荧光定量聚合酶链反应染料法在HLA-B＊5801等位基因分析中的应用

目的：评估荧光定量聚合酶链反应（PCR）染料法在HLA-B＊5801等位基因分析中的灵敏度、特异度、准确度和Kappa值,并与经典测序方法进行比较.方法：应用HLA-B＊5801基因检测试剂盒对268例痛风、痛风性关节炎和高尿酸血症患者和50例正常人HLA-B＊5801进行分析,并对318例标本HLA-B基因2、3、4外显子双向测序.结果：荧光定量PCR染料法敏感度、特异度和准确度均为100％,Kappa值为1.318例参与者HLA-B＊5801等位基因发生率为9.2％（29/318）.痛风患者HLA-B＊5801发生率8.51％（8/94）,痛风性关节炎发生率9.52％（2/21）,高尿酸血症发生率11.11％ （17/153）,正常人发生率4％（2/50）.结论：荧光定量PCR染料法能够快速准确检测HLA-B＊5801,检测结果与测序方法完全一致.     

肿瘤患者T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的 :探讨肿瘤患者外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)表达和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法 :采取肿瘤患者 86例、正常对照者 44例的外周血。PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,用图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I .S % ) ;PBMC用离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测IFNγ和IL 4产生细胞的频度 (% ) ;用相同的活化剂刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的γ 干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)水平。结果 :肿瘤患者和正常人 ,AgNORs表达分别为 4.9± 1.2I .S %和 7.82± 1.2 8I .S % ,肿瘤组显著下降 (P <0 .0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th1/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;系统分析 5 1例肺癌 ,转移组比未转移组 ,复发组比未复发组 ,Th1细胞数、Th1/Th2和IFNγ产生水平显著下降 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2、IFNγ产生和肿瘤患者生活状态的Karnofsky评分正相关。结论 :肿瘤患者PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关 ,与临床状态变化一致     

蒲种壳多糖的免疫药理活性

蒲种壳多糖(LSCP)含有14.1％的蛋白质和81％的多糖,其糖类由鼠李糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、牛乳糖和已糖醛酸组成。LSCP有使正常小鼠脾淋巴细胞凝集和有丝分裂的活性;有促进活化的淋巴细胞增殖的效应。正常小鼠口服13CP后,脾脏白细胞增多、脾淋巴细胞产生白细胞介素2(IL-2)的水平提高。口服LSCP可部分地拮抗环磷酰胺降低白细胞数和IL-2产生的抑制作用。     

少腹逐瘀汤对原发性痛经患者雌激素、前列腺素E_2及临床疗效的影响

目的:探讨少腹逐瘀汤对原发性痛经患者雌激素(E_2),前列腺素E_2(PGE_2)水平及临床疗效的影响。方法:选取原发性痛经患者90例,随机分为对照组和观察组,每组45例,对照组患者给予痛经宝颗粒,观察组患者给予少腹逐瘀胶囊,治疗结束后,对所有患者的E_2、孕激素(P)P、PGE_2、疼痛程度临床疗效进行检测并比较。结果:与治疗前比较,治疗后2组患者E_2、疼痛程度积分均下降,P、PGE_2水平均升高(P0.05);与对照组比较,观察组患者E_2、疼痛程度积分较低,P、PGE_2水平较高(P0.05),观察组患者的治疗总有效率较高(P0.05)。结论:少腹逐瘀汤能够降低原发性痛经患者E_2、疼痛程度积分,升高P、PGE_2水平,具有较好的临床效果。     

吗啡基因多态性研究文献计量学分析

摘要：目的:对吗啡基因多态性的研究现状进行分析,为今后有关吗啡基因多态性的研究及临床个体化用药提供参考。方法:以Web of Science核心合集、中国知网（CNKI）为检索平台,搜集有关吗啡基因多态性研究的文献,检索时限均从建库至2019年10月14日。以文献计量学的方法分析相关文献在国家/地区、作者、来源出版物、年发文量、年引文量、机构及引用排名前十的情况;采用HistCite、CiteSpace等软件分别对检索到的英文文献及中文文献进行分析,生成引证关系图和关键词共现时区图。结果:在Web of Science核心合集中共检索到英文文献3 414篇,其中年发文量以2010年最多,占总数的5.15%;年引文数以2012年最多,占总数的7.64%,h-index为146;发文最多的作者共发表了59篇文章;发文最多的国家为美国,占总数的44.25%;发文最多的机构为明尼苏达大学（111篇）;在CNKI中检索到中文文献共667篇,其中2005年发文最多为53篇。结论:有关吗啡基因多态性的相关研究进展迅速,我国对于吗啡基因多态性的研究虽然起步较早,但前期进展缓慢,近年发展迅速且成果显著。     

慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化发病机制的初步探讨

目的制作大鼠慢性马兜铃酸肾病模型,初步探讨该模型肾间质纤维化的发病机制。方法雄性SD大鼠随机分为2组,模型组给关木通浸膏水溶液间断灌胃,对照组仅给自来水灌胃。灌胃后第4、8和12周每组各处死6只大鼠,留取两侧肾脏,应用实时定量反转录聚合酶链反应(realtimequantitativeRT-PCR)和免疫组织化学方法研究两组大鼠肾脏Ⅰ型胶原(ColⅠ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子((CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAl-1)和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的mRNA及蛋白质表达。结果模型组大鼠用药后第4周肾实质ColⅠ、TGF-β1、CTGF、PAI-1及TIMP-1mRNA表达显著上调,分别达对照组的9.31倍、5.16倍、1.79倍、8.66倍及2.54倍(P<0.01或P<0.05);第8周除TIMP-1有所升高外其余指标mRNA表达均有所下降,但与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05);第12周全部指标mRNA表达继续下降,除CTGF外其余指标与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。模型组大鼠用药后第4周ColⅠ、TGF-β1、CTGF、PAI-1及TIMP-1在肾小管间质的阳性染色面积显著扩大,分别达对照组的2.24倍、1.43倍、1.13倍、1.17倍及1.24倍(P<0.01),第8周和第12周全部指标阳性染色面积持续扩大(P<0.01)。结论慢性马兜铃酸肾病大鼠肾间质     

25例口底癌临床分析

目的 对口底癌治疗方法及预后进行探讨。方法 对我院25例口底癌不同治疗方法的3年及5年生存率进行分析。结果 化疗 手术 放疗组的3年生存率为57.14％,5年生存率为14.28％。结论 口底癌的综合治疗效果良好。     

肿瘤细胞株和癌组织角蛋白19、20 mRNA表达及临床意义

目的　建立利用角蛋白检测外周血中循环癌细胞的方法 ,探讨角蛋白 19、2 0 (K19、K2 0 )在不同肿瘤细胞株和肿瘤组织中的表达。方法　采用定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测11个肺癌、食管癌、膀胱癌、大肠癌肿瘤细胞株和 33例相对应的癌组织中特异性K19、K2 0mRNA的表达。结果　 4种肿瘤细胞株及 33例相对应的癌组织均表达K19mRNA ,但表达量有明显差别。同种癌组织之间K19mRNA的表达量相差在 1.7～ 10倍之间 ,表达量最低者仅为阳性对照的 12 %以下。肺癌和食管癌细胞株和癌组织中均未见K2 0mRNA的表达。 6例膀胱癌组织中 ,仅有 1例呈阳性 ;5例肠癌组织中 ,4例呈阳性 ,表达量为阳性对照的 41%～ 77%。膀胱癌细胞株EJ1和肠癌细胞株SW480未见K2 0mRNA的表达。结论　K19、K2 0可作为检测外周血中循环癌细胞的生物标志物。但个别癌组织中K19、K2 0的表达低下 ,有可能导致检测出现假阴性结果。     

PAI-14G/5G基因多态性与严重急性呼吸综合征后骨坏死

[目的]测定严重急性呼吸窘迫综合征(SARS)后骨坏死患者低纤溶倾向的纤溶酶原激活抑制物PAI和相关基因PAI-4G/5G基因多态性与国人SARS后骨坏死的关系,以便于非创伤性骨坏死的早期诊断和易感人群的筛选.[方法]取61例SARS后骨坏死患者抽取空腹肘静脉血.另取健康人群52名为对照,应用凝血仪、酶联免疫吸附(ELISA)方法测定PAI值,应用PCR 固相寡核苷酸连接分析(SPOLA)法测定PAI-1基因4G/5G多态性.[结果]SARS后骨坏死患者PAl异常明显PAI(15.64±1385)U/ml VS(7.96±4.27)U/ml,PAl-1基因4G/4G在骨坏死人群中增高,但统计学未见差异性,血浆PAI活性与4G/4G纯合子基因型密切相关.[结论]SARS后骨坏死患者的凝血指标异常,PAI可作为骨坏死易感因素的筛选指标.PAI-1基因4G/4G可能是国人骨坏死的遗传标记.     

慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化的实验研究

近 10年来 ,国内外学者对慢性马兜铃酸肾病 (CAAN)的临床和病理特征已有了较深入认识 ,但其发病机制仍不十分清楚 ,我们用关木通浸膏水溶液间断灌胃的方法 ,已成功制作成大鼠CAAN动物模型 ,本文即利用这一模型来探讨CAAN肾间质纤维化的发病机制。一、材料与方法1.试剂 :总RNA提取试剂盒及引物 ,实时定量RT PCR试剂盒 ,兔抗大鼠Ⅰ型胶原 (ColⅠ )多克隆抗体 ,兔抗大鼠转化生长因子 (TGF) β1多克隆抗体 ,山羊抗人结缔组织生长因子 (CTGF)多克隆抗体 ,兔抗大鼠纤溶酶原激活物抑制物 (PAI) 1多克隆抗体 ,兔抗人金属蛋白酶组织抑…