TNF-α和PGP9.5在椎体后缘离断症软骨终板的表达及意义

目的:观察TNF-α、PGP 9.5在椎体后缘离断症软骨终板中的表达、分布,探讨其与椎体后缘离断发生、发展的关系。方法:选取手术治疗的12例椎体后缘离断症患者的病椎软骨终板与4例椎体骨折伤椎软骨终板作对照研究。病椎标本包括离断缘及远离离断缘软骨终板组织。切片行TNF-α和PGP 9.5免疫组织化学染色,应用病理图像分析系统测量光密度值(OD值),观测其在椎体软骨终板的表达与分布。结果:骨折椎体的软骨终板内未见TNF-α和PGP 9.5免疫组化阳性染色。椎体离断缘软骨终板组织中,TNF-α和PGP 9.5表达均高于远离离断缘的软骨终板组织(P﹤0.05)。结论:TNF-α和PGP 9.5在椎体后缘离断症的软骨终板中均有表达,终板不同区域其表达存在差异性,局部高表达与椎体后缘离断有密切关系。     

丰宫并殖吸虫感染大鼠后诱导肺组织细胞自噬的初探

目的通过检测蛋白激酶B (Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路相关因子的表达,探讨丰宫并殖吸虫感染大鼠是否可导致肺组织细胞发生自噬。方法 40只SD大鼠随机分为健康对照组,感染后3、 7、 14 d组,每组10只,感染组每鼠腹壁皮下注射6条丰宫并殖吸虫后尾蚴,分别在感染后3、 7、14 d取各组大鼠血清和肺组织,ELISA检测血清中IL-1、 IL-6水平。取肺组织用于透射电镜观察自噬体,HE染色观察肺组织病理学改变,蛋白质免疫印迹(Western blotting)和免疫组化检测Akt、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、程序性死亡受体-1 (Beclin 1)及微管相关蛋白轻链3 (LC3Ⅱ)相关因子的蛋白表达。采用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析。结果ELISA检测结果显示,感染后3、 7、 14 d组血清中IL-1水平分别为(1 558.0±123.6)、(1 511.0±213.1)和(1 448.0±176.8) pg/ml,均高于对照组的(1 222.0±112.8) pg/ml (P <0.05);感染后3、 7 d组IL-6水平分别为(1 481.0±197.9)、(1 423.0±210.0) pg/ml,均高于对照组的(1 221.0±138.9) pg/ml (P <0.05)。透射电镜观察在不同的感染阶段,肺组织中线粒体均出现自噬现象。大鼠组织肺病理学检测结果显示,各感染组细胞排列紊乱,肺泡结构遭到不同程度的破坏。各感染组Akt蛋白表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05);感染后3、 7 d组磷酸化蛋白激酶B (p-Aktser473)蛋白表达水平为(1.288±0.109)、(1.619±0.132),均高于对照组(0.733±0.135)(P <0.01);感染后3、 7、 14 d组磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-m TORser2448)蛋白表达水平分别为(1.574±0.278)、(2.384±0.125)和(1.808±0.121),均高于对照组(1.260±0.087)(P <0.05);感染后3 d组mTOR、 Beclin 1蛋白表达水平分别为(1.714±0.217)和(2.736±0.333),均高于对照组(1.345±0.067)和(1.974±0.225)(P <0.01);感染后14 d组LC3Ⅱ蛋白表达(1.938±0.191)高于对照组(1.401±0.200)(P <0.01)。免疫组化分析结果显示,对照组肺组织细胞呈蓝色,阳性呈棕黄色,各因子阳性定位于细胞膜和细胞浆。各感染组Akt、 mTOR与对照组相比,肺组织细胞中棕黄色显色不明显,A450值与对照组比较差异无统计学意义(P> 0.05);感染后3、 7、 14 d组p-Aktser473、 p-mTORser2448及Beclin 1与对照组相比,棕黄色显色加深明显,A450值分别为(0.104±0.010)、(0.143±0.022)、(0.088±0.013),(0.100±0.007)、(0.151±0.006)、(0.120±0.012)和(0.129±0.005)、(0.047±0.004)、(0.050±0.005),均高于相应对照组(0.032±0.001)、(0.065±0.002)和(0.031±0.001)(P <0.05);感染后3、 14 d组LC3Ⅱ与对照组比较棕黄色明显加深,A450值分别为(0.056±0.006)、(0.120±0.007),均高于对照组(0.042±0.004)(P <0.05)。结论丰宫并殖吸虫感染大鼠所致的肺损伤,炎症反应可诱导肺组织细胞发生自噬,该自噬作用可通过检测Akt/mTOR信号通路相关因子的表达来初步实现。     

污泥深度脱水处理与处置工艺的COD及碳减排分析

采用污泥深度脱水技术,可使泥饼含水率降到40%～55%,有利于污泥后续处置的同时实现全过程的COD减排及碳减排。经核算,10万m3/d污水处理厂产生的污泥经深度脱水-焚烧、深度脱水-填埋工艺进行合理有效的处理处置,COD日排放均可减少5.52 t,CO2日排放可分别减少26.06 t和5.61 t。     

