丹红注射液对低营养小鼠生理与生化指标的影响

摘要目的观察小剂量丹红注射液对低营养模型小鼠生理及生化指标的影响,并评价其安全性。检验该体系在中药注射剂安全性再评价中的实用价值。方法选取生长期ICR小鼠32只,制备玉米低营养小鼠模型,分为正常对照组（给予0.9%氯化钠溶液）,以及丹红注射液小、中、大3个剂量（0.2,0.4及0.6 mL）组,每组8只;连续腹腔给药7 d,于第8天取血样后处死,完整剖取9种脏器组织,检测相关生理、生化指标。采用损益指数 总积分（BDI GS）体系评价丹红注射液安全性。结果丹红注射液对主要脏器或组织损伤较轻,BDI值均＞0.85,GS值均＞9.0;不同剂量丹红注射液对脾脏及胰腺的BDI值均＞1.0,表现出良好的补益及健康效应,与正常对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。同时,表现出良好的降血糖效应。结论丹红注射液在小剂量下用药风险低,安全性良好。同时,低营养模型结合BDI GS体系可以作为临床中药注射剂安全性再评价的一种新方式。     

辐射导致长期骨髓抑制的研究进展

随着接受放疗患者生存期的延长,患者发生长期骨髓抑制的概率也大幅提高。长期骨髓抑制在临床中常被忽略,随着时间延长患者病情会逐渐加重,生活质量降低。许多长期骨髓抑制患者会形成再生障碍性贫血或者骨髓增生异常综合征,严重者可引发死亡。研究资料表明,活性氧和丝裂原活化蛋白激酶p38（P38MAPK）通路在辐射诱导长期骨髓抑制中占主要作用。笔者总结了辐射导致的长期骨髓抑制的相关研究,指出了今后的研究方向。     

中药功能性保健食品的功效安全评价及市场准入标准提升的设想

目的通过低营养亚健康小鼠模型及损益指数方式对市售中药保健食品参芪胶囊的功效及安全进行评价研究,建立起一种综合评价保健食品功效安全的新体系,并提出新市场准入标准的设想。方法用生长期健康ICR雄性小鼠,通过玉米低营养饲料和低、中、高3个剂量保健食品掺和饲料喂养12 d,解剖观察统计小鼠质量,9项脏器系数及其损益指数(BDI)、累计积分(GS)等指标,以及血清生化指标,系统评价参芪胶囊的实际功效及安全性。结果参芪胶囊在3个剂量均对机体主要脏器组织产生不同程度的补益功效,表现在3个剂量组均表现出良好的保健功效,多脏器的系数BDI1.0,对主要脏器组织无明显损害,累计GS9.0,综合净效应是有益的。结论市售参芪胶囊中药保健品种内在质量良好,功效及安全性有保障。该BDI-GS评价体系具有直观、具体、综合的特点。通过市场准入标准的提升,引入退出机制,使我国庞杂的中药保健品市场得到净化。通过保健食品安全评价程序的完善及加强市场检验监管力度,中药保健食品的总体功效及安全水平有望得到实质性提升。     

藿香正气合剂对γ射线照射小鼠的防护作用研究

目的 探讨藿香正气合剂对5 Gy γ射线照射诱导的小鼠辐射损伤的防护作用。 方法 将6~8周龄的健康无特定病原体级C57BL/6J雄性小鼠按随机区组法分为正常对照组（n=10）、γ射线照射组（n=15）和γ射线照射+藿香正气合剂组（n=15）。除正常对照组外,另2组小鼠给予5 Gy γ射线一次性全身照射后1小时内,γ射线照射+藿香正气合剂组小鼠给予200 μL藿香正气合剂灌胃,对照组和单纯照射组给予200 μL 饮用水灌胃。每天给药1次,连续给药10 d,每天记录小鼠的体重变化。10 d后对小鼠进行摘眼球取血测定血常规各项指标,脱颈处死小鼠并称各脏器重量。采用t检验对组间数据进行比较。 结果 γ射线照射的2组小鼠的体重低于正常对照组小鼠,在照射后第4、6、7、8、9和10天,γ射线照射+藿香正气合剂组小鼠的体重均高于γ射线照射组,且差异均有统计学意义（t=2.138~2.529,P=0.027~0.045）。γ射线照射+藿香正气合剂组小鼠的心脏、肝脏、脾脏和胸腺的脏器指数均高于γ射线照射组,且差异均有统计学意义（t=1.768、1.894、2.085、1.992,P= 0.022、 0.023、0.038、0.044）。γ射线照射+藿香正气合剂组与γ射线照射组小鼠的脾脏和胸腺重量的差异最大,且均有统计学意义（t=2.517、2.158,P=0.028、0.029）。3组小鼠血液中血红蛋白浓度、白细胞数量和血小板数量等多项血常规指标之间有差异,且均有统计学意义（t=2.262~3.916,P=0.000~0.005）。 结论 藿香正气合剂能减缓5 Gy γ射线照射诱导的小鼠体重降低和造血系统损伤,且有一定的辐射防护作用。     

