CXCL12-CXCR4轴促进胶质母细胞瘤前神经间质转化

［摘要］目的: 探讨CXC趋化因子配体12-CXC趋化因子受体4(CXC chemokine ligand 12 CXC chemokine receptor 4,CXCL12-CXCR4)轴对脑胶质母细胞瘤前神经间质转化的作用。方法: 分析TCGA GBM基因数据库中CXCR4 mRNA在不同胶质瘤分子分型肿瘤组织中的水平差异及其对肿瘤患者生存率的影响;人胶质瘤LN428、U87MG细胞经不同浓度CXCL12 (0、20、40、60、80、100 ng/mL)及20 μmol/L普乐沙福(选择性CXCR4拮抗剂)预处理48 h,免疫印迹实验检测细胞内OLIG2、E-钙黏蛋白、YKL-40、N钙-黏蛋白和波形蛋白表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,CCK8法和克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖能力。结果： TCGA GBM数据库分析结果显示,与健康者相比,胶质瘤患者CXCR4 mRNA表达显著增高,且与患者生存率呈负相关;间质型胶质母细胞瘤组织标本中CXCR4 mRNA水平显著高于前神经型胶质母细胞瘤(P均＜0.05)。与对照组相比,CXCL12组细胞间质型相关蛋白YKL-40、N-钙黏蛋白、波形蛋白表达水平显著升高,而前神经型相关蛋白OLIG2、E-钙黏蛋白表达水平显著降低,人胶质瘤LN428、U87MG细胞迁移和侵袭能力、增殖能力显著增强(P均＜0.05);给予普乐沙福处理后,与CXCL12组相比,人胶质瘤LN428、U87MG细胞迁移和侵袭能力、增殖能力显著降低,且间质型相关指标蛋白表达显著降低,前神经型相关指标蛋白表达显著升高(P均＜0.05)。结论： CXCL12-CXCR4轴具有促进胶质母细胞瘤前神经间质转化,及迁移和侵袭、增殖的作用。     

CT与数字乳腺钼靶摄影对乳腺癌的影像学诊断价值

选择我院2012年8月~2014年7月收治治疗的36例经手术病理诊断为乳腺癌患者作为研究对象,采用随机数字法把其分成对照组和研究组各18例。对照组患者采用数字乳腺钼靶摄影实施诊断,研究组患者采用数字乳腺钼靶摄影联合CT实施诊断。36例乳腺癌患者经过临床诊断后,对照组患者的特异度为94.4%(34例),研究组患者的特异度为61.1%(22例),对两组患者的特异度进行比较分析,其中研究组的特异度显著的比对照组高(P0.05)。应用数字乳腺钼靶摄影联合CT对乳腺癌患者进行诊断,其具有较好的临床效果,可以有效的使乳腺癌的临床确诊率得到提升,且安全性较高。     

内源性HMGB1调节低氧乏养胰腺癌细胞脂肪酸代谢及其机制

目的 研究内源性高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在低氧乏养胰腺癌细胞脂肪酸代谢重编程及线粒体融合/分裂中的作用及机制。方法 GEPIA数据库分析胰腺癌组织中HMGB1表达水平与胰腺癌患者生存率的相关性;CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测内源性HMGB1对低氧乏养Patu8988细胞增殖、侵袭及迁移的作用;激光共聚焦显微镜观察Patu8988细胞线粒体形态的改变;蛋白质免疫印迹法检测细胞线粒体融合/分裂相关蛋白、脂肪酸从头合成相关蛋白表达水平的影响。结果 GEPIA数据库分析结果表明HMGB1在胰腺癌中高表达（P<0.01）,且表达水平与胰腺癌患者生存时间呈负相关（P=0.00097）;干扰低氧乏养Patu8988细胞的HMGB1后,细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,Patu8988细胞线粒体形态分裂增加,线粒体分裂相关蛋白FIS1表达增加,p-DRP1（Ser637）表达降低,融合相关蛋白MFN1和MFN2表达降低;ACLY、p-ACLY和FASN蛋白表达水平均下降。结论 内源性HMGB1可以促进低氧乏养胰腺癌Patu8988细胞线粒体的融合,抑制分裂,维持线粒体的形态和功能,从而上调ACLY蛋白的表达及磷酸化水平,促进Patu8988细胞的脂肪酸（FA）合成,维持胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力。     

