘草酸浓度,DAS2．0程序拟合药代动力学数据。结果参比制剂和受试制剂主要的药动学参数：Tmax分别为（6．00±0．000）h,（2．917±0．585）h;Cmax分别为（12．756±1．075）mg·L^-1,（17．75±1．604）mg·L-1;AUC0-t分别为（150．89±22．850）mg·h·L-1,（211．196±40．880）mg·h·L^-1;AUC分别为（159．39±21．862）mg·h·L^-1,（221．287±2．164）mg·h·L^-1,甘草酸磷脂复合物自乳化制剂相对生物利用度（F％）为139．76％。结论Beagle犬体内甘草酸的药动学规律均符合一级吸收二室模型,与市售胶囊剂相比,自乳化制剂的Cmax、AUC0-t,AUC0-∞均高于肠溶胶囊,表明自乳化制剂能显著提高药物的生物利用度,初步达到了设计要求。     

脑型疟小鼠小胶质细胞的活化特征分析

目的利用血脑屏障分隔小胶质细胞与外周巨噬细胞,探讨小胶质细胞在实验型脑型疟(experimental cerebral malaria,ECM)发生中的活化特征。方法利用依文思兰渗出法确定ECM小鼠血脑屏障开放时间,在不同感染时间点,采用流式细胞技术和间接免疫荧光法检测小胶质细胞的活化特征,采用实时荧光定量PCR技术检测炎症和活化因子的变化。结果ECM小鼠血脑屏障显著开放始于感染后第6 d。感染后第5 d,脑内促炎因子、巨噬细胞活化相关因子的转录水平以及CD11b⁺、CD45⁺细胞的占比和数目均显著上调。CD11b⁺细胞可根据CD45表达量分群,其中CD45^high亚群占比在感染后第5 d下调而第7 d上调。结论小胶质细胞参与ECM小鼠脑内炎症反应,且其活化与CD45表达量相关,CD11b⁺CD45^high可作为活化小胶质细胞的标志物。