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目的 通过营养胁迫构建内质网应激和自噬模型并评价其对肿瘤增殖和凋亡的影响.方法 以含1%血清的低糖DMEM培养基分别处理HepG2细胞、Huh7细胞不同时间,Western blot检测内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子-6(ATF6)、必需肌醇1 α(IRE1α)、蛋白激酶RNA样内质网激蛋白(PERK)和自噬蛋白轻链3(LC3)、核孔蛋白62(P62)、自噬相关蛋白1(Beclin-1)的表达.免疫荧光双染观察自噬蛋白LC3和GRP78的共表达情况.分别采用流式细胞术和CCK-8检测营养胁迫对细胞凋亡和增殖的影响.结果 Western blot结果显示营养胁迫可时间依赖性的增加肝癌细胞内质网应激和自噬相关蛋白的表达,且在36 h达到高峰.激光共聚焦检测结果进一步证明营养胁迫36 h后肝癌细胞GRP78和LC3荧光强度显著增加.流式细胞术结果显示,低糖低血清营养胁迫模型不会增加肝癌细胞凋亡,但CCK-8实验提示营养胁迫可抑制肝癌细胞的增殖.结论 1%血清低糖DMEM不仅可以诱导内质网应激和自噬且不增加肿瘤细胞凋亡,更符合微环境肿瘤细胞生存状态,为研究内质网应激和自噬提供一种新方法. 相似文献
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目的:研究自噬在内质网应激( ERS)状态下对肝癌HepG2细胞和正常肝细胞L-02作用的差异。方法体外常规培养的人肝癌HepG2细胞和正常肝细胞L-02,分别给予衣霉素( TM)单药和TM联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤( TM+3-MA)或氯喹( TM+CQ)作用12、24、48 h后,采用噻唑蓝( MTT)法检测细胞活力变化,流式细胞术检测细胞凋亡率, Western blot法检测自噬蛋白LC3的变化。结果 TM可引起HepG2细胞和L-02细胞死亡并呈时间依赖关系,3-MA或CQ均可增加TM对HepG2细胞的生长抑制作用,24 h细胞存活率分别为TM+3-MA组(60%)、TM+CQ组(72%)、TM组(86%),差异有统计学意义(P<0.01);但对于L-02细胞,其存活率分别为83%、84%、83%,活力没有明显差异;流式细胞术显示TM+3-MA、TM+CQ和TM组对HepG2细胞的凋亡率分别为15%、11%、7%,差异有统计学意义( P<0.01),但对L-02细胞,凋亡率分别为16%、17%、16%,未见明显差异;Western blot法结果显示TM作用引起两种细胞自噬增加,自噬抑制剂3-MA与CQ可引起两种细胞自噬作用减弱。结论自噬抑制剂(3-MA 或 CQ)均可显著增加TM对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用,但对正常肝细胞L-02的生长抑制作用差异无统计学意义。自噬在ERS状态下可对肝癌细胞的生存提供保护,但对正常肝细胞无保护作用。 相似文献
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目的:研究 miR-98对肝癌 HepG2细胞增殖、凋亡和侵袭、迁移能力的影响及其可能机制。方法将 miR-98mimics、mimics-NC、miR-98inhibitor、inhibitor-NC 瞬时转入肝癌 HepG2细胞内,应用噻唑盐( MTT)法、流式细胞仪、Tr-answell 小室实验检测 miR-98对肝癌 HepG2细胞增殖、凋亡以及侵袭、迁移能力的影响,进一步用 Western blot 法检测各组 Bcl-2蛋白的表达水平。结果 MTT 实验表明 miR-98过表达后,肝癌细胞的增殖能力明显低于对照组;Annexin V-FITC / PI 凋亡实验证实上调 miR-98表达后,细胞的凋亡率较对照组升高;Transwell 小室实验表明上调 miR-98可使肝癌细胞的侵袭、迁移能力减弱。而当 miR-98被抑制后,肝癌HepG2细胞的增殖及侵袭、迁移能力则明显增强,凋亡率则下降。 Western blot 实验检测发现 miR-98过表达后,Bcl-2的表达降低。结论 miR-98可能在肝癌的发生、发展中发挥着抑癌基因的作用;miR-98可能通过下调 Bcl-2的表达,促进肝癌 HepG2细胞凋亡。 相似文献
