吐根碱结合PARP-1逆转肝癌细胞HepG2/DDP耐药的作用研究

目的 探讨吐根碱逆转耐药肝癌耐药细胞HepG2/DDP的耐药性及机制。方法 采用顺铂(DDP)大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法构建肝癌耐药细胞株HepG2/DDP;采用反向虚拟筛选、分子对接、表面离子体共振实验和免疫印迹实验寻找吐根碱逆转耐药的靶标；转染实验验证吐根碱作用靶标；细胞毒实验检测吐根碱联合DDP对HepG2/DDP细胞增殖的抑制作用；流式细胞实验验证吐根碱的增敏作用；免疫印迹实验分析凋亡相关蛋白Bcl2、BAX及Cleaved-caspase-3的表达。结果 吐根碱能够增强DDP对HEPG2/DDP细胞的敏感性，使HEPG2/DDP对DDP的耐药指数(RI)由3.69降低到0.93;反向虚拟筛选、分子对接、表面离子体共振实验揭示吐根碱和PARP-1有良好的结合作用；免疫印迹实验显示吐根碱在细胞内显著抑制PARP-1活性；siRNA干扰实验显示HepG2/DDP细胞中PARP-1表达抑制后吐根碱增敏DDP细胞毒性的作用基本消失；流式细胞实验显示吐根碱能够增强DDP对HepG2/DDP细胞的促凋亡作用。结论 吐根碱能够增强HepG2/DDP细胞对DDP的敏感性，其作用机制可能与...     

卵圆细胞恶性转化相关差异性甲基化基因的筛选及验证

目的通过对卵圆细胞恶性转化相关差异性甲基化基因的筛选及验证,初步探索卵圆细胞发生恶性转化的表观遗传学调控机制。方法利用简化甲基化测序(Reduced representation bisulfite sequencing,RRBS)对转染肝细胞癌基因 HBV X(HBX)发生恶性转化的卵圆细胞(HBX?LE6)与正常大鼠肝卵圆细胞(LE6)进行甲基化测序,获得差异性甲基化区域(Differen? tially methylated region,DMR)与相关差异性甲基化基因(Differentially methylated gene,DMG),通过实时定量聚合酶链反应(Real?time qPCR)、蛋白质印迹法(Western Blot)、甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction, MSP)进行检测,验证甲基化对 DMG表达的调控作用。结果共筛选相关 DMR 1 434个,其中高甲基化 DMR 623个(位于启动子 128个);低甲基化 DMR 811个(位于启动子 216个)DMG共 1 987个。挑选启动子均存在高甲基化 DMR的相关基因如泛素特异性蛋白酶 18基因(USP18)、有丝分裂原活化蛋白激,酶激酶激酶 6(MAP3K6)、 SWI/SNF染色质重塑复合物(SMARCB1)、表     

青年人原发性肝癌24例诊疗分析

目的: 探讨青年原发性肝癌(PLC)的临床诊疗特点。方法: 选择PLC患者80例,随机分为青年肝癌组(年龄<40岁)24例,非青年肝癌组(年龄≥ 40岁)56例,比较分析2组的临床症状、肝脏功能、病理类型、术后并发症发生率等。结果: 青年组缺乏特异性临床表现的比例较非青年组高(P<0.05~P<0.01),青年组胆管细胞癌比例较非青年组少(P<0.05)。青年组肝脏功能较老年组好(P<0.01),术后并发症发生率较非青年组低(P<0.05)。结论: 青年人肝癌起病隐匿,早期诊断率低,手术耐受性高,治疗应尽量采用以根治性肝切除为主的综合治疗,术后并发症发生率低。     

奥曲肽治疗急性肠梗阻临床疗效分析

目的:探讨奥曲肽对急性肠梗阻的治疗作用。方法:将急性肠梗阻患者66例随机分为治疗组(32例)和对照组(34例),均常规采用禁食、胃肠减压、灌肠、补液、预防感染、营养支持等治疗方法,其中治疗组加用奥曲肽0.1mg,皮下注射,Q8h,直到梗阻解除,观察两组患者症状体征缓解情况的时间、胃肠减压量、恢复自主排气时间及治疗的有效率。结果:治疗组和对照组症状缓解时间分别为(12.1±3.4)h和(34.3±4.1)h,P<0.01;24h胃肠减压量分别为(357±73)ml和(890±95)ml,P<0.01;恢复自主排气时间分别为(32.5±7.0)h和(58.5±6.2)h,P<0.01;治疗有效率分别为84.4%和67.6%,P>0.05。结论:急性肠梗阻常规治疗中加用奥曲肽可有效缓解患者临床症状,促进肠道功能恢复。     

耐药蛋白差异性表达与肿瘤个体化化学治疗关系的研究进展

肿瘤细胞多药耐药的产生是导致肿瘤化疗失败的主要原因。耐药蛋白在不同个体肿瘤组织中的表达具有差异性。耐药蛋白表达特征是判断恶性肿瘤化学治疗敏感性的一个极重要的指标。研究并检测这种差异性表达，选择合理的个性化治疗方案，对提高肿瘤化学治疗成功率具有重要临床意义。     

