Bcl-2反义寡核苷酸增强小细胞肺癌细胞化疗敏感性研究

目的研究Bcl-2反义寡核苷酸是否能增强小细胞肺癌细胞NCI-H69对化疗药物的敏感性.方法将NCI-H69细胞培养传代,细胞共分4组,反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组,通过脂质体介导的方法将不同寡核苷酸导入细胞中,Western-Blot法检测Bcl-2蛋白的表达.不同浓度的顺铂与阿霉素作用于4组转染后的细胞,MTT法测定细胞存活分数.结果4组细胞中,与空白对照组相比较,反义寡核苷酸组的Bcl-2蛋白表达明显受到抑制,而正义寡核苷酸组和无义寡核苷酸组细胞的Bcl-2蛋白表达则与空白对照组差别不明显.细胞分别同顺铂与阿霉素作用后,反义寡核苷酸组细胞在各个浓度的存活分数均低于空白组,其差异在统计学上有显著性意义(P＜0.01),而转染正义链和无义链组与空白组比较其差异在统计学上无显著性意义.结论Bcl-2反义寡核苷酸能有效封闭Bcl-2基因的表达,增强小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性.     

bcl-2反义寡核苷酸对小细胞肺癌细胞NCI-H69放射敏感性的影响

目的研究bcl-2反义寡核苷酸对人小细胞肺癌细胞NCI-H69放射敏感性的影响。方法将NCI-H69细胞培养传代,然后将细胞分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组,通过脂质体将不同寡核苷酸导入细胞中,用Western-Blot法检测Bcl-2蛋白的表达。采用直线加速器分别以不同剂量（0、2、4、6、8、10 Gy）X线照射4组细胞。收集照射后的细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT法测定细胞存活分数。结果Western-Blot杂交显示反义寡核苷酸组无Bcl-2蛋白表达,相对正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组及空白对照组Bcl-2蛋白表达明显受到抑制（F=7.24-15.31,q=5.03-7.80,P〈0.01）。细胞经X线照射后,反义寡核苷酸组细胞凋亡率明显高于空白对照组,差异具有显著性（F=7.24-15.31,q=5.03-7.80,P〈0.01）;正义寡核苷酸组和无义寡核苷酸组与空白对照组相比无统计学差异。4组细胞接受辐射后,反义寡核苷酸组在未照射和照射不同剂量后的存活分数均低于空白对照组,差异有统计学意义（F=11.04-45.56,q=5.10-14.75,P〈0.01）,而正义寡核苷酸和无义寡核苷酸组与空白对照组比较则无统计学差异。结论bcl-2反义寡核苷酸能有效封闭bcl-2基因的表达,增强小细胞肺癌细胞NCI-H69对X线的敏感性。     

bcl-2反义寡核苷酸对小细胞肺癌细胞NCI-H69放射敏感性的影响

目的 研究bcl-2反义寡核苷酸对人小细胞肺癌细胞NCI-H69放射敏感性的影响.方法 将NCI-H69细胞培养传代,然后将细胞分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组,通过脂质体将不同寡核苷酸导入细胞中,用Western-Blot法检测Bcl-2蛋白的表达. 采用直线加速器分别以不同剂量(0、2、4、6、8、10 Gy)X线照射4组细胞.收集照射后的细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT法测定细胞存活分数.结果 Western-Blot杂交显示反义寡核苷酸组无Bcl-2蛋白表达,相对正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组及空白对照组Bcl-2蛋白表达明显受到抑制(F=7.24～15.31,q=5.03～7.80,P＜0.01).细胞经X线照射后,反义寡核苷酸组细胞凋亡率明显高于空白对照组,差异具有显著性(F=7.24～15.31,q=5.03～7.80,P＜0.01);正义寡核苷酸组和无义寡核苷酸组与空白对照组相比无统计学差异.4组细胞接受辐射后,反义寡核苷酸组在未照射和照射不同剂量后的存活分数均低于空白对照组,差异有统计学意义(F=11.04～45.56,q=5.10～14.75,P＜0.01),而正义寡核苷酸和无义寡核苷酸组与空白对照组比较则无统计学差异.结论 bcl-2反义寡核苷酸能有效封闭bcl-2基因的表达,增强小细胞肺癌细胞NCI-H69对X线的敏感性.     

