抗病毒治疗对HBVDNA阳性原发性肝癌术后临床转归的影响

目的探讨抗病毒治疗对HBVDNA阳性原发性肝癌（PHC）术后临床转归的影响。方法将56例HBVDNA阳性PHC术后患者随机分成两组：治疗组26例,在肝癌切除术后应用拉米夫定（100mg/d）治疗;对照组采用单纯手术切除;观察并比较两组患者肝功能、HBVDNA定量、AFP、Child-Pugh评分、无瘤生存率等。结果在术后3个月时,治疗组血清HBVDNA水平明显下降（P〈0.05）;在术后6个月时,治疗组血清HBVDNA水平显著下降（P〈0.01）,血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）显著下降,ALB显著升高,Child-Pugh评分显著降低（P〈0.01）;而对照组术前术后HBVDNA水平无明显变化（P〉0.05）,ALT、AST、TBIL、ALB及Child-Pugh评分等指标虽有改善,但与术前相比差异无统计学意义（P〉0.05）。随访3年,对照组与治疗组的无瘤生存率1～,2～,3～年分别为76.82%、53.49%、36.11%和89.05%、70.04%、64.66%,两组之间差异有统计学意义。结论肝癌根治术后抗HBV治疗能降低肿瘤复发率,延长无瘤生存期,改善患者预后,因此对术前HBV-DNA阳性（HBVDAN≥1.0×103copies/mL）肝癌患者,宜尽早联合抗病毒治疗。     

还原型谷胱甘肽治疗恙虫病合并中毒性肝炎的临床观察

目的观察在抗感染的同时采用还原型谷胱甘肽治疗恙虫病合并中毒性肝炎的临床疗效。方法将32例恙虫病合并中毒性肝炎患者随机分为2组,治疗组17例在抗感染及给予甘草酸二铵护肝降酶基础治疗上加用还原型谷胱甘肽,对照组15例仅予抗感染及甘草酸二铵护肝降酶。2组均治疗2周。结果治疗组加用还原型谷胱甘肽可使患者临床症状消失或明显改善,总有效率为88.2%,对照组为66.7%。肝功能各指标恢复正常或下降优于对照组。结论还原型谷胱甘肽治疗恙虫病合并中毒性肝炎疗效良好,安全性高。     

成骨诱导双基因共表达腺病毒载体的构建

目的 探讨用一条Link序列T2A连接骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因构建含目的 基因的腺病毒载体的可行性.方法 先从cDNA中扩增得到全长BMP-2和bFGF基因片段,再接于Link序列T2A的两端.通过T2A Peptide的互补.延伸得到BMP2-T2A-bFGF的全长PCR产物,利用上游引物的Bgl Ⅱ酶切位点和下游引物的EeoRV酶切位点将其插入到pShuttle-IRES载体中,酶切、测序鉴定;利用同源重组技术将目的 基因表达框从穿梭质粒转移到腺病毒载体,鉴定阳性克隆;将PacI线性化后的腺病毒载体转染到293A细胞,观察GFP表达,PCR鉴定后进行大量扩增,并用CsCl梯度离心法进行纯化;测量A260,计算病毒感染滴度.结果 克隆得到的BMP-2与bFGF基因测序正确.经BglⅡ和EeoR Ⅴ双酶切得到的BMP2-bFGF 2个基因全长序列完全克隆到穿梭质粒和重组腺病毒载体质粒中;转染293A细胞2周后观察到明显的GFP聚集表达,即病毒包装成功,扩增纯化后滴度为3.6×1011 VP/ml.结论 经酶切鉴定BMP-2与bFGF双基因共表达腺病毒载体构建成功.     

