MLVA基因分型方法研究世界多地区布鲁氏菌的流行病学特征

目的 通过多位点串联重复序列分析（MLVA）研究世界多国家和地区分离的布鲁氏菌分子流行病学特征。方法 选择11个可变数目串联重复序列位点,使用BioNumerics软件,采用非加权配对算术平均法,对1953－2013年全球48个国家和地区分离的布鲁氏菌VNTR资料进行聚类分析,绘制系统发育树和最小生成树,分析菌株的流行分布特征。结果 布鲁氏菌系统发育树的进化关系与经典的生物分型方法基本上吻合,但猪种生物5型菌株与其他猪种生物1、2、3和4型菌株关系较远;鲸种布鲁氏菌也分为2个部分,并且关系较远。2005－2008年出现了全球布鲁氏菌病（布病）流行,中国是布病多发区,主要流行株为羊种布鲁氏菌,其次是牛种布鲁氏菌,猪种布鲁氏菌主要出现在中国南部省份,犬种布鲁氏菌只在犬中出现,人类没有发现病例。结论 布鲁氏菌具有种的系统发育树特征,并且具有分离的时间、地域和宿主的特异性,这些特征对于布病的防控具有重要意义。     

院外延续护理对癌痛患者疼痛治疗效果及生存质量的影响

目的探讨院外延续护理对癌痛患者治疗效果及生存质量的影响。方法选取2015年2月至2017年1月收治的确诊为恶性肿瘤的患者80例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各40例。对照组开展传统的护理照护,观察组则在对照组基础上实施院外延续护理。出院后两组患者均随访6个月,比较两组患者在干预前及随访6个月后的疼痛效果和生存质量状况。结果观察组治疗后生活质量综合评定表(GQOLI-T4)评分、体力状况分级评分及Karnofsky评分功能状态(KPS)均优于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);随访6个月,观察组患者疼痛评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组GQOLI-74评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论院外延续护理能改善癌痛患者的疼痛效果和生活质量。     

布鲁氏菌微滴式数字PCR方法的建立与应用

目的 建立可对布鲁氏菌准确定量的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)方法。方法 使用以布鲁氏菌bscp31基因为靶标的引物和探针,摸索最佳的引物和探针工作浓度,确定反应体系和扩增条件,评价所建立方法的灵敏性、特异性及对疫情相关血液标本的检测效果。结果 ddPCR反应体系中最佳引物和探针浓度分别为0.8 μmol/L和0.4 μmol/L;最佳扩增条件:95 ℃ 10 min;95 ℃ 30 s,60 ℃ 1 min,循环40次;98 ℃酶失活10 min。布鲁氏菌核酸DNA为0.96 ng/反应~3.68 fg/反应时,ddPCR检出靶标基因拷贝数为2.00×10⁵拷贝/反应~1拷贝/反应,ddPCR测得值的对数值与DNA浓度的对数值有线性关系。在疫情相关血液标本DNA的检测中,ddPCR阳性率远高于培养法和试管凝集法;16份人血液标本中靶标基因浓度为5~65拷贝/mL血液(平均29拷贝/mL血液),5份羊血液标本中靶标基因浓度为25~245拷贝/mL血液(平均98拷贝/mL血液)。结论 ddPCR灵敏性高,可检测微量核酸DNA,适合临床血液标本的检测以及布病病原体的分子流行病学调查。     

