重庆市高校贫困生心理健康状况研究

[目的]了解重庆市高校贫困大学生心理健康状况.[方法]采用症状自评量表SCL-90对重庆市理、工、农、医、师5所高校的部分贫困大学生进行随机抽样调查.[结果]SCL-90表中8个因子分均显著高于全国大学 生常模;与非贫困生比较,约有12.30%的贫困生表现为不同程度的人际关系敏感、焦虑、强迫、敌意和抑郁等症状;其中以人际关系敏感、强迫和焦虑最为突出.[结论]重庆市高校贫困生心理健康状况普遍低于非贫困生,应该重视对贫困生的心理疏导和帮助.     

SW626细胞染色体动粒变异对其染色体不稳定的影响

目的 探讨恶性肿瘤细胞染色体不稳定性的可能机制.方法 采用本实验室建立的kinetochore-NOR同步银染技术,对SW626细胞染色体kinetochore变异进行分析.结果 与正常人外周血细胞相比,SW626细胞染色体kinetochore缺失[132(0.89%) vs 26(0.18%)]、kinetochore迟滞复制[82(0.55%) vs 14(0.10%)]和kinetochore-NOR融合[153(1.03%) vs 51(0.37%)]频率显著升高(P<0.01),而不对称kinetochore频率二者差异性不显著(P>0.05).此外,在某些SW626细胞染色体上还观察到多重kinetochores现象.结论 kinetochore 缺失、kinetochore迟滞复制和kinetochore-NOR融合可能是SW626细胞染色体非整倍性变异起源的诱因之一;染色体多重kinetochores可能是恶性肿瘤细胞染色体结构畸变产生的重要途径之一.     

子宫内膜胚泡黏附时着床点与着床旁组织的分离

目的：分离小鼠子宫内膜胚泡着床点和着床旁组织，以利于对着床机制及生育调控的研究。方法：取妊娠第5天(D5)小鼠，尾静脉注射0．4％台盼蓝(Trypan blue)，10min后脱颈处死，取小鼠子宫，用处理的4号针头滑动挤压子宫角。结果：取得的子宫内膜完整，着床点染成蓝色，与着床旁组织区别明显，易于分离。结论：用简便易行的方法，分离小鼠胚泡着床点和着床旁组织，为胚泡着床机制的研究提供有意义的物质材料。     

自然流产患者蜕膜MMP10的表达及临床意义

目的:探讨基质金属蛋白酶10 (MMP10)基因及其蛋白在人自然流产蜕膜中的表达水平及临床意义.方法:利用RT-PCR和Westem blotting技术分别检测MMP10基因和蛋白在人正常蜕膜和自然流产蜕膜的表达水平、利用免疫组织化学技术检测MMP10在人正常蜕膜和自然流产蜕膜组织中的分布.结果:正常蜕膜中MMP10基因(0.20±0.08)及蛋白(0.25±0.07)表达均较低,在自然流产蜕膜中MMP10基因(0.65±0.10)及蛋白(0.79±0.10)表达均较高,两者差异具有显著性意义(P＜0.01);MMP10主要表达在流产蜕膜的基质细胞.结论:MMP10在流产蜕膜中高表达可能有利于降解细胞外基质,促进胚胎滋养细胞的侵袭,从而延缓自然流产.     

PRP基因RNAi重组慢病毒制备及PRP基因与睾丸间质细胞增殖和睾酮产生的关系

目的 制备PRP RNAi重组慢病毒,并对PRP 基因功能进行初步研究.方法 采用miRNA方式抑制PRP基因表达,筛选最有效序列包装慢病毒,用于转染TM3睾丸间质细胞.转染实验分为TM3-negative对照组(阴性对照质粒组,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR- neg control 质粒)以及A、B、C 3个干扰质粒组(分别转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B,C质粒);RT-PCR与Western blot方法 检测慢病毒对PRP基因表达影响,MTT方法 检测细胞增殖情况,ELISA方法 检测细胞睾酮产生情况.结果 经测序鉴定,成功制备了PRP RNAi重组慢病毒;与阴性对照质粒组比较,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR- PRP-A,B组可有效下调TM3细胞PRP mRNA和蛋白表达(P<0.01,P<0.05).MTT 结果 表明抑制PRP基因后,TM3细胞的增殖加快(P<0.01).此外,相较于对照组,下调PRP基因抑制促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)刺激产生睾酮的效应(P<0.05).结论 成功制备了PRP RNAi重组慢病毒,对其功能初步研究显示,PRP不仅与睾丸间质细胞增殖有关,而且参与睾酮产生.     

