预制备抗体-DNA偶联物的免疫聚合酶链反应检测HBsAg

目的探讨一种实用敏感的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测方法.方法利用亲和素作为桥梁连接生物素化DNA和抗体,形成抗体-亲和素-DNA偶联物.在抗原抗体特异性反应的基础上,聚合酶链反应(PCR)扩增抗体所连的DNA片段,通过检测DNA来判断相应抗原存在与否.结果免疫PCR检测敏感度为常规酶联免疫试剂盒的300倍.结论预制备抗体-DNA偶联物的免疫PCR是一种检测HBsAg的敏感方法.     

原发性肝癌中CDKN2/P16基因突变的研究

目的 阐明ＣＤＫＮ２／Ｐ１６基因突变与原发性肝癌发生的关系。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＰＣＲ产物直接银染测序技术，对３０例原发性肝癌组织中ＣＤＫＮ２／Ｐ１６基因第二外显子进行突变检测。结果 检出２例（２／３０）ＣＤＫＮ２基因突变，均是位于第１２４位密码子的错义突变。结论 ＣＤＫＮ２基因的突变虽不频发，但在原发性肝癌的发生中起了一定作用。     

乙肝转阴散配合软坚汤治疗肝炎后肝硬化４７例

共治疗慢性乙肝后肝硬化７８例,其中治疗组４７例用软坚汤煎剂冲服乙肝转阴散,对照组３１例用软坚汤煎剂送服大黄■虫丸。结果：治疗组一级疗效率５９．５７％（２８／４７）、ＨＢＶＭ及ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴率均高于对照组（Ｐ＜０．０５）。２组间肝功能及纤维化指标比较,ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＢｉｌ的复常率治疗组优于对照组,ＰＣⅢ、ＨＡ的复常率则对照组优于治疗组,但均无统计学意义。     

AT基因突变与食管癌及结肠癌的关系

目的 :探讨共济失调毛细血管扩张症 (AT)基因突变与食管癌及结肠癌发病的关系。方法 :运用PCR SSCP及DNA同位素测序等技术 ,对 17例食管癌和 15例结肠癌患者的AT基因第 41～ 5 1外显子进行突变检测。结果 :15例结肠癌标本的SSCP带型与正常对照组织无差异 ;17例食管癌标本中有 1例SSCP带型比正常对照组织多一条带 ,测序发现 ,该例标本在AT基因第 49外显子发生单碱基缺失。结论 :AT基因突变可能与某些类型的食管癌发病有关 ,但尚不能判断与结肠癌的相关性     

NaCl胁迫下黑果枸杞bHLH转录因子家族鉴定与生物信息学分析

目的基于不同浓度NaCl胁迫下黑果枸Lyciumruthenicum杞转录组测序结果,利用生物信息学方法对黑果枸杞bHLH转录因子家族成员进行鉴定。方法通过对NaCl胁迫下黑果枸杞根和叶的样品进行转录组测序,筛选出bHLH家族基因,利用生物信息学方法对筛选到的基因进行理化性质、保守结构域、基因结构、细胞定位及系统进化分析。结果黑果枸杞在NaCl胁迫下的转录组数据库中共筛选出89个bHLH转录因子家族基因;bHLH家族蛋白理化性质差异较大,71.90%的蛋白质呈弱酸性,蛋白属于亲水蛋白。黑果枸杞bHLH家族蛋白含有2个保守结构域,分别位于N端的碱性氨基酸区和C端的螺旋-环-螺旋区。亚细胞定位预测bHLH家族蛋白主要分布在细胞核内和细胞质中。进化分析显示,黑果枸杞中89个bHLH转录因子家族蛋白可分为20个亚族,其中第3亚族中包含的bHLH成员最多,为11个;第7、11、13、22亚族中的成员数量均为1个,其他亚族为2～9个。结论 NaCl胁迫下黑果枸杞bHLH转录因子家族有89个成员,bHLH家族蛋白大多数呈弱酸性,属亲水蛋白,可分为20个亚族。     

乙肝转阴散辨证治疗慢性乙型肝炎371例

用乙肝转阴散配合少量中药煎服辨证治疗慢性乙型肝炎３７１例，并设汤药组、成药组各１００例作为对照。结果乙肝转阴散的临床疗效、ＨＢＶＭ及ＰＣＲ－ＨＢＶ转阴率、ＴＴＴ、Ｇ、Ａ／Ｇ复常率均高于汤药组（Ｐ〈０．０５），若再辨证加用少量中药煎服，则疗效又有所提高。     