五种布鲁氏菌核酸检测试剂盒检测性能的评价北大核心CSCD

目的比较5种布鲁氏菌核酸实时荧光PCR检测试剂盒的一致性和检出能力,为临床实验室选择检测方法和布鲁氏菌的诊断提供参考依据。方法选用经病原学检测确定为布鲁氏菌阳性的血液样本38份,健康人的血液样本24份,潘氏变形杆菌、溶藻弧菌、河弧菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌DNA各1份,使用5种试剂盒(编号A-E)分别进行核酸检测,比较5种试剂盒临床样本检测的一致性;选择1份阳性样本核酸用无RNA酶水梯度稀释得到5个浓度(浓度1:4453.13 fg/μL,浓度2:1113.28 fg/μL,浓度3:278.32 fg/μL,浓度4:69.58 fg/μL,浓度5:17.40 fg/μL),每个浓度使用5种试剂盒(编号A-E)分别进行3次检测,比较5种试剂盒的阳性检出率及批内重复性。结果5种试剂盒检测67份DNA样品的符合率稍有不同,试剂盒ABDE的符合率均为100%,试剂盒C的符合率为98.51%。批内重复性显示5种试剂盒在浓度1、浓度2、浓度3水平重复检测DNA的Ct值变异系数均<5%;在浓度1与浓度4梯度区间,试剂盒的阳性检出能力比较显示试剂盒A、B、D较高,为11/12,试剂盒C和E较低,为8/12。结论5种试剂盒的真实性和可靠性较好,灵敏度和符合率稍有差别,特异度均为100%;重复性较好,检测性能良好。部分试剂盒对弱阳性样本的检出能力不强,该类样本可使用多种试剂盒复核,以保障结果的准确性。     

约束对留置管道患者预防非计划性拔管效果的系统评价

目的采用系统评价的方法就约束对留置管道患者预防非计划性拔管的效果进行研究,以期为护理实践提供依据。方法计算机检索PubMed、Ovid、Cochrane图书馆、EMBASE、CBM、CNKI等数据库,手工检索相关的中文护理杂志并追踪纳入文献的参考文献,按照纳入和排除标准获取有关约束对非计划性拔管影响的所有随机对照试验和临床对照试验,质量评价后综合应用定性和定量方法对提取的数据进行分析。结果共纳入8篇文献,数据分析后显示:(1)约束组意外拔管率高于无约束组(OR:2.84,95%CI:1.91～4.24);(2)对约束者加强护理干预组意外拔管率低于单纯约束组(OR:0.2,95%CI:0.11～0.36),前者并发症发生率低于后者(OR:0.19,95%CI:0.1～0.38)。结论单纯约束对预防非计划性拔管的效果不明显,有时反而成为增加其发生的因素之一,但对约束患者加强护理干预后则效果优于单纯约束。鉴于目前国内外有关此项的研究质量不高,今后仍需要高质量的、设计严谨的临床试验来验证约束对非计划性拔管的影响。     

肿瘤坏死因子α拮抗剂治疗Stevens-Johnson综合征17例

目的：探讨肿瘤坏死因子拮抗剂在药物引起的Stevens?Johnson综合征治疗中的作用。方法对17例药物引起的Stevens?Johnson综合征患者,在判断无结核、肝炎、其他重症感染和肿瘤后,采用肿瘤坏死因子α拮抗剂益赛普25 mg（首剂加倍）皮下注射,每3 d 1次,共6次,同时给予支持治疗和复方甘草酸苷注射液抗炎、护肝。结果17例患者均痊愈。15例发热患者体温在益赛普初次注射24~48 h内逐渐下降,72 h后恢复正常。所有患者在治疗24 h内停止新发水疱,皮疹色泽由鲜艳转为暗红,72 h后明显控制,2周后基本恢复,4~5周完全恢复。黏膜部位恢复慢于皮肤损害。14例伴发肝肾损害患者转氨酶在益赛普治疗后逐渐下降,治疗后2~4周基本恢复正常;尿素氮和肌酐在治疗1~2周后开始下降。外周血肿瘤坏死因子α水平在治疗后3周内基本下降或维持在正常范围。结论对于Stevens?Johnson综合征患者尽早、足量使用肿瘤坏死因子拮抗剂有助于快速控制病情。     