自然流产模型小鼠子宫蜕膜组织miRNAs的表达

目的 寻找自然流产模型小鼠(CBA/J×DBA/2)子宫蜕膜组织与正常妊娠小鼠(CBA/J×BALB/c)子宫蜕膜组织之间差异表达的miRNAs.方法 建立自然流产小鼠模型和正常妊娠小鼠模型,利用miRCURY LNATM microRNA Arrays 10.0检测两组孕小鼠子宫蜕膜组织miRNAs的表达,筛选两组小鼠子宫蜕膜组织差异表达的miRNAs,并对其进行功能检索和靶基因预测.结果 CBA/J×DBA/2小鼠胚胎吸收率为30.9%,CBA/J×BALB/c小鼠胚胎吸收率为7.0%,两者差异有统计学意义(P<0.01).miRNAs芯片数据表明流产蜕膜组织和正常蜕膜组织之间有13个miRNAs存在明显表达差异(ratios≥2.0或≤0.5),其中表达上调8个,表达下调5个.预测软件显示miR-21和miR-26a的靶基因分别是和妊娠相关的RECK和LIF两个因子.结论 小鼠子宫蜕膜组织miR-21和miR-26a的差异性表达可能在小鼠胚胎自然流产过程中扮演重要角色.     

自然流产患者蜕膜组织疾病特异蛋白的初步筛选与鉴定

目的建立早期自然流产蜕膜组织和早期正常蜕膜组织双向电泳图谱,并观察两者之间蛋白表达的差异。方法采用双向电泳技术分离蜕膜组织蛋白,利用专用软件分析所得差异明显蛋白并使用免疫组化和Western blotting验证双向电泳结果。结果成功建立了早期自然流产蜕膜组织和早期正常蜕膜组织双向电泳图谱,并鉴定出9个差异显著的蛋白。结论 9个差异显著的蛋白的功能主要涉及绒毛外滋养细胞的侵袭、自然流产蜕膜组织血管的重建以及蜕膜细胞的凋亡等方面,为进一步研究自然流产发病机制和治疗手段奠定了基础。     

microRNA-145对卵巢癌SKOV3细胞抑癌基因p53表达调控研究

目的 探讨microRNA -145（miR-145）对卵巢癌SKOV3细胞抑癌基因p53表达的调控。 方法 选取2012年2月至2013年4月在重庆医科大学,通过慢病毒转染技术将含miR-145的质粒转入SKOV3细胞中,经嘌呤霉素筛选建立稳定表达miR-145的SKOV3细胞株。实时定量荧光RT-PCR验证miR-145的表达情况,western-blot检测过表达miR-145后SKOV3细胞中p53蛋白表达量的变化。 结果　过表达miR-145的SKOV3细胞p53蛋白相对表达量实验组0.714±0.18,对照组0.333±0.07,增高1.14倍（P＜0.05）。 结论　miR-145可能通过增强卵巢癌SKOV3细胞中抑癌基因p53的表达来降低细胞的肿瘤恶性程度。     

自然流产患者绒毛EVTs的基因芯片初步分析

目的:探讨自然流产绒毛外滋养细胞(Extravillous trophoblast cells,EVTs)侵袭相关基因表达变化.方法:利用U133 plus2.0芯片对自然流产绒毛和正常绒毛组织中EVTs的基因表达谱进行检测,并用生物信息学方法对检测结果进行分析.结果:与正常EVTs相比,在自然流产EVTs中,发现显著上调基因219个,下调基因293个,其功能主要涉及细胞粘附、免疫应答、代谢等.结论:与滋养层细胞细胞粘附、免疫应答、水解酶及凋亡等相关基因的差异表达可能与滋养细胞侵袭行为变化及自然流产有关.     

PRP基因绿色荧光蛋白载体构建及其生物学功能初步研究

目的:构建Prolifein related protein(PRP)基因荧光表达载体,并初步探讨其生物学功能.方法:提取小鼠睾丸RNA,RT-PCR扩增PRP基因编码区片段,酶切连入pEGFP-C1载体,构建含有PRP基因片段的绿色荧光表达载体PRP-pEGFP-C1.为了探讨PRP基因功能,PRP-pEGFP-C1经Lipofectamine2000介导转染293FT细胞,MTT实验分析细胞增殖变化,流式细胞仪分析细胞周期分布.结果:质粒PRP-pEGFP-C1经测序验证,证实PRP基因已正确连入pEGFP-C1载体.免疫荧光染色显示PRP 定位于293FT细胞胞浆.MTT结果表明,上调PRP基因引起293FT细胞增殖活性下降,细胞周期分布情况提示G1期细胞增加,S期细胞减少.结论:成功构建PRP-pEGFP-C1荧光表达载体,对其功能研究表明PRP具有抗人293FT细胞增殖,扰乱细胞增殖周期的功能.本研究为PRP在抗人肿瘤方面的研究提供基础.