分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)的临床应用价值

目的 分析探讨培养分枝杆菌时同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)临床意义及价值. 方法 2011年3月—2015年3月所采集530例临床标本进行培养使用利福平浓度100μg/mL罗氏(L-J)培养基建立依R菌筛查系统,将待分离培养分枝杆菌平行接种于罗氏对照空白培养基(L-J)与L-J R100培养基中分别培养,依照培养基选用种类分别分成L-J R100、L-J、BD960 3组, 并对结果 进行分析统计. 结果 L-J R100培养基检出76例阳性结核分枝杆菌,且皆为依R菌,菌株粗大,生长良好,L-J R100阳性菌株所占比例为14.34%,L-J阳性菌株所占比例23.21%, BD960阳性菌株所占比例为52.83%. 结论 培养分枝杆菌时同步筛查依R菌能得到绝对依赖菌株,可提高分枝杆菌阳性检出率,可最快速度判断阳性菌株耐药性及是否对利福平具依赖性,该方法 可靠易行,具有临床推广价值.     

母牛分枝杆菌菌苗预防老龄小鼠肺结核的动物实验研究

目的探讨母牛分枝杆菌菌苗对实验性老龄小鼠肺结核的免疫预防作用。方法老龄C57BL/6J小鼠30只,随机法分为3组:即无免疫保护组、母牛分枝杆菌菌苗预防组(微卡组)、卡介苗(BCG)预防组,分别给予生理盐水0.1ml、母牛分枝杆菌菌苗22.5μg、BCG 0.1 mg皮内注射。4周后将浓度为5×10⁵/ml的H37Rv标准菌株0.2ml经小鼠尾静脉给予攻毒。感染6周后处死小鼠,流式细胞仪测定小鼠外周血T淋巴细胞亚群、观察肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数、肺脏中活结核分枝杆菌定量培养及肺组织病理学分析。结果微卡组和卡介苗组的CD4T淋巴细胞、CD4/CD8比值分别为(48.81±3.10、3.84±0.37),(48.08±3.72、4.16±0.24)均较无免疫保护组(38.97±3.03、3.25±0.26)显著升高(p<0.01)。而微卡组CD4/CD8比值则低于卡介苗组(p<0.05)。微卡组和卡介苗组的肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数、肺脏中活结核分枝杆菌定量培养分别为(2.3±0.5(、1.06±0.25)×10⁵cfu),(2.7±0.6(、1.21±0.37)×10⁵cfu)无免疫保护组(5.4±0.9、(4.07±0.97)×10⁵cfu)减少(p<0.01)。组织病理学显示微卡组和卡介苗组肺脏结核病变以增殖性结核结节为主,无坏死结节;无免疫保护组肺脏则以淋巴细胞结节、坏死结节为主。结论母牛分枝杆菌菌苗可增强CD4T淋巴细胞活性,对实验性老龄小鼠肺结核有较好的预防作用。     

西安市耐异烟肼的结核杆菌耐药性及分子特征分析

目的 了解西安市临床分离的结核分枝杆菌异烟肼耐药菌株katG315、inhA-15 突变情况及其分 子特征。方法 利用BACTAC MGIT960 分枝杆菌快速培养系统对临床分离结核分枝杆菌进行药敏试验,采用 定向缺失多重PCR（DTM-PCR）对异烟肼耐药菌株进行基因分型研究,分别利用多重等位基因特异PCR （MAS-PCR) 和PCR-DNA 测序法对其katG315 和inhA-15 突变热点进行检测。结果 117 株异烟肼耐药 菌株有73 株为多重耐药结核分枝杆菌（62.39%）,104 株为北京型菌株（88.89%）,81 株存在katG315 位点突变 （69.23%）,10 株存在inhA-15 位点突变（8.55%）。结论 西安市异烟肼耐药分枝杆菌以北京型菌株为主,耐药 表型主要表现为多重耐药,主要突变为katG315 突变。     

噬菌体法检测住院肺结核患者中的结核分枝杆菌的临床应用研究

目的:评价噬菌体法检测结核分枝杆菌在住院肺结核患者中临床应用研究,评价结核病患者临床治疗疗效。方法:采用噬菌体法和涂片法对269例住院治疗的肺结核患者每份痰标本同时检测结核杆菌。结果:269例结核住院患者采用噬菌体法检测结核分枝杆菌阳性57例,阴性212例;涂片法阳性60例,阴性209例。结论:噬菌体法可检测活的结核分枝杆菌,可评价临床治疗疗效,能弥补涂片法不能区分死菌活菌的不足,具有很好的临床应用价值。     

西安地区结核耐药性现状调查研究

目的:了解西安地区结核病的最新耐药状况。方法:采用960分枝杆菌检测/药敏系统对菌株进行检测,并做H、R、E、S四种药物的敏感试验。结果:2005年9月至2006年9月间进行痰耐药监测共269例,总耐药率为48.3%,初治耐药率为26.9%,复治耐药率83.3%;耐多药率为27.5%,初治耐多药率为6.6%;复治耐多药率为61.8%,4种抗结核药的耐药率由高到低依次为H、S、R、E。结论:积极推行结核病归口管理和实施DOTS策略,结核病疫情明显下降,但各项耐药指标在国内仍处于较高水平。     

