腺病毒载体介导PDE5-shRNAs对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙的影响

目的:观察腺病毒载体介导的PDE5-shRNAs对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙的影响,探讨利用RNAi技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性。方法:利用构建的携带2条靶向PDE5 mRNA靶位点的shRNAs重组腺病毒转染大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,同时设立阴性对照组和空白对照组,于转染后24、48、72 h用钙离子荧光探针Fluo-3/AM进行染色,然后在激光扫描共聚焦显微镜下动态检测细胞内钙离子荧光强度,以平均荧光指数(FI)反映细胞内游离钙的相对水平。结果:实验组在转染PDE5-shRNAs重组腺病毒24、48、72 h后钙离子荧光指数分别为829.3±7.8、801.5±9.5、856.3±8.7,均明显低于阴性对照组的1106.3±10.8、1121.3±10.2、1058.5±12.1和空白对照组的1076.6±9.7、1133.4±11.2、1104.3±10.5,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腺病毒介导的靶向PDE5基因的shRNAs能够明显降低大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞内游离钙水平。     

靶向人PDE5A3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据。方法:成功构建携带3条针对人PDE5A3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:实验组rAd5-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论:3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。     

靶向人PDESA3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

目的：观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA（shRNA）对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷（cGMP）的影响,为应用RNA干扰（RNAi）技术治疗阴茎勃起功能障碍（ED）提供实验依据。方法：成功构建携带3条针对人PDESA3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒（rAd5-shRNA-PDE5A3）,并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果：实验组rA（15-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论：3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。     

CT对新生儿缺血缺氧性脑病的诊断价值探讨

目的 分析CT在新生儿缺血缺氧性脑病中的诊断价值.方法 选取72例新生儿缺血缺氧性脑病患儿临床资料,遵循随机原则,将患儿分为CT组、EEG组,各36例,分别采取电子算机断层扫描(CT)诊断方式、脑电图诊断(EEG)方式,最后分析2组患儿诊断结果.结果 CT组特异性为100.00％,明显高于EEG组的66.94％,差异具有统计学意义(P＜0.05).CT组颅内出血显示率为50.00％,明显高于EEG组的16.67％,差异具有统计学意义(P＜0.05).CT组患儿符合率、检出率分别为91.67％、100.00％,明显高于EEG组的77.78％、88.89％,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 新生儿缺血缺氧性脑病是新生儿窒息中最严重的并发症之一,在临床诊断中应用CT诊断,其符合率、检出率、特异性明显较高,值得临床推广.     

探讨转化生长因子β1、内皮型一氧化氮合酶在糖尿病性大鼠海绵体血管结构重构中的作用

目的探讨转化生长因子B1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide syntbase,eNOS）在糖尿病（diabetesmellitus,DM）性大鼠海绵体血管结构重构中的表达及其活性研究。方法52只成年雄性SI）大鼠,按随机数字分类法分配到4个DM组、4个对照组（NDM）。在4个DM组注射链脲佐菌素4d制造DM动物模型,造模成功后于第2、4、8、16周取大鼠阴茎处组织,免疫组化Envision法染色观察DM组和NDM组大鼠阴茎海绵体组织。用免疫组化定性及半定量检测TGF-β1、eNOS蛋白的表达。结果16周时,大鼠DM组血清中HbAlc值较NDM组有明显上调（P〈0．01）;注射APO后可观测到大鼠DM组较NDM组其阴茎勃起率及阴茎勃起次数明显减低（P〈0．01）;大鼠DM组eNOS值较NDM组明显下调（P〈0．01）。8周时,大鼠DM组较NDM组其阴茎海绵体局部TGF．B1表达水平明显升高（P〈0．01）,检测结果时间曲线具有上升趋势。DM组大鼠阴茎海绵体组织中TGF-β1蛋白与周龄呈正相关性（r=0．947,P〈0．01）;DM组大鼠阴茎海绵体组织eNOS与周龄呈负相关（r=-0．945,P〈0．01）。此外,TGF-β1与eNOS在不同周龄的表达呈负相关（r=-0．891,P〈0．01）。结论在控制血糖的前提下,采取干预措施影响TGF-β1的表达或拮抗其功能,有可能是治疗勃起功能障碍（erectile dysfunction,ED）的新途径。     

自贡地区精神病人群乙型肝炎病毒感染血清流行病学调查

对自贡地区精神病人群９９５人检测ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢＳ、抗－ＨＢＣ三项ＨＢＶ感染标志，阳性率分别是１７．１８％、１６．３８％、１９．４０％、ＨＢＶ总感染率为３９．３０／。ＨＢｓＡｇ阳性率随年龄增加而上升，２５岁年龄组为高峰，以后又随年龄增加而略有下降．ＨＢＶ感染率亦随年龄而变的，在２５－３５岁年龄组成高峰：抗ＨＢＳ阳性率在２０岁、３５岁两个年龄组较其它年龄组高，其整体人群阳性率明显低于其它人群。这些特点，可能由于精神疾病和抗精神病药物引起病人内分泌失调，免疫功能下降所致。在精神病防治中，同时要重视乙肝的防治。     

高场MR与CT在急性脑出血诊断中的应用价值

目的 比较高场MR与CT在急性脑出血诊断中的应用价值.方法 选取2018年1月至2021年2月医院收治的160例经手术病理检查证实的急性脑出血患者为研究对象,所有患者均接受高场MR与CT检查,分析两种检查方法诊断脑出血的影像特征(病灶部位、形态及信号特征等),比较两种检查方法对不同部位急性脑出血的检出率.结果 160例...     

PDE_5基因特异性siRNA改善糖尿病性勃起功能障碍大鼠勃起功能的研究

目的 探讨人鼠PDEs基因siRNA对糖尿病性勃起功能障碍(DM ED)大鼠PDE,基因表达的抑制作用及其对DMED大鼠勃起功能的影响.方法 构建可同时表达2条针对大鼠PDEs基因的shRNA重组腺病毒;50只雄性SD大鼠随机取10只作为正常对照.其余建立DM ED人鼠模型,随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,分别将重组腺病毒rAd-rPDEs-shRNA、腺病毒rAd-mock及生理盐水注射于阴茎海绵体.注射后第7天,电刺激盆神经测定各组大鼠阴茎海绵体内压(ICP)及平均周围动脉压(MAP),然后取海绵体组织通过RT-PCR和Western blot分别检测PDE5基因mRNA及蛋白的表达.结果 ICP/MAP实验组和正常对照组显著高于阴性对照组和窄白对照组(P＜0.05),实验组和正常对照组间无显著性差异(P＞0.05);RT-PCR和Western blot 分析,实验组大鼠PDE5基因mRNA和蛋白表达均显著低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05).结论 PDE5基因shRNA重组腺病毒转染可以改善DMED大鼠的勃起功能,为DMED治疗方法的探索提供了新的思路.