西罗莫司和饥饿处理对人A431细胞自噬水平的影响

目的 探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法 分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、平衡盐溶液（EBSS）组。作用4 h后,Western印迹检测A431细胞和HeLa细胞自噬微管相关蛋白轻链3A/3B（LC3A/B）、重组人γ?氨基丁酸受体相关蛋白（GABARAP）的表达水平。吖啶橙染色分析细胞自噬体表达水平。结果 Western印迹检测显示,对照组与DMSO组A431细胞中LC3A/B?Ⅱ与LC3 A/B?Ⅰ比值差异无统计学意义（P > 0.05）;20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、EBSS组LC3 A/B?Ⅱ与LC3 A/B?Ⅰ比值较对照组均明显升高,差异均有统计学意义（P < 0.05）。HeLa细胞Western印迹检测结果与A431细胞类似。双变量相关性分析显示,HeLa细胞中LC3A/B?Ⅰ与GABARAP表达呈正相关（r = 0.869,95% CI：0.807 ~ 0.999,P = 0.051）,LC3A/B?Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r = -0.742,95% CI：-0.982 ~ 0.406,P = 0.042）;A431细胞中LC3A/B?Ⅰ与GABARAP表达亦呈正相关（r = 0.837,95% CI：-0.173 ~ 0.989,P = 0.037）,LC3A/B?Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r = -0.684,95% CI：-0.977 ~ 0.500,P = 0.047）。吖啶橙染色显示,A431细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（23.750% ± 0.260%）与EBSS组（32.450% ± 0.488%）同样高于对照组（15.987% ± 0.242%,均P < 0.05）;HeLa细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（33.307% ± 0.715%）和EBSS组（66.097% ± 1.141%）高于对照组（14.117% ± 0.295%,均P < 0.05）。结论 经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿能够上调A431细胞的自噬水平, GABARAP蛋白可能与LC3A/B高度相关。     

白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对皮肤斑贴试验反应的影响

目的 探究白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对甲醛阳性皮肤斑贴试验的影响。 方法 采用随机、双盲、安慰剂对照试验。147例1%甲醛斑贴试验阳性（++）患者随机分为两组,孟鲁司特组77例患者口服孟鲁司特10 mg每日1次,连续14 d,安慰剂组70例口服安慰剂1片每日1次,连续14 d。在用药第11天进行再次斑贴试验,服药后第14天判读斑贴试验结果。数据分析在意向性分析人群中进行。统计学分析采用采用SPSS 17.0版软件χ2检验及连续性校正检验。 结果 孟鲁司特组完成试验75例,安慰剂组完成试验67例。阳性程度改变：孟鲁司特组有70例患者斑贴试验反应程度没有改变,安慰剂组有60例患者反应程度没有改变,两组差异无统计学意义（χ2 = 0.968,P > 0.05）。阳性率改变：孟鲁司特组有75例患者经干预后斑贴试验反应仍呈阳性表现,安慰剂组有67例患者经干预后斑贴试验反应仍呈阳性表现（75/77比67/70,χ2 = 0.012,P > 0.05）。 结论 白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对甲醛阳性皮肤斑贴试验反应无抑制作用。     

病毒唑联合硝苯吡啶治疗病毒性肠炎疗效观察

用病毒唑和硝苯吡啶联合治疗婴幼儿病毒性肠炎１００例，同时设对照组ｌ００例给予一般治疗。结果显示治疗组平均止泻时间３．１±０．８４天，对照组平均止泻时间４．５７±１．１７天，两组差异有显著意义（χ２＝５．５９，Ｐ＜０．０１）。     

亚低温对缺氧缺血新生鼠脑源性神经营养因子mRNA表达的影响

目的探讨亚低温对缺氧缺血脑损伤(HIBD)新生大鼠脑源性神经营养因子(BDNF))mRNA表达的影响。方法新生7日龄Wistar大鼠120只,随机分为①假手术组(n=6);②31℃亚低温干预组(n=36);③34℃亚低温干预组(n=36);④非亚低温干预组(对照组)(n=36);⑤正常对照组(n=6)。用原位杂交技术测定BD-NF mRNA。用Tunel染色和免疫组化技术检测神经元凋亡数。结果HIBD缺血再灌注后脑组织有BDNF mRNA表达的增加;亚低温组HIBD脑组织BDNFmRNA表达与未干预组比较差异有统计学意义。亚低温组脑组织海马、皮层区细胞凋亡数与未干预组比较差异有统计学意义。结论亚低温可通过增加HIBD后脑组织海马、皮层BDN-FmRNA的表达水平,抑制细胞凋亡而发挥脑保护作用。