不同剂量促排卵激素对昆明小鼠卵子及胚胎发育潜能的影响

目的比较不同剂量激素促排卵之间的效果优劣,选择最优化的促排卵方案,为辅助生殖助孕中选择最佳促排卵药物剂量方案提供参考。方法选择性成熟小鼠先确定其处于发情前期,随机分组,按发情阶段,将不同剂量的激素组合孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)+人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)由低到高依次分成(0+0)、(5+5)、(7.5+7.5)、(10+10)、(12.5+12.5)、(15+15)IU/只,分别促小鼠排卵。建立促排卵激素妊娠小鼠模型后获取孕12 h受精卵,观察获取卵母细胞的数目、原核数、受精率、卵裂率以及囊胚形成率。结果在获取卵母细胞的数目上,当剂量达到(12.5+12.5)IU/只时最高,达到51.83个;在卵裂率上各组无差别,在受精率上当剂量达到(7.5+7.5)IU/只时最高,达到82.32%,在囊胚形成率上,当剂量为(0+0)IU/只时,显著高于其他超促排卵组,达到79.78%。结论随着促排卵剂量的增加,虽然鼠胚的卵裂率未受到影响,但受精率、囊胚形成率与剂量呈负相关,激素剂量的加大影响了胚胎的发育潜能。     

CEP55可能是治疗成熟阻滞型非梗阻无精子症的分子靶标

目的应用siRNA技术沉默CEP55基因表达对小鼠精原细胞增殖的影响。方法选取2017年1月1日~12月31日在南方 医科大学南方医院妇产科生殖中心就诊的无精子症男性不育症患者,根据其睾丸病理切片诊断分为成熟阻滞组和生精正常组 各3 名。应用核素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术,发现两组患者的睾丸组织表达差异蛋白质CEP55 蛋白。设计并合成 CEP55 基因特异性的siRNA 序列,转染小鼠精原细胞,分为空白对照组、阴性对照组及siRNA 转染组,应用Western blot 和 qPCR检测在siRNA 对CEP55的影响,CCK8实验观察siRNA抑制CEP55后对小鼠精原细胞增殖的影响。结果通过iTRAQ 核素标记结合LC/MS/MS分析,共鉴定出差异蛋白共两百多个,CEP55在基因表达水平差异最显著。Western blot结果显示, siRNA转染组CEP55蛋白的相对表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组（P<0.05）。qPCR结果显示,siRNA转染组CEP55 的mRNA表达量低于空白对照组和阴性对照组（P<0.05）。CCK8实验发现siRNA干扰CEP55表达后,小鼠精原细胞生长明显 受到抑制（P<0.05）。结论CEP55可能在精子发生过程中起到关键作用,CEP55可能成为治疗成熟阻滞型非梗阻无精子症的分 子靶标。     

单核细胞宫腔灌注联合冻融胚胎移植治疗反复着床失败:附3例报道

目的探讨自体外周血抽提单核细胞宫腔灌注联合冻融胚胎移植治疗反复着床失败的可能性。方法采用单核细胞经HCG培养48 h后与新鲜抽提单核细胞共同宫腔灌注并联合冻融胚胎移植治疗3例反复着床失败患者,并进行文献复习。结果 3例患者进行上述治疗后均获得妊娠并顺利分娩活产儿,母婴追踪至今未见明显异常。结论外周血单核细胞宫腔灌注联合冻融胚胎移植可试用于反复着床失败患者。     

两种不同激光辅助孵化方法对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的 探讨激光透明带打孔和激光透明带削薄两种激光辅助孵化方法对体外受精-胚胎移植妊娠率的影响.方法 回顾性分析了187例行激光辅助孵化治疗的患者,分成透明带打孔穿透组和透明带削薄组,比较两组妊娠率及胚胎着床率.结果 用两种方法进行辅助孵化治疗的妊娠率分别为45.8%和40.7%,胚胎着床率分别为25.2%和24.8%,两组差异无显著性.结论 激光透明带削薄可以完全替代透明带穿透打孔,从而减少对胚胎的损伤.     

同一取卵周期采用IVF 结合ICSI 治疗的临床结局分析

目的 探讨同期卵子采用IVF结合ICSI治疗原发性不孕症和继发性不孕症的临床价值及ICSI技术的安全性.方法 2003年1月～2008年12月在南方医院生殖医学中心接受IVF结合ICSI治疗的不孕患者149例,将同期卵子按各50%的比例随机分为两组,分别采用IVF和ICSI进行授精,比较原发性不孕症组与继发性不孕症组、IVF与ICSI组之间受精情况、临床结局及出生缺陷的差异.结果 原发性不孕症组的常规IVF完全未受精率10.2%,高于继发性不孕症组3.9%(P＜0.05)有显著差异.ICSI组未出现受精失败;且正常受精率及优质胚胎率高于常规IVF,多原核受精率低于IVF组(P＜0.05).ICSI组来源胚胎的着床率、临床妊娠率及分娩率高于常规IVF胚胎移植组及IVF与ICSI混合胚胎移植组,差异无统计学意义.结论 长期不孕原发性不孕患者及可疑受精障碍患者宜选用IVF结合ICSI的授精方案,可获得较好的临床结局,对这类患者ICSI可能并不增加其子代的出生缺陷率.     