禁食对基础代谢影响的研究进展

禁食对于机体有益的影响已有很多研究,近年对于基础代谢的研究已经有了很大的进展.禁食会降低机体的体温,禁食可以降低体重,降低心血管疾病方面的患病风险.能量代谢的改变,包括激素和氨基酸的变化,进一步涉及机体胃肠道等改变,机体的免疫机制也会相应的改变,禁食可能会促进机体的体液免疫     

人参炔醇联合吉西他滨对胰腺癌干细胞分化及活性的影响

目的: 探讨人参炔醇和吉西他滨联合作用对胰腺癌干细胞(pancreatic cancer stem cell, PCSC)干性及活性的影响。方法: 体外悬浮培养法培养和富集人胰腺癌PANC-1细胞系干细胞,采用荧光激活细胞分选法（fluorescence activated cell sorting,FACS）分选出CD133⁺的细胞亚群;将分选的CD133+细胞分为PBS（对照）组、人参炔醇组、吉西他滨组和人参炔醇与吉西他滨联合组,人参炔醇与吉西他滨最终浓度分别为164 μmol/L,2 μmol/L。流式细胞术检测各组细胞CD133+比例;CCK-8实验检测细胞增殖率;Annexin-V/PI双染流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白Ki-67及凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果： 各组细胞处理48 h后,与对照组相比,人参炔醇组、吉西他滨组和联合组CD133⁺细胞比例明显减少, 而两药联合作用CD133⁺细胞比例减少更显著(P<0.01);人参炔醇和吉西他滨均可抑制胰腺癌PANC-1干细胞增殖并促进细胞凋亡(P<0.05),而联合作用对干细胞增殖能力的抑制作用更显著(P<0.01),促进细胞凋亡更明显(P<0.01);与人参炔醇组和吉西他滨组相比,联合组的Ki-67和Bcl-2表达明显下降。结论： 人参炔醇联合吉西他滨可促进胰腺癌干细胞体外分化,并抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,从而抑制细胞活性。     

扑痫酮引起多发性红斑一例

扑痫酮引起多发性红斑一例报告如下: 患者、男、44岁因患癫痫(精神运动性发作型),于1985年10月24日入院。入院后用笨妥英钠治疗。近半个月来出现共济失调、停药。改用扑痫酮治疗,每日1次,250mg/d。服药后第三天,患者突然双手背部指间,双足背部及膝关节等多处出现大小不一、边缘整齐的红斑,最大的约8×18cm~2,自感发痒。第五日红斑处形成水疱,大小和红斑相等,有的融合成片。即停用扑痫酮,改用     

沉默热休克蛋白5可增敏青蒿琥酯诱导肝癌细胞铁死亡

目的: 探讨热休克蛋白5(heat shock protein family A member 5,HSPA5)对青蒿琥酯诱导人肝癌SMMC 7721细胞株化疗敏感性的影响。方法: 用不同浓度青蒿琥酯处理SMMC-7721细胞,CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳实验浓度。将SMMC-7721细胞按以下分组处理：对照组、青蒿琥酯组、青蒿琥酯+去铁胺组,用流式细胞术检测细胞内脂质来源活性氧水平;试剂盒检测细胞内丙二醛水平。用包装HSPA5干扰或过表达质粒的慢病毒感染SMMC 7721细胞,qRT PCR和蛋白质印迹法分别测定转染后HSPA5 mRNA和蛋白表达;CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测细胞内丙二醛水平。结果： 青蒿琥酯浓度为20 μmol/L时,SMMC-7721细胞达到半数致死量,为最佳实验浓度;流式细胞术结果显示,青蒿琥酯处理的细胞内脂质来源活性氧水平、丙二醛水平明显升高,去铁胺可抑制青蒿琥酯导致的细胞内脂质来源活性氧和丙二醛升高(均P<0.05);经过青蒿琥酯处理的HSPA5干扰组细胞活性水平明显低于未干扰组,丙二醛水平明显高于未干扰组(均P<0.05)。结论： 干扰HSPA5可能增强人肝癌SMMC-7721细胞株对青蒿琥酯的化疗敏感性。     