肾癌病人TSGF和COX-2水平测定及其临床意义

目的探讨肿瘤特异性生长因子(TSGF)及环氧合酶2(COX-2)在肾癌病人血清及肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法经影像学及病理诊断为肾癌病人50例,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定其血清中TSGF水平,应用免疫组化法检测组织中COX-2表达水平。以肾结石6例、肾囊肿10例、正常健康因外伤行肾部分切除者4例共20例作为对照组。结果肾癌病人血清中TSGF水平及组织中COX-2的表达均较对照组高,差异有显著性(t=3.78,χ2=26.12,P<0.05)。肾癌病人血清TSGF水平与病人性别有关(r=0.282,P<0.05),肾癌组织COX-2表达与肿瘤大小呈正相关(r=0.382,P<0.05)。结论 TSGF及COX-2在肾癌临床诊断及预后判定中有参考价值,血清TSGF水平在女性肾癌病人的早期筛查中可能有一定意义。     

AFP血清浓度及肝癌组织中Cx43的表达与肝癌根治切除后早期复发和预后的关系

目的 研究Cx43、CD105、VEGF在不同血清AFP(α-fetoprotein)浓度的乙型肝炎病毒性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达的关系以及Cx43的表达和RO切除术后复发和预后的关系.方法 应用组织芯片技术和免疫组织化学PV-6000两步法检测234例HBV相关HCC组织标本Cx43和CD105、VEGF的表达,应用RT-PCR检测20例HBV相关HCC标本Cx43mRNA的表达,并分析在不同血清AFP浓度下与Cx43的表达与CD105、VEGF的表达的关联以及与HCC患者根治切除术后的复发和预后的关系. 结果 免疫组织化学法和RT-PCR均检测到Cx43在HCC组织中表达,AFP＜ 400 μg/L的HBV相关HCC组织中Kaplan-Meier分析显示Cx43阳性表达者其1年复发、无瘤生存和总体生存均显著低于阴性表达组(Log Rank P =0.001,0.026,0.000),Cox回归分析表明Cx43阳性表达是HCC早期复发和预后(Log Rank P=0.049、0.035)的独立影响因子,Cx43阳性表达者CD105、VEGF低表达(P=0.018、0.023),并与组织分化程度(P =0.002),病灶数(P =0.033)血管癌栓(P =0.029)有关.结论 Cx43的表达与CD105、VEGF的表达相关,在AFP＜400 μg/L的HBV相关HCC的患者中Cx43阴性表达预示早期复发和不良预后.     

肝母细胞瘤组织RECK及膜型基质金属蛋白酶-1与肿瘤转移抑制关系的探讨

目的 探讨RECK蛋白、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在肝母细胞瘤组织中的表达及其在肿瘤转移抑制中的作用.方法 采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法检测35例肝母细胞瘤组织和15例正常肝脏组织及10例肝脏良性肿瘤组织中RECK、MT1-MMP的表达情况.结果 肝母细胞瘤组织RECK的表达水平明显降低(28.6%),与肿瘤的浸润转移密切相关(P<0.05);MT1-MMP肝母细胞瘤组织中高表达(54.3%),并随着肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P<0.05);二者表达呈负相关(P<0.05).结论 RECK和MT1-MMP在肝母细胞瘤组织中的表达呈负相关;RECK和MT1-MMP在肝母细胞瘤的进展中起重要作用.     

海藻糖对低温保存胸骨中bcl-2和bax基因表达的影响（英文）

背景：研究已经证实海藻糖对低温保存中的胸骨具有保护作用,但作用途径尚不清楚。目的：观察海藻糖对低温保存胸骨bcl-2和bax基因表达的影响。方法：新鲜配置4组保存液：低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐＋二甲基亚砜组、低钾右旋糖酐＋海藻糖组、低钾右旋糖酐＋二甲基亚砜组＋海藻糖组。切取SD大鼠胸骨后立即分别放入含上述4种溶液的冻存管中低温保存。抽取新鲜大鼠胸骨组织和低温保存120d的4组标本,采用RT-PCR方法检测不同保存液保存的胸骨及新鲜胸骨bcl-2和bax基因mRNA表达量。结果与结论：低钾右旋糖酐＋海藻糖组bcl-2表达量高于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐＋二甲基亚砜组（P〈0.01）,但bax表达量低于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐＋二甲基亚砜组（P〈0.01）;低钾右旋糖酐＋二甲基亚砜组＋海藻糖组bcl-2表达量最高,bax表达量最低,基本接近新鲜骨组织（P〉0.05）。结果提示海藻糖可能通过增强bcl-2基因、抑制bax基因的表达保护低温保存中的胸骨细胞活性,其与二甲基亚砜合用保护作用更好。     

