益气活血法对舒张性心力衰竭大鼠心肌细胞钙稳态的影响

目的 研究不同比例益气活血药对舒张性心力衰竭(DHF)大鼠的疗效,探讨其对心肌细胞钙稳态的影响机制.方法 采用改良缩窄腹主动脉术制备压力负荷致DHF大鼠模型.将大鼠分为假手术组、模型组、益气组(黄芪3 g、党参1.5 g)、益气活血1:1组(黄芪3 g、党参1.5 g、丹参3g、三七1g)、益气活血2:1组(黄芪6g、党参3g、丹参3g、三七1g),每组20只,连续干预12周.治疗4、12周进行心功能检测,测量舒张期左室前壁厚度、舒张期左室后壁厚度、舒张期左室内径、左室射血分数和左室短轴缩短率及舒张早期跨二尖瓣血流速度(E)与舒张早期二尖瓣环运动幅度(e)比值(E/e);12周进行血流动力学检测,分别在静息状态和盐酸多巴胺负荷状态下记录左室压力下降速率、左室舒张末期压力(LVEDP)以评价左室舒张功能,记录左室压力上升速率,左室收缩压力(LVESP)以评价左室收缩功能,并记录心率及颈动脉压力;12周后处死大鼠,检测心肌细胞舒缩功能及钙转运情况,测量心肌细胞的收缩速率、舒张速率、收缩50％时间(CT50)和舒张50％时间(RT50);测定钙释放速率、钙回摄速率、钙释放50％时间(CaT50-on)和钙回摄50％时间(CaT50-off),分析钙瞬态数据;Western blot法检测钙转运相关蛋白钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、蛋白激酶A(PKA)、16-丝氨酸位点磷酸化受磷蛋白(PLBS16)、17-苏氨酸位点磷酸化受磷蛋白(PLBT17)表达水平.结果 干预12周后,全部治疗组均改善大鼠舒缩功能LVEDP、RT50、CT50,益气活血2:1组改善舒张早期二尖瓣血流速度E峰/舒张早期二尖瓣环纵向运动速率e峰(E/e)比值、多巴胺负荷下LVEDP和逆转心室重构(降低左室前壁和后壁厚度).在细胞水平,全部治疗组均缩短心肌细胞CT50、RT50、CaT50-on和降低CaMKⅡ表达,两组益气活血治疗组还可降低PKA过表达,益气活血2:1组可降低CaT50-off和改善PLBS16低磷酸化.结论 益气和活血药物以2:1比例配伍比1:1配伍治疗DHF具有更好的疗效,其作用机制可能与调节钙转运有关.     

疏肝补肾方药对疲劳大鼠海马CA1区中蛋白激酶C表达的影响

目的:研究疏肝补肾方药对于疲劳大鼠海马CA1区中蛋白激酶C(PKC)水平的变化.方法:成年雄性Spargue-Dawley大鼠36只,随机分为模型组(MG)、对照组(CG)和疏肝补肾组(LK).应用大鼠游泳运动结合睡眠剥夺建立疲劳大鼠复合模型,以Y迷宫实验评定其学习记忆能力.取大鼠海马CA1区以Western Blot定量检测,并以Real-time PCR技术分析海马CA1区PKC的mRNA表达.结果:Y迷宫实验显示,用药后大鼠的学习和记忆能力优于模型组,疏肝补肾组大鼠在正确反应率和达标所需训练次数皆与模型组有差异(P＜0.01或0.05).Western Blot结果显示,模型组PKC的蛋白表达明显低于对照组(P＜0.05),疏肝补肾组高于模型组(P＜0.01).Real-time PCR结果显示,在mRNA水平上模型组及疏肝补肾组与对照组比较都有明显差异(P＜0.01),疏肝补肾组PKC mRNA表达高于模型组(P＜0.01).结论:疲劳引起大鼠海马CA1区的PKC水平下调,而使用疏肝补肾方药可改善之,提示可能籍由疏肝补肾法对抗疲劳引起的学习记忆损伤.     

基于CiteSpace可视化分析中医药治疗扩张型心肌病的研究现状与发展趋势

目的:探究中医药治疗扩张型心肌病(DCM)的研究现状及发展趋势,并进行可视化分析。方法:检索中国知网(CNKI)和Web of Science数据库1991年1月1日—2023年1月1日的文献信息,收集相关文献资料后使用可视化软件CiteSpace 6.1.R6对年度发文趋势、作者、机构合作网络、研究热点、发展趋势进行可视化分析。结果:共纳入中文文献950篇,英文文献9篇,核心作者共32位,发文较多的机构分别是河南中医药大学、河南省中医院、山东中医药大学、南京中医药大学、黑龙江中医药大学、辽宁中医药大学;该领域研究热点是辨证论治、临床研究、实验研究。英文文献尚未形成稳定合作团队,主要研究机构均在国内,研究热点偏向基础研究。结论:中医药治疗DCM领域已逐渐步入稳定发展阶段,近30年间国内各研究团队及机构形成稳定且研究热点偏向不同,临床试验研究、名医经验挖掘及中药干预细胞凋亡途径为主要热门,运用生物信息及计量算法等技术对既往研究进行进一步归纳总结,找寻中医药有效组分及治疗靶点是未来发展趋势,建议各团队及机构间加强合作交流,增强国际影响力,以推动中医药治疗DCM领域的持续发展。     