介绍一种新型高效的油红O染色法

正油红O染料对脂肪变性、脂质沉积的组织器官有良好的溶脂及吸附作用,它具有操作简便、色彩鲜亮等特点,优于苏丹Ⅲ染液,被广泛运用于临床和科研病理工作中。针式滤膜过滤器原用于过滤色谱分析样品及流动相,对色谱柱的保护、防止进样阀和输液泵管系统被污染等具有较好的作用,广泛应用于无菌实验、胶体分离及质量与微量分析。油红O染液中含醇类物质易挥发且杂质多,因此传统染色需要异丙醇漂洗分色,整个步骤历时较长且不易控制,对人体     

介绍一种细胞凋亡TUNEL检测与Ki-67 DAPI三色荧光染色操作流程

<正>肿瘤生物治疗基础研究中,对不同小分子靶向治疗药物进行疗效评估时,除可以测量肿瘤大小外,还需利用TUNEL技术检测肿瘤细胞凋亡程度及行免疫荧光染色检测Ki-67蛋白肿瘤细胞增殖程度。凋亡细胞增多,增殖的肿瘤细胞减少,可以初步推测肿瘤治疗有一定疗效。本文首次采用细胞     

广州军区某部队机关在职干部健康检查结果及预防保健对策

目的通过分析广州军区某部队机关干部健康检查异常结果的分布及特征,为进一步做好疾病防治和首长保健提供依据。方法回顾分析空军某部机关在职干部2013年度健康检查相关资料268份,分别按性别、年龄分层和干部级别对异常检出率进行比较,分析影响健康的主要问题。结果检查结果有异常者占72.8%,并以代谢性疾病为主。异常结果排在军队男性干部前5位的是高脂血症、高尿酸血症、脂肪肝、高血压和牙楔状缺损,女性干部为乳腺结节、高脂血症、高尿酸血症、甲状腺结节和脂肪肝。随着年龄的增大,疾病的检出率逐步增高（P〈0.05）。相比于团职和营以下干部,师职以上干部在代谢性疾病和退行性病变方面的异常检出率明显增高（P〈0.05）。结论代谢性疾病已成为影响部队在职干部健康的主要疾病,应作为重点来加强健康教育和加大师职以上干部的保健力度,进行综合防治,切实降低患病率。     

伴ModicI型改变的腰椎间盘突出症的手术疗效分析

目的探讨腰椎终板Modic I型改变对伴下腰痛的腰椎间盘突出症患者手术疗效的影响。方法回顾性分析2008年3月至2012年l1月收治的伴下腰痛的腰椎间盘突出症患者63例,分为两组:A组伴终板Modic I型改变,B组无终板Modic改变,均行单节段开窗减压髓核摘除术。采用疼痛视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)评估两组患者手术后的临床效果,评价终板Modic I型改变对患者术后下腰痛改善的影响。结果术前A、B两组的VAS、ODI评分差异均无统计学意义(P>0.05)。术后两组患者坐骨神经痛症状均明显缓解或完全消除。术后随访VAS及ODI评分两组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腰椎间盘突出症术后下腰痛的改善与终板Modic I型改变存在相关性。     

黄芪箭丸治疗糖尿病麻木疼痛的临床研究

目的观察益气养血、活血化痰、通络止痛的中药制剂黄芪箭丸治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效。方法治疗组40例在饮食控制、运动治疗及西药降糖药物治疗的同时加用益气养血、活血化痰、通络止痛中药黄芪箭丸,对照组20例在同等条件下使用卡马西平治疗。结果治疗组改善麻木疗效优于对照组;对疼痛及腱反射改善两者无统计学差异。治疗过程中未见明显不良反应。结论益气养血、活血化痰、通络止痛的中药制剂黄芪箭丸是治疗糖尿病周围神经病变麻木疼痛症状的有效方药。     

人PDE4B2全长与截短突变体的重组表达及表征

目的：比较6His-SUMO融合的人全长环核苷酸磷酸二酯酶4B2（SF-hPDE4B2）及152-528aa截短突变体（ST-hPDE4B2）在大肠杆菌融合表达、亲和纯化及酶学特征,以明确ST-hPDE4B2用于筛选抗炎活性hPDE4B2抑制剂的优势。方法：分别将6His-SUMO融合到人全长PDE4B2基因编码区的N端和152-528aa截短突变体N端得到SF-hPDE4B2和ST-hPDE4B2;大肠杆菌BL21（DE3）诱导表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化,用偶联碱性磷酸酶的孔雀绿定磷法测定酶活性。结果：纯化后ST-hPDE4B2比活性接近SF-hPDE4B2的40倍,活性收率超过100倍;SDS-PAGE和6His标签免疫印迹发现纯化后2种融合蛋白都有多种带6His标签的降解片段;测定咯利普兰[（R）-Rolipram]和罂粟碱的抑制常数表明,SF-hPDE4B2对（R）-Rolipram主要为高亲和力结合构象,而ST-hPDE4B2主要为低亲和力结合构象。结论：与SF-hPDE4B2相比,ST-hPDE4B2用于筛选抗炎活性hPDE4B2抑制剂可能更有优势。