腹腔镜下连续缝合法在治疗胆总管结石中的手术效果及安全性分析

目的对胆总管结石患者行腹腔镜胆总管探查术(Laparoscopic Common Bile Duct Exploration,LCBDE)治疗的病例进行回顾性分析,比较LCBDE术中应用连续缝合法与间断缝合法缝合胆总管的手术效果与安全性。方法选取2015年1月~2018年1月我科收治的胆总管结石患者56例,分为2组,其中行LCBDE术应用连续缝合法缝合胆总管为连续缝合组(n=32),行LCBDE术应用间断缝合法缝合胆总管为间断缝合组(n=24);两组手术时间、术中出血量、术后胆漏、胆总管狭窄、住院天数等方面进行比较。结果与间断缝合组比较,连续缝合法使手术时间缩短,差异有统计学意义(P0.05)。术后胆漏、黄疸、胆总管狭窄等手术并发症无显著性差异(P0.05)。术中出血量、术后住院天数、引流管拔除天数等无显著性差异(P0.05)。结论在LCBDE术中应用连续缝合法或间断缝合法缝合胆总管,安全性无显著性差异,连续缝合法可以缩短手术时间,提高手术效率,值得推广。     

乙型肝炎病毒X蛋白对卵圆细胞中Smad2、Smad3、Smad4基因表达的调控作用

目的 观察乙型肝炎病毒编码X蛋白(HBX)对肝脏卵圆细胞中转化生长因子-β(TGF-β)/Smad中核心元件Smad2、Smad3、Smad4表达的调控作用。方法 稳定转染HBX基因的大鼠卵圆细胞株HBX-EGFP-LE/6作为实验组,转染绿色荧光蛋白标记空载体的大鼠卵圆细胞株EGFP-LE/6,大鼠卵圆细胞株LE/6作为对照组。Real-time聚合酶链反应(PCR)与Western blot分别检测3种细胞株中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA和蛋白表达。结果 对照组Smad3的mRNA表达量分别是实验组的(4.56±0.79)倍和(4.14±0.38)倍,差异有统计学意义(P＜0.01)。对照组Smad4的mRNA表达量分别是实验组的(1.41±0.04)倍和(1.63±0.43)倍,差异有统计学意义(P＜0.01)。实验组Smad3蛋白表达水平有一定程度降低。结论 HBX可以在卵圆细胞中影响TGF-β/Smad信号通路中的核心元件Smad3的转录及蛋白合成,对Smad4的转录有一定影响。     

LC联合LTCBDE在老年急性胰腺炎合并胆囊结石伴胆总管结石患者中的应用及安全性研究

目的对老年急性胰腺炎合并胆囊结石伴胆总管结石早期行腹腔镜胆囊切除联合腹腔镜胆总管探查术(Laparoscopic Cholecystectomy plus Laparoscopic Transcystic Common Bile Duct Exploration,LC+LCBDE)的病例进行回顾性分析,并评估其安全性。方法选取2012年10月~2016年10月我科收治的急性水肿型胰腺炎合并胆囊结石伴胆总管结石患者443例,分为四组,其中年龄大于60岁,行LC+LTCBDE患者为老年LTCBDE组(n=101),行LC+LTDBDE患者为老年LTDBDE组(n=98);年龄小于60岁,行LC+LTCBDE患者为中青年LTCBDE组(n=132),行LC+LTDBDE患者为中青年LTCBDE组(n=112)。对各组手术中情况、手术并发症、术后恢复情况等方面进行比较。结果与老年LTDBDE组(3.14±0.33h)和中青年LTDBDE组(3.11±0.34h)比较,老年LTCBDE组(2.24±0.23h)和中青年LTCBDE组(2.12±0.40h)手术时间明显缩短(P0.05);术中出血量(△Hb)及中转开腹率差异均无统计学意义(P0.05)。与中青年LTCBDE组(1/132)、中青年LTDBDE组(2/112)比较,老年LTCBDE组(8/155)、老年LTCBDE组(6/98)肺部感染高(P0.05),差异有统计学意义(P0.05)。其余并发症胆漏、胆总管损伤、切口感染、肠梗阻四组间两两比较,均无显著性差异(P0.05)。与中青年LTCBDE组(3.24±0.11 d)与中青年LTDBDE组(3.54±0.20d)比较,老年LTCBDE组(6.72±0.44d)、老年LTDBDE组(7.45±0.20d)住院天数延长,差异有统计学意义(PO.05)。胰腺炎复发率、残余结石发生率差异均无统计学意义(P0.05)。结论老年急性胰腺炎合并胆囊结石伴胆总管结石患者在胰腺炎控制后,即可选择早期施行LC+LTCBDE,并不影响手术安全性。经胆囊管路径探查胆总管优于其他术式,值得推广。