参元益气活血胶囊干预缺血性心力衰竭患者生命质量的随机对照临床试验

目的:探讨参元益气活血胶囊(SYYQ)改善缺血性心力衰竭(IHF)气虚血瘀证患者生命质量的临床疗效及安全性。方法:选取2021年1月1日至7月31日首都医科大学附属北京中医医院心血管科门诊收治的IHF气虚血瘀证患者71例作为研究对象，按照随机数字表法随机分为观察组(n=36)和对照组(n=35)。观察组在西药治疗基础上加用SYYQ,对照组仅给予西药治疗,疗程30 d,观察治疗前后明尼苏达心功能不全生命质量量表(MLHFQ)、中医证候积分、心力衰竭生物学标志物B型脑利尿钠肽(BNP)与超声心动指标(LVEDd、LVEF)、6 min步行距离试验(6 MWT)与呼吸困难评分(Borg)、30 d主要心血管事件(MACEs）及药物不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组患者MLHFQ-体力、症状维度评分及总分低于对照组(P<0.05),情绪及经济维度评分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组中医证候积分低于对照组,总有效率及疗效指数高于对照组(P<0.05);观察组BNP水平低于对照组(P<0.05),LVEDd、LVEF与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者6 MWT距离及提高幅度高于对照组,Borg评分低于对照组,Borg评分降低幅度高于对照组(P<0.05);2组患者MACEs事件发生率差异无统计学意义(P>0.05);观察期间2组均未见明显药物不良反应。结论:SYYQ具有在规范化治疗基础上进一步改善IHF气虚血瘀证患者生命质量、改善中医证候、降低BNP水平、提高运动耐量的临床疗效并且安全性较好。     

脓毒症急性胃肠损伤危险因素分析及中医干预观察

目的：探讨多因素与脓毒症并发急性胃肠损伤的相关性以及中医干预该病的应用价值。方法：选取2014年7月至2017年5月友谊医院、广安门医院、北京中医医院重症监护病房（ICU)收治的脓毒症患者340例作为研究对象,根据住院期间是否出现急性胃肠损伤分为急性胃肠损伤组（n=88）和对照组（n=252）,收集患者年龄、性别、机械通气、格拉斯哥昏迷（Glasgow Coma Scale,GCS）评分、平均动脉压（MAP）、发热、心率、呼吸频率、感染部位、肠鸣音、大便、白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、总胆红素（TB）、血小板（PLT）、肌酐（Cr）及入院30 d预后情况;再根据患者是否应用中医药干预将脓毒症并发AGI患者分为中西医结合组和非中西医结合组,收集胃肠道症状及体征,构建多因素Logistic回归模型分析相关发病因素。结果：并发急性胃肠损伤患者病死率较对照组明显增多（P<0.01）。影响急性胃肠损伤的因素有机械通气比例、心率、发热比率、呼吸系统感染比率、消化系统感染比率、TB、Cr均显著高于对照组;AGI组患者MAP、PLT、中西医结合干预比率均显著低于对照组。多因素回归分析显示为机械通气（OR 2.508,P=0.005）、TB（OR 1.01、P=0.044）、中西医结合干预（OR 0.19,P<0.01）3个指标为脓毒症并发AGI的独立危险因素。中西医结合干预可有效改善脓毒症合并AGI患者的肠鸣音消失（P<0.01）及便秘（P<0.05）。结论：机械通气、TB、中西医结合干预是临床判断脓毒症合并AGI的有效指标,中西医结合干预可有效改善胃肠功能。     

中医气虚血瘀证斑马鱼模型的构建与评价

目的：对中医气虚血瘀证斑马鱼模型进行构建与评价。方法：随机选取90尾受精后4 d（4 dpf）野生型AB品系斑马鱼于6孔板中,每孔均处理30尾斑马鱼。分为正常对照组、气虚血瘀证组和药物验证组。采用无水亚硫酸钠和异丙肾上腺素盐酸盐联合刺激建立气虚血瘀证斑马鱼模型。药物验证组斑马鱼在造模基础上给予水溶脑心通胶囊。每组随机选取10尾斑马鱼,使用行为学分析仪分析斑马鱼的总运动距离;采用乳酸和ATP试剂盒测定斑马鱼体内乳酸和ATP水平;置于荧光显微镜下拍照,图像处理软件分析斑马鱼心脏凋亡细胞心肌细胞凋亡荧光强度;采用心跳血流分析系统分析斑马鱼血流速度和心输出量。结果：与正常对照组比较,气虚血瘀证组斑马鱼总运动距离和ATP水平均明显降低（P<0.05,P<0.001）,气虚血瘀证组斑马鱼体内乳酸水平和心肌细胞凋亡荧光强度明显高于正常对照组（P<0.001,P<0.01）,而血流速度和心输出量明显低于正常对照组（P<0.01,P<0.05）。与气虚血瘀证组比较,药物验证组斑马鱼总运动距离、体内ATP水平、血流速度和心输出量明显升高（P<0.05,P<0.001）,斑马鱼心肌细胞凋亡荧光强度和体内乳酸水平明显降低（P<0.001）。结论：无水亚硫酸钠和异丙肾上腺素盐酸盐联合干预可成功建立气虚血瘀证斑马鱼模型。     

丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块的干预作用及基因组DNA甲基化水平和甲基化转移酶的影响

目的:研究丹红注射液对高脂喂养的ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(As)斑块的干预作用及基因组DNA甲基化水平和DNA甲基化转移酶(DNMTs)的影响。方法:将40只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6周后随机分为模型组、阿托伐他汀钙片(商品名:立普妥)(阳性对照组)、丹红注射液低剂量组和高剂量组(n=10),给予药物腹腔注射6周后。检测其血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平。行HE染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块面积。采用高效液相色谱(HPLC)法检测小鼠血清基因组甲基化水平,采用ELISA法检测各组小鼠血清DNMTs水平。免疫组化染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块内DNMT1的表达。结果:与模型组相比,丹红注射液高剂量和低剂量组小鼠血清TG水平明显降低(P0.01)、丹红注射液高剂量组LDL-C水平明显降低(P0.01),丹红注射液低剂量组HDL-C水平明显升高(P0.05),丹红注射液高剂量组小鼠动脉粥样硬化指数显著降低(P0.01)。丹红注射液高剂量和低剂量组小鼠血清基因组甲基化和DNMTs水平显著降低(P0.01)。丹红注射液与模型组相比,丹红注射液组As小鼠的校正后主动脉As斑块面积显著降低,以及斑块内DNMT1表达显著降低(P0.01)。结论:丹红注射液可降低As小鼠血脂水平,减少As斑块面积,其机制可能与降低As小鼠血清基因组甲基化水平和整体DNMTs水平和抑制As小鼠主动脉斑块DNMT1表达有关。     

黄芪党参对心肌梗死后心衰小鼠心肌复极时间的干预研究

目的研究益气药黄芪、党参对心肌梗死(myocardial infarction,MI)后心衰小鼠心肌细胞复极时间的干预作用。方法通过冠脉结扎术复制MI后心衰小鼠模型,采用随机数字表分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、益气组[黄芪1.2g/(kg·d)+党参0.9g/(kg·d)配方颗粒溶液]、西药组[美托洛尔溶液8mg/(kg·d)]。术后灌胃干预4周。检测小鼠超声心动及心电图,分离心肌细胞,使用全细胞膜片钳技术记录分析心肌细胞动作电位。结果黄芪、党参可改善MI后心衰小鼠左室射血分数(P0.05),缩短MI后心衰小鼠QT间期(P0.01)及校正QT间期(P0.05),减少室性心律失常发生率,缩短MI后心衰小鼠心肌细胞复极时间(P0.05),并且缩短心肌细胞复极时间效果优于美托洛尔(P0.05)。结论益气药黄芪、党参可提高MI后心衰模型心肌复极速度,减少室性心律失常发生率,改善心功能和远期预后。     

脑心同治理论对临床的指导意义

从中医理论对心、脑功能的认识以及心和脑在生理病理上的密切联系阐述了脑心同治理论提出的生理病理学基础。重点阐明脑心同治理论在双心疾病治疗中应用的基础,指出炎性反应是脑心同治共同的病理基础,"气痰瘀同治"是"脑心同治"的主要治法。进一步明确了脑心同治理论的适用范围,评价了脑心同治理论对临床的指导意义。     

丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化及PI3K/Akt/mTORC1信号通路的影响

目的观察丹红注射液对动脉粥样硬化(AS)小鼠自噬基因Atg13启动子区甲基化及自噬信号通路PI3K/Akt/mTORC1的影响,探讨其可能的作用机制。方法 40只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、阳性对照组和丹红注射液低、高剂量组,每组10只,各给药组给予相应药物干预。6周后RT-PCR检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13、Atg3和Atg4a的mRNA表达;Westernblot检测AS小鼠主动脉Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、PI3K、Akt、p-Akt、mTORC1和p-mTORC1的蛋白表达;采用亚硫酸氢盐测序法检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平。结果与模型组比较,丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Beclin1蛋白表达明显升高,丹红注射液低剂量组小鼠主动脉LC3Ⅱ/Ⅰ表达明显升高(P0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Atg13、Atg3和Atg4a mRNA表达显著升高(P0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平明显降低(P0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉p-Akt蛋白表达明显降低(P0.01),丹红注射液高剂量组小鼠主动脉p-mTORC1蛋白表达明显降低(P0.01)。结论丹红注射液防治AS的机制可能与降低模型小鼠主动脉Atg13启动子区甲基化水平、抑制PI3K/Akt/mTORC1信号通路和促进细胞自噬有关。