甲基丙烯酸环氧丙酯诱导基因突变的序列分析

本文采用双链DNA直接测序法对GMA诱导的质粒PBR322突变体(AP~RTc~s)的部分基因片段进行序列测定,结果表明:①GMA诱导的基因突变类型为缺失型和插入型,缺失的频率(28％)远大于插入频率(18％),C和G的缺失远大A和T的缺失。碱基缺失和插入导致移码突变。②GMA诱导的基因序列的改变,其作用方式并非随机。5′- CNCCN-3′为高度敏感的作用序列(专一性序列)。③GMA在三个富含C和G区域诱导很强的突变作用,尤其在397-418区段,突变频率高达36.3％,可认为该区域为热点区。     

断层皮片成纤维细胞原代培养法

目的　在人成纤维细胞的生物学特性观察研究中 ,进行成纤维细胞的原代培养 ,必须获得足够量的成纤维细胞。方法　我们采用整形外科断层取皮技术 ,使用细胞刮刀 ,可相对简单获取有活力的成纤维细胞 ,并应用台盼蓝细胞活力染色排除法进行检测。结果　使用该方法可简单、经济获取足够量的成纤维细胞 ,使得短期内即可获得大量的传代细胞。1× 2cm2 的断层皮片可达到的细胞的数量级 10 6的左右。结论　断层皮片成纤维细胞培养方法 ,结合整形外科的技术 ,是一种新的、经济和快速原代成纤维细胞培养方法 ,较胰酶消化法和组织块贴壁法有明显的优越性 ,对于进行成纤维细胞移植 ,更值得加以推广和应用。     

谷胱甘肽S—转移酶异质性研究

本文以不同状态的大鼠肝细胞为对象,采用生化和病理学方法研究了谷胱甘肽S-转移酶(GST)的异质性。根据GST同工酶酶谱分忻、GST活性改变状况和GST同工酶表达活性的改变等结果,表明GST无论在正常状态或病理状态下均具有显著的异质性。     

中国人β类球蛋白基因多态性研究

本文首次报告在中国人的ψβ_1和ε球蛋白基因中及其旁侧序列中存在三个多态性HincⅡ酶切位点。用含入ψβ_1序列的重组质粒PP3.9的BglⅡ和Xbal双酶解片段(1.8kb)作为探针,与正常人DNA的HincⅡ酶解片段行sou thern印迹杂交,所得杂交自显影图谱上可呈现7.6kb,6.0kb和3.0kb等条带,此系ψβ_1基因之中及     

人成纤维细胞在裸鼠体内生长和胶原分泌的观察

目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到人成纤维细胞在裸鼠体内呈分裂象,随着时间的推移细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌量呈增多趋势。结论人成纤维细胞注射移植裸鼠后,能够自行分裂、增殖并分泌人Ⅰ、Ⅲ型胶原,为自体成纤维细胞作为移植材料,发挥充填功能的持久性提供了理论依据。     

人谷胱甘肽S－转移酶基因π（cDNA）的筛选和鉴定

采用免疫筛选法和寡核苷酸探针筛选法从人肺ｃＤＮＡ文库中筛选得到人ＧＳＴ一ｐｉ（ＧＳＴ－ｘ）ｃＤＮＡ，对其序列进行了测定和分析。     

蛋白激酶Cξ亚型基因及UrotensinⅡ基因中各有一个单核苷酸位点与中国北方汉族人群2型糖尿病相关

目的采用单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)标记,在以往中国北方汉族人群2型糖尿病相关基因定位区域(1p36.33-p36.23)内寻找疾病易感基因位点。方法通过生物信息学方法在公共SNP数据库中查找定位区域内10个候选基因中的23个SNP位点,用单碱基延伸反应(singlebaseextension,SBE)法对北方汉族人群散发2型糖尿病患者(192例)及对照组(172例)进行分型及病例-对照关联分析。结果23个SNP位点中有8个为中国北方人群常见SNP位点;对病例组和对照组分型分析显示,位于蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)基因中的一个位点(rs436045)及urotensinⅡ(UTS2)基因中的一个位点(rs228648),其等位基因频率在两组的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论上述两个SNP位点可能和中国北方汉族人群2型糖尿病相关,以上结果为进一步研究上述两个位点所在的基因与2型糖尿病的关系提供了理论依据。     

蛋白激酶Cξ亚型基因内SNP功能分析

目的对中国北方汉族人群2型糖尿病易感基因蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)基因内的5个单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphismSNP)标记在疾病发生中的作用进行分析。方法通过生物信息学比对及报告基因活性测定等方法分析PRKCZ基因内5个SNP位点对基因表达的影响。结果PRKCZ基因中rs427811和rs809912位点两种等位基因重组质粒报告基因活性存在明显差异,提示这两个位点可能影响PRKCZ基因表达。结论PRKCZ基因中两个SNP位点可能通过影响基因的表达水平而在中国人2型糖尿病发生中发挥作用。     

三尖杉酯碱抑制蛋白质生物合成机制的初步研究

本文研究了三尖杉酯碱对珠蛋白的合成、合成珠蛋白肽链的完整性及肽酰—嘌呤霉素结合反应的影响。观察到:在该药作用下,珠蛋白的合成在延迟了几分钟　后才开始受到抑制;所合成的珠蛋白有完整肽链;肽酰—嘌岭霉素结合物的形成不受抑制。这些结果表明,三尖杉酯碱的作用环节可确定在第一个肽键形成之前(包括该环节),这为进一步研究打下了基础。     

靛玉红衍生物2号对两柱恶性细胞系的作用

 本文观察到?玉红衍生物2号对两株恶性细胞系CH—C1和U₂₇的生长；³H-胸腺嘧啶核 苷参入及细胞形态具有明显的影响，这些影响与靛玉红对瘤细胞的作用相类似。