用蛋白质芯片-飞行时间质谱仪分析精液不液化患者精浆中相关蛋白质群

目的 用蛋白质组学方法筛选精液不液化患者及正常生育患者精浆中的差异蛋白.方法 通过蛋白质芯片-飞行时间质谱仪,对6例精液不液化患者的精浆和11例正常生育男性精浆样本进行检测,比较两组间蛋白质图谱表达差异.结果 正常组与不液化组精浆比较,有19个蛋白表达存在差异,其中有6个蛋白P＜0.01.结论 精液不液化患者与正常生育患者精浆中存在较多差异蛋白质,差异蛋白质群的结构、功能变化是导致精液液化异常的主要原因;本研究对进一步探索不液化的病因及其临床治疗具有重要意义.     

显微授精穿刺方式与胚胎受精率及闭锁率相关性研究

目的探讨显微授精时由于卵膜弹性不同产生的不同破膜方式对卵母细胞受精率及卵母细胞闭锁率的影响。方法回顾性分析在本中心行显微授精治疗的患者共1589个卵母细胞，根据显微注射针穿刺卵膜的方式分为两组：一组1250例为卵膜弹性正常组，另一组339例为卵膜无弹性组，比较不同分组间的受精率差异，及穿刺后卵母细胞闭锁率。结果根据卵膜弹性分成的两组受精率无差异，卵膜有弹性组受精率为88．2％，卵膜无弹性组受精率87、3％，P〉0.05；穿刺后卵细胞闭锁的比率在卵膜无弹性组为17.1％，而在卵膜有弹性组的此比率为5.4％，两者有明显的统计学差异，P〈0.001。结论显微授精的受精率与穿刺时卵子的质量密切相关，所以选择恰当的取卵时机获取成熟度适当的卵子是提高显微授精受精率的关键。     

精液处理对精子生存环境活性氧浓度的影响

目的 探讨常规精液处理前后精浆及处理后精子悬液活性氧浓度的变化.方法 按WHO方法对精液标本进行分类,标本分为正常对照组,白细胞精子症组和畸精症组,采用分光光度比色法检测精浆及精液处理后精子悬液活性氧浓度.结果 精浆中活性氧浓度与精浆中白细胞浓度及精子畸形率正相关,精液处理过程可以减少外源性活性氧对精子的影响,但对内源性活性氧作用不大.结论 高白细胞浓度及高畸形率是导致精浆活性氧浓度增高的主要因素,常规精液处理过程可以明显改善精子生存环境.     

人卵子玻璃化冷冻原因及其技术在辅助生殖中的应用

目的探讨人卵子玻璃化冷冻的原因及其技术在辅助生殖中的可行性和临床应用价值。方法回顾性研究2008年1月~ 2018年10月在南方医科大学南方医院生殖医学中心行卵子玻璃化冷冻的26例患者共27个取卵周期,分析卵子玻璃化冷冻原 因、卵子解冻后受精情况及临床妊娠结局。结果26例患者27个取卵周期共冷冻卵子274枚,卵子冷冻原因主要包括取卵日男 方精子数量及质量差无可用精子、男方处于各种疾病急性期不适宜取精及男方因各种原因未能到场取精等。共19个周期行卵 子解冻,该19个周期共冻存卵子217枚,解冻后存活176枚,卵子解冻存活率81.11%,其中131枚卵子解冻后行卵胞浆内单精子 注射,正常受精98枚,正常受精率74.81%;卵裂88枚,卵裂率89.80%（88/98）;共形成可移植胚胎53枚,其中优质胚胎36枚,优 质胚胎率36.73%（36/98）。15个移植周期共移植胚胎27枚,临床妊娠率为53.33%（8/15）,活产率为33.33%（5/15）。随患者年龄 增加,与<35岁组相比,≥35岁组患者卵子复苏率（82.76% vs 74.42%,P=0.211）、临床妊娠率（77.78% vs 16.67%,P=0.041）及活 产率（55.56% vs 0,P=0.044）均呈下降的趋势。结论卵子玻璃化冷冻可作为不孕夫妻取卵当日因男方因素不能提供精子患者 的临床补救措施;卵子玻璃化冻融后的受精率、临床妊娠率结局良好,卵子复苏率与年龄存在相关性,女性≤35岁者冻卵能够获 得满意的临床妊娠结局。