BMS-345541对人骨肉瘤细胞MG63凋亡及其作用机制

目的研究BMS-345541对人骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响及其可能的机制。方法以0、2、4、6、8、10μmol/L BMS-345541处理MG63细胞24、48 h后,用CCK-8法检测细胞存活率。用0、2、4、8μmol/L药物作用细胞24 h后,以PI染色法观察细胞凋亡情况、流式细胞仪检测细胞凋亡。以同样浓度作用细胞48 h,Western-blot检测cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果 (4-10)μmol/L的BMS-345541均可抑制MG63细胞的增殖,其抑制效应呈剂量-时间依赖性,48 h最低存活率只有(0.412±0.024)(P0.05)。PI染色荧光显微镜观察结果发现:随药物浓度增高,相同视野下正常细胞数逐渐降低,凋亡细胞数逐渐增高。流式细胞仪分析:0、2、4、8μmol/L的作用BMS-345541 24 h后,凋亡率分别为(5.2±0.78)%、(5.82±0.82)%、(8.86±1.71)%、(11.01±2.69)%,与对照组相比,8μmol/L组差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示MG 63细胞中的cleaved caspase-3蛋白表达量上调,与对照组相比,2、4、8μmol/L组差异均有统计学意义(P0.05)。结论 BMS-345541可抑制MG63细胞增殖,并诱导其发生凋亡,其作用机制可能与cleaved caspase-3表达上调有关。     

Monitoring island flap for fibular graft in 30 patients with long bone defects

To study the effect of vascularized fibulargraft on large defects of long bones and the monitoringmethod for the vascular status of the grafted fibula.     

带监测皮岛腓骨移植治疗股骨颈骨折

目的：探讨监测皮岛腓骨移植治疗股骨颈骨折的临床价值。方法：用带监测皮岛的腓骨移植结合AO空心钉内固定治疗11例中青年股骨颈骨折患者。结果：11例中1例监测皮岛于术后监测过程中准确地提示移植腓骨血管危象，及时手术探查处理，复通血供。11例监测皮岛全部成活，随访1～3年，股骨颈骨折端骨愈合，股骨头无坏死。结论：带监测皮岛吻合血管的腓骨移植治疗股骨颈骨折疗效可靠，监测皮岛是腓骨移植术后血供监测的可靠方法。     

应用大块髂骨重建胫骨平台粉碎骨折合并平台缺损

目的：分析评价应用大块髂骨植入胫骨平台重建胫骨平台粉碎骨折合并平台缺损的疗效。方法：本组13例胫骨平台粉碎骨折AO分类均为C3型,取自体大块髂骨植入一侧胫骨平台,用拉力螺钉、“T”型钢板和“高尔夫”型钢板内固定重建胫骨平台关节面。结果：本组13例随访6～18个月,植入的大块髂骨无塌陷,术后6个月膝关节HSS评分78～95分,平均90．3分。结论：应用大块自体髂骨植入重建胫骨平台近期疗效满意。     

交锁髓内钉远端锁钉困难的原因分析与对策

目的 分析交锁髓内钉远端锁钉困难的原因,并提出相应的处理方法.方法 分析83例股骨交锁髓内钉内固定术(其中10例为逆行交锁髓内钉内固定术)及75例胫骨交锁髓内钉内固定术,术中均采取标准方式开路、扩髓、复位插钉、安装远端瞄准器及定位杆,常规行远端锁钉交锁.结果 按常规操作方法下出现术中出现锁钉困难45例(股骨交锁钉占28例,胫骨交锁钉占17例,逆行股骨交锁钉未出现锁钉困难),均采取"C"型臂X光机辅助下重新置入定位杆,准确压住髓内钉后,锁钉均取得成功.结论 行髓内钉内固定时应按规范程序操作,避免动作粗暴,出现锁钉困难时应分析其原因,务必使定位杆准确置于髓内钉远端压钉处,应用"C"臂X光辅助,一般可解决远端锁钉困难问题.     

AF内固定治疗胸腰椎爆裂性骨折增强脊柱稳定性的研究

目的 探讨胸腰椎爆裂性骨折后路AF内固定撑开复位、间接减压的疗效。方法 对33例患者的治疗进行回顾性分析。患者为胸腰椎爆裂性骨折，但MRI示后纵韧带仍完整。其中24例伴脊髓损伤，按Frankel分级，A级2例、B级7例、C级9例、D级6例。9例无神经压迫症状。治疗均采用后路AF系统撑开复位内固定，结合横突间、椎板间植骨。术前及不同随访时间行CT检查，分别计算其伤椎椎体高度及椎管狭窄率，确定椎体高度及椎管横截面积的恢复程度，采用配对t检验方法进行统计学分析。结果 33例术后平均随访13．4个月，伤椎前柱高度、后柱高度、椎管狭窄率治疗前分别为47．9，82．1，(29．3&;#177;13．5)％；治疗后分别为86．6(t=3．034，P&;lt;0．01)，92．3(t=3．401，P&;lt;0．01)，(7．3&;#177;7．9)％(t=3．626，P&;lt;0．01)。24例脊髓损伤患者中，神经功能恢复按Frankel分级评定，22例分别提高1～3级，2例A级无变化。33例中有2例AF钉断裂，余患者内固定稳定，未见椎体塌陷。结论 AF系统治疗后纵韧带完整的胸腰椎爆裂性骨折，通过撑开复位,间接减压，能有效恢复椎体高度及椎臂形态，以维持和增强脊柱稳定性。     

成骨诱导双基因共表达腺病毒载体的构建

目的 探讨用一条Link序列T2A连接骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因构建含目的 基因的腺病毒载体的可行性.方法 先从cDNA中扩增得到全长BMP-2和bFGF基因片段,再接于Link序列T2A的两端.通过T2A Peptide的互补.延伸得到BMP2-T2A-bFGF的全长PCR产物,利用上游引物的Bgl Ⅱ酶切位点和下游引物的EeoRV酶切位点将其插入到pShuttle-IRES载体中,酶切、测序鉴定;利用同源重组技术将目的 基因表达框从穿梭质粒转移到腺病毒载体,鉴定阳性克隆;将PacI线性化后的腺病毒载体转染到293A细胞,观察GFP表达,PCR鉴定后进行大量扩增,并用CsCl梯度离心法进行纯化;测量A260,计算病毒感染滴度.结果 克隆得到的BMP-2与bFGF基因测序正确.经BglⅡ和EeoR Ⅴ双酶切得到的BMP2-bFGF 2个基因全长序列完全克隆到穿梭质粒和重组腺病毒载体质粒中;转染293A细胞2周后观察到明显的GFP聚集表达,即病毒包装成功,扩增纯化后滴度为3.6×1011 VP/ml.结论 经酶切鉴定BMP-2与bFGF双基因共表达腺病毒载体构建成功.     

应用显微外科技术修复小腿及足踝部创伤创面

目的 报道小腿及足踝部创面的显微外科修复的临床效果.方法 根据创面的大小、部位、功能需要,选择应用显微外科皮瓣修复小腿及足踝部创面36例,包括隐神经皮瓣5例,腓肠神经皮瓣9例,足背皮瓣3例.胫后动脉逆行岛状皮瓣3例,腓肠肌内侧头肌皮瓣11例,带神经血管蒂足底内侧皮瓣5例. 结果 除2例皮瓣边缘表皮少许坏死经换药逐渐愈合外,其余病例创面均术后一期愈合,术后随访3个月～2年,皮瓣质地良好,功能正常.结论 根据创面缺损情况及部位选择应用皮瓣或肌皮瓣修复小腿及足踝部创面可获得良好的临床效果.