辐射敏感性新基因UHRF1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建UHRF1的真核表达载体,并验证其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。方法采用RT-PCR方法,从乳腺癌细胞MCF-7的总cDNA中扩增出2.3kb的UHRF1基因的cDNA片段,经限制性内切酶KpnⅠ与XhoⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pcDNA3（＋）-UHRF1,利用限制性内切酶双酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;构建成功的重组质粒,经脂质体Lipofactamin2000介导转染MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆,以RT-PCR和Western blot检测UHRF1的mRNA和蛋白的表达。结果获得全长约为2.3kb的UHRF1基因片段;重组质粒经限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ酶切、电泳后显示2.3kb的UHRF1目的片段和5.4kb的pcDNA3载体片段,即UHRF1基因的cDNA已正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中;UHRF1转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后的RT-PCR和Western blot的结果显示：UHRF1的mRNA和蛋白水平均呈现高表达。结论成功构建UHRF1基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定基础。     

B细胞易位基因2过表达增加人乳腺癌细胞T-47D的放射敏感性的研究

目的研究B细胞易位基因2（BTG2）对人乳腺癌细胞T-47D放射敏感性的影响。方法应用脂质体转染的方法提高BTG2基因在人乳腺癌细胞T-47D的表达水平,利用克隆形成实验研究转染后细胞的放射敏感性改变,采用流式细胞术对细胞周期变化进行分析,应用Western blot方法研究相关蛋白的变化。结果克隆形成细胞生存实验结果表明,BTG2稳定高表达的T-47D/BTG2细胞在不同剂量X射线照射后,其存活分数明显低于X射线照射后的未转染的T-47D/Parental（母）细胞以及＂空质粒＂转染的对照T-47D/Neo细胞的存活分数。细胞平均致死剂量（D0）值在T-47D/Parental细胞、T-47D/Neo细胞和T-47D/BTG2细胞分别为1.84,1.86和1.57。流式细胞实验结果显示,与T-47D/母细胞和T-47D/Neo细胞相比,T-47D/BTG2细胞在受照射后出现明显的细胞凋亡sub-G1峰。另外,BTG2高表达上调了Bad和Bax促凋亡蛋白的表达水平和下调了协作性的致癌基因Cyclin D1的表达水平。结论增加BTG2基因的表达水平可以明显提高凋亡相关蛋白水平,增加放射治疗所诱导的细胞凋亡,从而提高人类乳腺癌细胞T-47D对电离辐射放射治疗的敏感性。BTG2可能是调节人类乳腺癌细胞放射治疗的有效靶点之一。     

抗增殖蛋白TOB1影响乳腺癌细胞MDA-MB-231体外转移的作用研究

目的研究抗增殖蛋白家族成员TOB1对乳腺癌细胞MDA-MB-231体外侵袭与转移的生物学作用与机制。方法采用脂质体介导的质粒转染和G418筛选培养法获得稳定高表达TOB1的高转移性乳腺癌细胞系MDA-MB-231。通过人工基底膜侵袭实验和划痕实验检测TOB1过表达对MDA-MB-231细胞体外侵袭能力和转移能力的影响。采用super array基因芯片法检测TOB1引起的肿瘤转移相关基因表达的变化。结果与对照组相比,外源性TOB1高水平表达使MDA-MB-231的体外侵袭能力显著降低（P〈0.05）,同时抑制MDA-MB-231的体外迁移能力;TOB1表达水平的增加引起MDA-MB-231细胞中肿瘤转移抑制基因BRMS1表达的明显增加,同时显著抑制肿瘤转移相关基因HSP90、FXYD5、RHOC、S100A4等的表达（均P〈0.05）。结论 TOB1过表达抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外侵袭、转移,涉及的机制可能与TOB1对多种重要的肿瘤转移相关基因的表达调控有关。     

茶叶对长寿相关基因CETP表达的影响

目的研究茶叶对人体正常皮肤成纤维细胞(GM细胞)中长寿相关基因胆固醇酯转运蛋白(CETP)编码基因表达的影响。方法采用逆转录PCR法和免疫印迹法分别检测GM细胞中CETP mRNA与蛋白的表达水平。结果高浓度(>2.5μg/μl)普洱茶叶水提取物能抑制GM细胞的生长且下调CETP mRNA表达,低浓度普洱茶叶水提取物(<2.5μg/μl)和绿茶中茶多酚(10μmol/L)能提高CETP mRNA与蛋白的表达,且呈现剂量和时间依赖性。结论 CETP基因可能是茶叶作用的靶点之一。     

褪黑素在辐射诱导的小鼠放射性肠损伤作用中的全基因体表达图谱分析

目的探讨褪黑素在小鼠放射性肠损伤作用中的全基因体表达图谱变化。方法对C57BL/6J雄性小鼠按10 mg/kg体重进行腹腔注射褪黑素, 1次/d, 连续5 d, 然后, 对小鼠腹部进行14 Gy γ射线照射。照射后3 d收集小鼠小肠组织, 进行DNA微阵列检测, 对小肠组织差异基因进行基因本体论(GO)注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。结果与对照组相比, 照射前给药组小鼠差异基因中上调基因584个, 下调基因538个。照射组和照射前给药组小鼠取交集的差异基因中, 照射前给药组特有的上调基因324个, 下调基因246个。这些差异基因的GO注释分析显示, 照射前给药组排名前15的显著富集的生物过程主要包括自噬体组装(GO:0000045)、自噬体组织(GO:1905037)和急性炎症反应调节(GO:0002673)。其中, ATG12、ATG16L2和AMBRA1基因参与自噬体组装和自噬体组织, C3、CPN1、CD55、CFP、CNR1、C1QA、C2和CREB3L3基因参与急性炎症反应调节。这些差异基因参与的KEGG通路分析显示, 照射前给药组排名前15的显著富集的通...