二甲双胍逆转低氧诱导的胰腺癌细胞铁死亡抵抗及潜在的作用机制

目的: 探讨二甲双胍是否能够逆转低氧诱导胰腺癌细胞对铁死亡诱导剂的抵抗,并进一步明确其作用机制。方法: 人胰腺癌Patu8988细胞分别在常氧和低氧下培养不同时间（0、12、24、48 h）,CCK-8法检测细胞增殖,免疫印迹法检测缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor 1α,HIF 1α）蛋白表达;用不同浓度铁死亡诱导剂Erastin分别处理常氧和低氧培养的Patu8988细胞,CCK-8法检测细胞活性;低氧培养的Patu8988细胞分别给予以下处理：对照组、二甲双胍、Erastin、二甲双胍联合Erastin,用CCK 8法检测细胞活性,免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）蛋白表达;用不同浓度二甲双胍处理低氧培养的Patu8988细胞,免疫印迹法分别检测腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPK）,雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR）,HIF-1α等蛋白表达。结果： 与常氧组相比,低氧抑制细胞增殖,且呈时间依赖性,在48 h差异最显著（P<0.05）;Erastin浓度为10 μmol/L时,低氧组细胞活性明显低于常氧组（P<0.05）,为最佳实验浓度;低氧条件下,与单药处理组相比,二甲双胍联合Erastin可以显著抑制细胞活性,降低GPX4蛋白表达水平（P均<0.05）;二甲双胍能够激活AMPK,抑制mTOR磷酸化以及HIF-1α蛋白水平（P均<0.05）。结论： 二甲双胍能够通过AMPK mTOR轴减少HIF 1α表达,从而逆转低氧诱导的胰腺癌细胞铁死亡抵抗。     

超声弹性成像声触诊组织成像量化指标评估肝血吸虫病患者肝纤维化价值临床研究*

目的 探讨应用超声弹性成像声触诊组织成像量化指标评估肝血吸虫病患者肝纤维化的临床价值。方法 2019年1月～2021年1月我院诊治的肝血吸虫病患者110例和同期体检健康人110例,均接受肝活检和行超声弹性成像声触诊组织成像量化检测肝右前叶、肝右后叶和肝左外叶剪切波速度(SWV)。应用ROC分析SWV值诊断肝纤维化的价值。结果 肝血吸虫病患者肝右前叶、肝右后叶和肝左外叶SWV值分别为(1.4±0.4)、(1.4±0.5)和(1.5±0.5),均显著高于健康人【分别为(1.1±0.2)、(1.2±0.3)和(1.1±0.3),P＜0.05】;13例S4期患者肝右前叶、肝右后叶和肝左外叶SWV值分别为(1.9±0.5)、(1.9±0.5)和(2.1±0.6),显著高于27例S3期【分别为(1.6±0.4)、(1.7±0.3)和(1.8±0.4),P<0.05】或33例S2期【分别为(1.4±0.4)、(1.5±0.2)和(1.6±0.3),P<0.05】或37例S1期【分别为(1.2±0.3)、(1.3±0.2)和(1.4±0.2),P<0.05】;经ROC分析发现,SWV_肝右前叶、SWV_肝右后叶和SWV_肝左外叶诊断肝纤维化>=S2的截断点分别为1.250、1.350和1.350,其曲线下面积分别为0.837、0.733和0.807,敏感度分别为0.673、0.545和0.636,特异度分别为0.909、0.945和0.818,均具有一定的应用价值。结论 使用超声检测肝血吸虫病患者肝脏SWV值诊断显著肝纤维化分期有一定的临床应用价值,值得进一步研究。     

低氧诱导胰腺癌细胞通过外泌体途径分泌高迁移率族蛋白1

目的: 研究低氧诱导条件下胰腺癌细胞中高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)的分泌途径。方法: 经GEO和TCGA数据库分析HMGB1在胰腺癌样本中的表达;低氧处理胰腺癌PaTu8988细胞0,6,12,24,48 h,免疫印迹法检测培养上清液中HMGB1的含量;采用外泌体提取试剂盒分离常氧和低氧培养液中的外泌体,运用透射电镜观察外泌体膜结构,运用免疫印迹法检测外泌体中的HMGB1以及外泌体标志蛋白CD9、CD63、CD81以及HSP70的表达;利用免疫荧光法和激光扫描共聚焦显微镜观察HMGB1在PaTu8988细胞中的定位情况。结果： 数据库分析结果表明,与健康胰腺组织相比,HMGB1在胰腺癌组织中呈高表达(P<0.01),且高表达者生存期明显短于低表达者(P<0.05)。低氧处理48 h,细胞培养上清液中的HMGB1含量最多,明显高于6,12,24 h。透射电镜观察到培养上清液中有微囊泡结构,直径在100 nm左右,蛋白质免疫印迹法检测到外泌体膜标志蛋白CD9,CD63,CD81,HSP70的表达和外泌体中HMGB1的表达。免疫荧光结果显示,低氧情况下HMGB1和外泌体共定位增多。 结论： 低氧处理条件下,胰腺癌细胞中HMGB1可通过外泌体途径释放到细胞外。