结核分枝杆菌耐药特点分析

目的分析临床分离结核分枝杆菌的耐药特点。方法用改良罗氏培养基间接药敏实验绝对浓度法检测结核菌的耐药情况。结果210株临床分离株中对6种药物全部敏感仅有1株;两种以上药物耐药的有148株,耐药率70.48%;同时耐INH和RFP的菌株有90株,耐药率42.86%。结论耐药及耐多药结核菌感染是临床治疗结核病的一个严重问题;临床分离的结核杆菌耐药率和耐多药率高;分析临床分离株的耐药特点,对控制结核病传染及指导临床合理用药具有重要意义。     

西安市非结核分枝杆菌感染现状调查分析

目的 了解西安市结核病患者中非结核分枝杆菌感染情况。方法 收集西安市胸科医院检验科分离培养的分枝杆菌临床菌株,利用两步PCR方法及PCR产物直接测序的方法进行菌种鉴定。结果 经鉴定发现,收集的202株分枝杆菌中有195株为结核分枝杆菌,3株为牛结核分枝杆菌,2份为鸟分枝杆菌,1份为堪萨斯分枝杆菌,1份为灰色链霉菌,非结核分枝杆菌感染率为1.5%(3/201)。结论 西安市尚存在一定比例非结核分枝杆菌感染,进一步菌种鉴定有利于临床正确诊断和合理用药治疗。     

西安市非结核分枝杆菌感染现状调查分析北大核心CSCD

目的了解西安市结核病患者中非结核分枝杆菌感染情况。方法收集西安市胸科医院检验科分离培养的分枝杆菌临床菌株,利用两步PCR方法及PCR产物直接测序的方法进行菌种鉴定。结果经鉴定发现,收集的202株分枝杆菌中有195株为结核分枝杆菌,3株为牛结核分枝杆菌,2份为鸟分枝杆菌,1份为堪萨斯分枝杆菌,1份为灰色链霉菌,非结核分枝杆菌感染率为1.5%(3/201)。结论西安市尚存在一定比例非结核分枝杆菌感染,进一步菌种鉴定有利于临床正确诊断和合理用药治疗。     

2014-2015年西安市胸科医院结核分枝杆菌耐药性分析

目的 回顾性分析西安市胸科医院2014—2015年结核分枝杆菌的耐药情况,为本地区结核病的诊断、治疗以及预防提供参考.方法 收集西安市胸科医院2014—2015年门诊、住院患者结核分枝杆菌阳性菌株2583株,采用比例法对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、丙硫异烟胺、卷曲霉素、莫西沙星、利福喷丁、阿米卡星、对氨基水杨酸钠、左氧氟沙星共11种抗结核药物的耐药性进行测定.结果 共分离出2583株结核分枝杆菌,其中耐多药、广泛耐药、一线4种全耐药、二线7种全耐药、11种药物全耐药菌株分别为258、139、116、17、16株,耐药率分别为9.99%、5.38%、4.49%、0.66%、0.62%.对11种抗结核药物单一耐药率,由高到低分别为:异烟肼(23.96%)、链霉素(21.76%)、利福喷丁(14.83%)、利福平(14.05%)、左氧氟沙星(10.69%)、乙胺丁醇(9.33%)、莫西沙星(6.93%)、对氨基水杨酸钠(5.81%)、卷曲霉素(3.29%)、阿米卡星(2.09%)、丙硫异烟胺(1.55%).耐多药菌株对利福喷丁和左氧氟沙星的耐药率较高,分别为87.98%、53.88%.对利福喷丁+左氧氟沙星、莫西沙星+利福喷丁组合的耐药率分别高达51.94%、39.92%.广泛耐药菌株对对氨基水杨酸钠的耐药率最高,为32.37%.结论 2014—2015年西安市胸科医院抗结核病药物单一耐药率虽然呈下降趋势,但耐多药、广泛耐药和全耐药菌株的出现和增加提示还需要更加严格的执行结核病防控策略,防止各种耐药菌株的产生、增加和传播.     

母牛分枝杆菌对实验性老年肺结核的免疫保护作用

目的:探讨母牛分枝杆菌菌苗对实验性老龄小鼠肺结核的免疫保护作用. 方法:老龄C57BL/6J小鼠30只,随机法分为3组:无免疫保护组(C组),母牛分枝杆菌菌苗预防组(M组),卡介苗(BCG)预防组(B组),分别在0 wk给予生理盐水0.1 mL,母牛分枝杆菌菌苗22.5 μg,BCG 0.1 mg皮内注射. 4 wk后将浓度为5×105/mL的H37Rv标准菌株0.2 mL经小鼠尾静脉给予攻毒. 感染6 wk后处死小鼠,流式细胞仪测定小鼠外周血T淋巴细胞亚群,观察肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数及肺组织病理学分析. 结果:M组和B组的CD4 T淋巴细胞、CD4 /CD8 比值分别为(48.81±3.10, 3.84±0.37),(48.08±3.72,4.16±0.24)均较C组(38.97±3.03,3.25±0.26)显著升高(P＜0.01). 而M组CD4 /CD8 比值则低于B组(P＜0.05). M组和B组肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数分别为(2.3±0.5),(2.7±0.6),较C组(5.4±0.9)显著降低(P＜0.01). 组织病理学显示M组和B组肺脏结核病变以增殖性结核结节为主,无坏死结节;C组肺脏则以淋巴细胞结节、坏死结节为主. 结论:母牛分枝杆菌菌苗可增强CD4 T淋巴细胞活性,对实验性老龄小鼠肺结核有较好的保护作用.