NDRG2通过抑制β-catenin表达和入核调控乳腺癌细胞增殖

背景与目的：乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一,肿瘤细胞的恶性增殖是造成患者死亡的重要原因。本研究利用具有相同遗传背景但不同增殖能力的乳腺癌细胞模型,研究N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)调控乳腺癌细胞增殖的作用及分子机制。方法：通过蛋白[质]印迹法(Western blot)检测MCF-7/LM-MCF-7细胞中NDRG2蛋白表达水平;构建NDRG2真核表达载体及siRNA干扰片段,通过转染上调或沉默NDRG2表达,流式细胞实验检测细胞增殖能力,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)表达,免疫荧光染色检测β-catenin细胞定位;共转染MCF-7细胞NDRG2 siRNA和pCMV-Tcfδ,流式细胞实验检测细胞增殖能力。结果：NDRG2的蛋白表达水平同乳腺癌细胞增殖能力负相关;在增殖的LM-MCF-7细胞中上调NDRG2表达,细胞增殖指数(proliferation index,PI)由47.18%下降至31.78%(P<0.001);在低增殖的MCF-7细胞中沉默NDRG2表达,PI由32.00%上升至52.59%(P<0.001);Western blot及免疫荧光结果显示,NDRG2可抑制β-catenin表达,并抑制其聚集入核;流式细胞检测结果显示,共转染siRNA和pCMV-Tcfδ的MCF-7细胞增殖能力未增强,进一步说明NDRG2是通过抑制β-catenin的转录调节作用抑制肿瘤细胞增殖。结论：在乳腺癌细胞中,NDRG2的表达水平下调,导致β-catenin聚集入核,并激活下游靶基因,促进乳腺癌细胞增殖。此分子机制对阐明乳腺癌细胞增殖调控机制具有重要意义。     

标本兼顾治疗肝硬化腹水

肝硬化腹水属中医的风、劳、臌、噎四大疑难症之一 ,治疗甚为棘手。根据全国名老中医、肝病专家、国际肝病研究协作交流中心 (ＩＲＥＣＬＤ)特聘学术委员李昌源教授的学术经验 ,肝硬化的病机在于肝脾肾损伤 ,气血水搏结。其治疗当标本兼顾 :腹水期先去其水 ,佐以行气活血 ;水退后当健脾补肾 ,佐以调肝理气。兹详述如下。1　肝硬化以水停为标 ,气滞血瘀为本肝硬化腹水成因不一 ,缠绵反复 ,变化多端 ,虚实错杂。就疾病整体而言 ,本虚而标实 ,本虚乃肝、脾、肾损伤 ,标实为气、血、水互结 ;就主证腹水而言 ,则又以水停为标 ,气滞血瘀为本。气滞…     

应用LCR技术检测氨基糖甙类抗生素致聋家系线粒体基因的突变

目的：研究线粒体 Ｄ Ｎ Ａ 突变与氨基糖甙类抗生素致聋（ Ａ Ａ Ｉ Ｄ） 的关系,建立相应的基因诊断方法。方法：应用连接酶链反应（ Ｌ Ｃ Ｒ） 对一个 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系的所有成员（ 共１１ 人） 及５６ 例听力正常对照个体的线粒体 Ｄ Ｎ Ａ（ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ） 突变进行研究。结果： Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系中检出７ 例突变个体,而５６ 例听力正常对照个体均无突变。结论：本研究建立了一种特异、简便、适合批量检测 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 中ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 点突变的方法,通过对一个 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 家系ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 点突变的研究,为探讨 Ａ Ａ Ｉ Ｄ 发病的分子遗传学机制提供科学依据。     

免疫-PCR技术进展

免疫-PCR结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高敏感性,是一种极为敏感的抗原检测技术,并适合于各种微量抗原的检测。免疫-PCR的关键在于形成抗体-标记DNA偶联物,作为桥梁连接免疫反应的特异性和PCR的高扩增能力。本文简述了免疫-PCR的基本流程以及抗体与标记DNA相偶联、PCR产物检测方法的进展。