不同移植策略治疗成人急性淋巴细胞白血病的初步观察*

目的：对于急性淋巴细胞白血病尤其是Ph+者的造血干细胞移植，为了减少移植后复发，移植时机、移植方案以及移植后的过继免疫治疗至关重要。实验拟观察清髓性与非清髓性移植后供者淋巴细胞输注以及非清髓性移植后采用低剂量环孢素A的效果。 方法：选择1998-12/2007-05广州市第一人民医院血液科进行异基因造血干细胞移植的5例成人急性淋巴细胞白血病患者。患者对治疗知情同意，并经医院伦理委员会批准。1例采用传统的白消胺联合环磷酰胺方案做清髓性预处理；4例采用非清髓性造血干细胞移植，其中1例采用以抗胸腺细胞球蛋白为基础减低白消胺联合环磷酰胺强度的预处理，移植后行供者淋巴细胞输注，3例以氟达拉滨为基础的非清髓性移植，采用低剂量环孢素A治疗。移植物抗宿主病的预防均采用短程的甲氨蝶呤联合环孢素A。观察患者治疗后造血、嵌合状态、移植物抗宿主病、感染等移植相关的并发症。 结果：所有患者均获得供者细胞的成功植入。①以抗胸腺细胞球蛋白为基础的非清髓性移植获得混合性嵌合体，进行8次淋巴细胞输注后逐渐形成完全供者嵌合体，并发肝脏和皮肤的急性移植物抗宿主病，无病生存。②以氟达拉滨为基础的非清髓性移植获得完全供者嵌合体，1例复发无并发移植物抗宿主病，2例消除BCR/ABL融合基因阳性细胞并发急、慢性移植物抗宿主病。③清髓性移植1例复发、并发急、慢性移植物抗宿主病。 结论：①传统的预处理、以抗胸腺细胞球蛋白或者氟达拉滨为基础的非清髓性预处理移植治疗成人急性白血病均可获得供者细胞的成功植入，非清髓性移植后的过继免疫治疗均获得了移植物抗白血病效应。②3种移植策略的疗效、并发症有待进一步观察。     

248例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织HBsAg／HBcAg表达的相关性研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理学损害和HBsAg／HBcAg表达的关系。方法 对248例慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺活检,采用免疫组织化学法检测HBsAg和HBcAg,同时检测患者血清HBVDNA水平。结果 在肝脏炎症程度G1～G4四组患者之间血清HBV DNA水平无显著性差异（P〉0．05）,肝纤维化程度S1～S4四组患者之间血清HBV DNA水平也无显著性差异（P〉0．05）;在肝组织HBsAg表达强度-～＋＋＋四组患者之间血清HBV DNA水平无显著性差异（P〉0．05）,而肝组织HBcAg随血清HBV DNA水平的增高而表达增强。结论 慢性乙型肝炎患者肝组织炎症活动度和纤维化程度与血清HBV DNA水平无相关性。     

Infliximab对急性坏死性胰腺炎并MODS模型大鼠肝损害的防治

目的 探讨Infliximab(TNF-a单抗)对急性坏死性胰腺炎(ANP)并多器官功能障碍(MODS)模型大鼠肝损害的防治效应.方法 经胰胆管逆行注射4.5%牛磺胆酸钠制备大鼠ANP并MODS模型.40只SD大鼠随机分为手术对照组、模型组和Infliximab治疗组、Octreotide治疗组、Infliximab+...     

乙型肝炎慢加急性肝衰竭严重度简易评分系统

目的 建立一种评价乙型肝炎慢加急性肝衰竭严重性的客观、简便、敏感的评分系统.方法 中山大学附属第三医院感染病科1998年1月至2008年3月409例乙型肝炎慢加急性肝衰竭患者,分为存活组194例和死亡组215例,分析患者的肝性脑病,血清肌酐,凝血酶原活动度,血清总胆红素,感染,肝脏大小,腹水液平等7个临床指标,按照它们的严重性分别给予0～4分的评分并累计总分.将409例患者随机分为两批,第1批309例,存活144例和死亡165例用于建立评分模型及确定诊断界点.第2批100例,存活50例和死亡50例用于验证.结果 慢加急性肝衰竭严重性总评分在144例生存组为6.9±3.2,165例死亡组为15.8±4.0,两组间差异有统计学意义(P(0.01).ROC曲线下面积为0.953,其最佳临界值为9.5,相应的灵敏度为0.97,特异度为0.82.根据最佳临界值将第2批患者(存活组50例,死亡组50例)分两组,≥10分组预后差,病死率为87.5%(49/56);≤9分组预后好,病死率为2.3%(1/44),两组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 本评分系统用于评价乙型肝炎慢加急性肝衰竭严重性具有简易、敏感、客观的优点.     

