基于UPLC-MS联用技术的头花蓼抗炎谱效关系初探

目的初步阐明头花蓼Polygonumcapitatum醇提物和水提物与其体外抗炎活性之间的谱效关系。方法采用脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW264.7细胞制备细胞炎症模型,利用NO、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒检测细胞炎症因子释放量,利用偏最小二乘法关联UPLC-MS方法建立的指纹图谱数据和头花蓼不同提取物的药效活性指标,建立头花蓼化学成分的谱效关系。结果头花蓼不同提取物在质量浓度小于250 mg/L时无细胞毒性,且均具有炎症抑制作用,存在一定的量效关系。应用偏最小二乘法对药效指标TNF-α和色谱峰进行关联度比较发现,峰24、17、22、23、20与抗炎药效呈正相关,峰11、1、7、15、5、3与抗炎药效呈负相关。对峰24、17、22、23、20分析发现,除17号峰为鞣花酸外,其余4个峰均为黄酮类化合物。结论头花蓼不同提取物均可以抑制RAW264.7细胞的炎症反应,谱效关系分析得出槲皮苷、鞣花酸、金丝桃苷对头花蓼的抗炎药效(调节TNF-α水平)有较大贡献。     

头花蓼不同极性部位抑菌作用的谱效学分析

目的:建立头花蓼醇提浸膏中7个有效部位的指纹图谱,阐明不同部位所有色谱峰代表的化学成分及其对抑菌效果的贡献值,揭示头花蓼抑菌的药效物质基础。方法:采用UPLC-TOF-MS建立头花蓼醇提浸膏中不同极性部位的指纹图谱,并对各色谱峰进行化学成分分析,通过96孔板法测得不同极性部位对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC),利用偏最小二乘回归法(PLSR)建立不同极性部位指纹图谱与抑菌作用的谱效关系。结果:头花蓼不同极性部位对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌抑菌效果成正相关的色谱峰分别为9个和13个,其主要抑菌成分为1~5和15,19号峰所代表的化合物。结论:头花蓼对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的主要抑菌活性部位为4个强极性部位(A,B,C,D),其主要抑菌成分为6-没食子酸酰葡萄糖,3,6-二没食子酸酰葡萄糖,1,3,6-三没食子酸酰葡萄糖和davidiin,为深入研究头花蓼的抑菌机制奠定了基础。     

丹参破壁饮片与传统饮片水溶性成分指纹图谱及丹酚酸B含量对比研究

目的建立10批丹参传统饮片、冷冻破壁饮片、普通破壁饮片的水溶性成分UPLC指纹图谱,同时测定水溶性指标成分丹酚酸B的含量,为丹参破壁饮片质量与安全性提供参考依据。方法采用UPLC法以Waters ACQUITY BEH C₁₈(2.1 mm×150 mm,1.7μm)为色谱柱,乙腈-0.02%的磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长270 nm;流速0.15 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;采用HPLC法按照2015版《中华人民共和国药典》测定丹酚酸B含量,并利用相似度评价软件与SPSS 22.0软件对指纹图谱与丹酚酸B含量进行分析。结果通过相似度软件分析冷冻破壁饮片、普通破壁饮片、传统饮片分别为12、13、14个共有峰,并通过对照品指认得到丹参素钠(3号峰)、原儿茶醛(4号峰)、咖啡酸(6号峰)、迷迭香酸(13号峰)、丹酚酸B(14号峰)等5种成分,丹酚酸B含量范围为2.354%~7.606%,利用SPSS 22.0的多个相关样本的非参数检验对10批3种粉碎方式指纹图谱与丹酚酸B含量分析得到3种粉碎方式的水溶性指纹图谱与丹酚酸B含量均无明显差异性。结论从定性与定量两个方面对丹参破壁前后水溶性化学成分进行研究,可为丹参破壁饮片的临床应用与开发提供依据。     

不同产地5种中药材安全限量研究——农药残留分析

目的:考查不同产地的太子参、野菊花、三七、茯苓、鱼腥草有机氯农药残留情况,了解我国目前中药材农药残留存在的问题,为后续开发利用药材资源提供理论依据和基础。方法:采用气相色谱-电子捕获检测(GC-ECD) Rtx-1701弹性石英毛细管柱(0.25 mm×30 mm×0.25μm),样品经丙酮,二氯甲烷与石油醚混合有机溶剂超声提取,进样口温度230℃,检测器温度300℃;程序升温,初始温度100℃,先以10℃/min升至220℃,再以8℃/min升至250℃保持10 min,外标法计算含量,应用SPSS 22.0软件对数据结果进行统计学分析。结果:9种有机氯的线性关系良好,相关系数均大于0.995;最低检出限为0.00012～0.00057μg/g;检测仪器的精密度良好,RSD均小于5%;检测方法重现性好,RSD均小于8%;回收率范围为94.91～105.09%。5种中药材中均含有滴滴涕,仅有三七中含有五氯硝基苯;参考2015版《中国药典》和《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》(WM-T2-2004)收载的品种项下"农药残留量"部分检查限度,50批中药材检出含有机氯农药残留率占50%,但含量均较低,其中总六六和总滴滴涕超标率分别为10%和6%,50批中药材合格率达84%,整体符合要求。结论:气相色谱检测法简便快捷、分离效果好,能广泛用于中药材有机氯农药残留的检测。     

头花蓼不同极性部位的抑菌活性研究

目的:研究头花蓼不同极性部位对引起泌尿系统感染等细菌的抑菌效果。方法:采用K-B纸片法,分别测定从头花蓼70%乙醇提取物中分离的7个不同极性部位的样品(A-G)对大肠埃希菌、铜绿假单胞杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、粪肠球菌的敏感度;用液体稀释法测定A-G的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:头花蓼7个极性部位(A-G)均对大肠埃希菌、铜绿假单胞杆菌、变形杆菌的敏感度较高,而对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌敏感度低;A-G七个对大肠埃希菌、铜绿假单胞杆菌的最低和最大MBC、MIC浓度分别为0.78、6.25 mg/m L,1.56、3.12 mg/m L;0.20、3.12 mg/m L,0.39、3.12mg/m L。结论:头花蓼不同极性部位对大肠埃希菌和铜绿假单胞杆菌均具有较高的抑菌活性,抑菌强弱分别为A﹥B﹥C=D=F﹥E=G;B=C=D﹥A=F=G﹥E。     

“苗药”热淋清研究的Meta分析

目的:了解目前全国热淋清的主要研究机构和研究者的分布情况与合作关系以及存在的问题。方法:通过检索主要的中文数据库纳入热淋清研究。利用书目信息共现挖掘系统分析软件(BICOMS-2)对热淋清研究的主题词进行提取和整理,并生成主题词共现矩阵,并采用NetDraw绘制网络关系图。结果:纳入378篇热淋清研究进行主题分析,主要集中在热淋清颗粒治疗非淋菌性尿道炎、前列腺炎和尿道炎的临床研究,采用高效液相色谱等方法测定没食子酸、槲皮苷、原儿茶酸和槲皮素等化学成分的含量,同时也关注了热淋清的质量标准与分析鉴别。结论:热淋清研究者应该进一步增强热淋清的研究主题,特别是其在临床应用方面的研究。