海藻糖对低温保存胸骨中bcl-2和bax基因表达的影响

背景:研究已经证实海藻糖对低温保存中的胸骨具有保护作用,但作用途径尚不清楚.目的:观察海藻糖对低温保存胸骨bcl-2和bax基因表达的影响.方法:新鲜配置4组保存液:低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组、低钾右旋糖酐+海藻糖组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组+海藻糖组.切取SD大鼠胸骨后立即分别放入含上述4 种溶液的冻存管中低温保存.抽取新鲜大鼠胸骨组织和低温保存120 d的4组标本,采用RT-PCR方法检测不同保存液保存的胸骨及新鲜胸骨bcl-2和bax基因mRNA表达量.结果与结论:低钾右旋糖酐+海藻糖组bcl-2表达量高于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组(P < 0.01),但bax表达量低于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组(P < 0.01);低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组+海藻糖组bcl-2表达量最高,bax表达量最低,基本接近新鲜骨组织(P > 0.05).结果提示海藻糖可能通过增强bcl-2基因、抑制bax基因的表达保护低温保存中的胸骨细胞活性,其与二甲基亚砜合用保护作用更好.     

曲妥珠单抗对HER-2高表达胃癌细胞珠抑制作用观察

目的:观察曲妥珠单抗对HER-2高表达人胃癌NCI-N87细胞株的抑制作用.方法:免疫组化法检测HER-2蛋白在NCI-N87细胞中的表达.荧光免疫杂交法(FISH)检测HER-2基因在NCI-N87细胞中的扩增情况.根据是否应用曲妥珠单抗分为对照组与药物组,其中药物组浓度分别为0.1、1、10和100 μg/mL,作用72 h后以CCK8法测定曲妥珠单抗对NCI-N87细胞的生长抑制作用.结果:免疫组化法检测显示,HER-2蛋白在NCI-N87细胞中的表达以细胞膜分布为主,呈棕褐色颗粒状,HER-2蛋白为可疑阳性表达(++).荧光免疫杂交法检测显示,NCI-N87细胞HER-2/CEP17＞2,存在HER-2基因扩增.CCK8实验显示,曲妥珠单抗浓度为0.1、1、10和100 μg/mL时细胞存活率分别为(84.17±1.70)％、(81.21±3.94)％、(83.65±2.48)％和(80.59±4.25)％,四组间比较差异无统计学意义,P＞0.05;与对照组(100％)相比,差异有统计学意义,P=0.000.结论:曲妥珠单抗对HER-2高表达人胃癌NCI-N87细胞具有一定的生长抑制作用;曲妥珠单抗浓度在0.1～100 μg/mL对NCI-N87细胞的抑制作用相似.     

肾癌病人TSGF和COX-2水平测定及其临床意义

目的探讨肿瘤特异性生长因子（TSGF）及环氧合酶2（COX-2）在肾癌病人血清及肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法经影像学及病理诊断为肾癌病人50例,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定其血清中TSGF水平,应用免疫组化法检测组织中COX-2表达水平。以肾结石6例、肾囊肿10例、正常健康因外伤行肾部分切除者4例共20例作为对照组。结果肾癌病人血清中TSGF水平及组织中COX-2的表达均较对照组高,差异有显著性（t=3.78,χ2=26.12,P〈0.05）。肾癌病人血清TSGF水平与病人性别有关（r=0.282,P〈0.05）,肾癌组织COX-2表达与肿瘤大小呈正相关（r=0.382,P〈0.05）。结论 TSGF及COX-2在肾癌临床诊断及预后判定中有参考价值,血清TSGF水平在女性肾癌病人的早期筛查中可能有一定意义。