HBV相关慢加急性肝衰竭预后简易评分系统的建立

目的建立HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)严重度简易评分系统。方法收集620例HBV-ACLF患者的临床资料,选择肝性脑病、血清肌酐、血清总胆红素、凝血酶原活动度、感染、肝脏大小、腹水液平等7个临床指标,应用统计学方法并结合临床实际,确定各指标从0~4分评分界点,并累计总分。据此建立模型并确定诊断界点,对此评分模型进行验证。结果对HBV-ACLF患者临床资料进行统计学分析,交互卡方检验确定各指标评分分值并建立模型。将500例患者分为生存组和死亡组。两组间评分差异有统计学意义(t=25.78,P0.001)。受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积0.963,最佳临界值9.5,灵敏度0.98,特异度0.83。120例患者对其进行验证,≥10分预后差,病死率为84.3%,≤9分组预后好,病死率为3.5%。两组病死率比较差异有统计学意义(χ2=72.2,P0.001)。结论本评分系统可用于HBV-ACLF预后评估,具有简易、敏感、客观的优点。     

肝细胞癌相关长链非编码RNA差异表达的研究

目的分析肝细胞癌与正常肝组织中差异表达的长链非编码RNA(lncRNA),发现可能与肝细胞癌发生发展相关的特异lncRNA。方法采用lncRNA表达谱芯片技术检测5例肝细胞癌和其配对癌旁正常组织中的lncRNA,筛选出差异表达的lncRNA。运用分层聚类分析,对所有的lncRNA进行分类。最后从中选择10个lncRNA用RT-PCR进行定量验证。结果有1359个lncRNA表达水平出现显著性差异,差异倍数〉2倍。其中629个显著上调,占46.2%,其中125个表达5倍以上;730个显著下调,占53.7%,其中110个表达5倍以上。聚类分析(1)基因间lncRNA有11706条,其中与已知编码基因相距300 kb的lncRNA共有352条。(2)增强子型lncRNA共有1802条,其中与已知编码基因相距300 kb的lncRNA共有42条。(3)HOX基因簇共有101条。RT-PCR结果有8条lncRNA表达趋势与基因芯片结果一致。对癌组和癌旁组进行检验,有6条差异有统计学意义(P0.05)。结论与癌旁组织比较,lncRNA肝细胞癌组织中的表达水平明显改变,可能与肝细胞癌的发生发展有关。     

不同移植策略治疗成人急性淋巴细胞白血病的初步观察

目的:对于急性淋巴细胞白血病尤其是Ph 者的造血干细胞移植,为了减少移植后复发,移植时机、移植方案以及移植后的过继免疫治疗至关重要.实验拟观察清髓性与非清髓性移植后供者淋巴细胞输注以及非清髓性移植后采用低剂量环孢素A的效果.方法:选择1998-12/2007-05广州市第一人民医院血液科进行异基因造血干细胞移植的5例成人急性淋巴细胞白血病患者.患者对治疗知情同意,并经医院伦理委员会批准.1例采用传统的白消胺联合环磷酰胺方案做清髓性预处理;4例采用非清髓性造血干细胞移植,其中1例采用以抗胸腺细胞球蛋白为基础减低白消胺联合环磷酰胺强度的预处理,移植后行供者淋巴细胞输注,3例以氟达拉滨为基础的非清髓性移植,采用低剂量环孢素A治疗.移植物抗宿主病的预防均采用短程的甲氨蝶呤联合环孢素A.观察患者治疗后造血、嵌合状态、移植物抗宿主病、感染等移植相关的并发症.结果:所有患者均获得供者细胞的成功植入.①以抗胸腺细胞球蛋白为基础的非清髓性移植获得混合性嵌合体,进行8次淋巴细胞输注后逐渐形成完全供者嵌合体,并发肝脏和皮肤的急性移植物抗宿主病,无病生存.②以氟达拉滨为基础的非清髓性移植获得完全供者嵌合体,1例复发无并发移植物抗宿主病,2例消除BCR/ABL融合基因阳性细胞并发急、慢性移植物抗宿主病.③清髓性移植1例复发、并发急、慢性移植物抗宿主病.结论:①传统的预处理、以抗胸腺细胞球蛋白或者氟达拉滨为基础的非清髓性预处理移植治疗成人急性白血病均可获得供者细胞的成功植入,非清髓性移植后的过继免疫治疗均获得了移植物抗白血病效应.②3种移植策略的疗效、并发症有待进一步观察.