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目的 分析伏立康唑血药浓度监测结果,为临床安全、有效使用伏立康唑提供依据.方法 回顾性分析安徽医科大学第一附属医院2016年10月至2017年8月60例真菌感染患者131次伏立康唑血药浓度测定结果,探讨血药浓度分布情况及联合免疫抑制剂对患者血药浓度的影响,并分析血药浓度与患者治疗效果和不良反应发生率间的关系.结果 伏立康唑血药浓度差异较大,有51.15%(67/131)的血药浓度在1.0~5.0μg/mL,而41.98%和6.87%的监测结果分别低于和高于有效治疗浓度范围.联合使用免疫抑制剂者占53.33%(32/60),其伏立康唑血药浓度为(1.35±1.55)μg/mL,低于未使用免疫抑制剂者的(3.37±2.39)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.05).伏立康唑治疗的总有效率为95.00%(57/60),治愈组的血药浓度为(4.78±2.28)μg/mL,高于好转组和无效组的血药浓度(P<0.05),并且伏立康唑血药浓度高的患者,其不良反应发生率也明显上升(P<0.05).结论 伏立康唑血药浓度易受多种因素影响,个体差异较大,开展治疗药物监测有利于保证患者安全、有效用药. 相似文献
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192例肿瘤患者消化道不良反应危险因素分析 总被引:1,自引:1,他引:0
目的对肿瘤患者消化道不良反应(ADR)的发生情况及特点进行分析,为临床合理用药提供参考。方法采用回顾性分类统计,对192例报告涉及的患者年龄、性别、肿瘤类型、生活质量评分、给药方式以及ADR临床表现进行分析。结果192例ADR中男性102例,女性90例;40岁以上171例,占89.06%;消化道肿瘤患者93例,居第一位;细胞毒药物ADR发生率居首;ADR的临床表现以恶心、呕吐主,其次为腹泻。结论开展ADR监测,是医务人员,特别是临床药师的重要工作。 相似文献
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目的寻找紫杉醇用于非小细胞肺癌的药代动力学参数与疗效和毒性反应之间的关系。方法 10例非小细胞肺癌患者采用紫杉醇135~175 mg·m-2第1天,静滴3 h,联合顺铂20 mg·d-1第1~5天方案化疗,动态采集血样本,利用HPLC方法测定血药浓度,计算药代动力学参数。记录用药过程中不良反应和疗效评价结果。采用SPSS 19.0统计学方法和DAS 3.0药物动力学软件进行数据分析。结果肝功能损害组Cmax高于无肝功能损害组,且有统计学意义(P=0.012);疾病控制组的每平方米体表面积药量(Dose)高于疾病进展组,差异有统计学意义(P=0.02)。白细胞减少组Dose、AUC、Cmax、t(>0.1)和t(>0.05)等均高于无白细胞减少组,但差异无统计学意义(P>0.05);白细胞减少组t1/2a低于无白细胞减少组,差异有统计学意义(P=0.034)。结论疾病控制组、白细胞减少组和肝损害组AUC分别高于疾病进展组,无白细胞减少组和无肝损害组;且白细胞减少组和肝损害组Cmax分别高于无白细胞减少组和无肝功能损害组,因此可以将紫杉醇AUC和Cmax作为观察疗效和毒副反应的指标,为临床个体化治疗提供一定的理论支持。 相似文献
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分析安徽医科大学第一附属医院门诊A型肉毒毒素使用现状, 探讨该药的规范管理。随机抽取安徽医科大学第一附属医院2019年1月至2020年12月A型肉毒毒素的门诊处方300张, 分析A型肉毒毒素门诊使用情况、处方的合格率和药事管理情况。300例使用A型肉毒毒素的患者中, 用于除皱、眼痉挛、咬肌肥大瘦脸、瘦小腿、组织无力、瘢痕和多汗症的分别为91例(30.33%)、94例(31.33%)、65例(21.67%)、47例(15.67%)、1例(0.33%)、1例(0.33%)和1例(0.33%)。发现不合格处方60张(20.00%), 其中未注明剩余药品处理方法的29张(48.33%), 无医师和药师双签的26张(43.33%), 诊断不明确3张(5%), 超说明书剂量用药和未注明处方日期各1张(1.67%)。肉毒素使用过程中出现未注明剩余药品处理、处方没有双签、超剂量、诊断不明确等不合理用药情况, 药师在发药审核中拦截并联系医生修改处方后, 基本符合国家对毒性药品的管理要求。 相似文献