治疗药物监测实践及结果分析

目的分析治疗药物监测结果,评价其临床效果和意义.方法采用 HPLC 法测定5种药物的血药浓度,对监测结果进行分析、统计.结果治疗药物监测结果在有效治疗窗内的仅占56.7%.监测值在低、中、高血药浓度范围内出现临床症状、症状控制、中毒症状的比例分别为90.5%、94.1%、100%.结论治疗药物监测对临床个体化给药具有重要意义.     

TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗中的定位表达

目的 研究瞬时受体电位通道蛋白V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位观察.方法 选择10只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法观察TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力.结果 TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPV1的表达.结论 TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入TRPV1在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础.     

Glu、GABA对大鼠脚桥核神经元放电的影响

目的 观察左旋谷氨酸（L-Glutamic acid,Glu）和γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid,GABA）对大鼠脚桥核（pedunculopontine nucleus,PPN）神经元放电的影响.方法 采用7管玻璃微电极在细胞外单位记录及微电泳方法观察微电泳Glu、GABA对PPN神经元放电的影响.结果 Glu（5～30 nA）使88.89%（72/81）的PPN神经元放电增加,8.64%（7/81）无反应,2.47%（2/81）放电减少;GABA（10～60 nA）使97.67%（42/43）的PPN神经元放电减少,2.33%（1/43）无反应.结论 Glu和GABA分别兴奋和抑制PPN神经元,并有紧张性作用.     

α-硫辛酸对小鼠耳蜗带状突触的辐射保护作用

目的 观察电离辐射对小鼠耳蜗带状突触损伤情况,并探讨α-硫辛酸（LA）对其的保护作用。方法 随机区组法将小鼠分为健康对照组、照射3 d组、照射3 d+LA组、照射14 d组和照射14 d+LA组,每组10只。各照射组使用辐照仪进行16 Gy X射线照射;照射+LA组,照射后给予LA每日1次;健康对照组给予等量生理盐水。所有小鼠在照射和处死前行听性脑干反应（ABR）测试。免疫荧光标记蛋白ctBP2,观察带状突触数量变化。Western blot对蛋白otoferlin、AP-2表达水平进行半定量分析。结果 与健康对照组相比,照射组ABR阈值显著增高（P<0.05）,且照射14 d组最高（P<0.05）;照射+LA组阈值则明显降低（P<0.05）;照射3 d组和照射14 d组,12、24 kHz分别与8 kHz阈移比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;32与8 kHz阈移比较显著增高（t=-2.38、-5.48,P<0.05）。各组带状突触数量,照射组较健康对照组明显减少（P<0.05）,且照射14 d组最少（P<0.05）;照射+LA组则明显增多（P<0.05）。AP-2和otoferlin蛋白水平,照射组较健康对照组明显减低（P<0.05）,且照射后14 d组更低（P<0.05）;照射+LA组则明显升高（P<0.05）。结论 LA对耳蜗内毛细胞带状突触的损伤具有保护作用。     

六味地黄丸在胰岛素抵抗的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤中的作用

目的研究六味地黄丸(LWDHP)含药学清在胰岛素抵抗(IR)的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激(OS)损伤中的作用。方法将培养的HUVEC分组,采用软脂酸(PA)诱导细胞损伤形成IR状态,然后采用DCFH-DA荧光探针法检测内皮细胞裂解液中活性氧(ROS)含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养基中非(不)对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度,RT-PCR及Western印迹检测细胞内二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)2 mRNA和蛋白的表达。结果模型组的ADMA浓度和ROS水平明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P0. 01)。5%和10%LWDHP含药血清能显著降低ADMA浓度和ROS含量,与模型组比较差异有统计学意义(P0. 01)。同时,PA组细胞内DDAH2 mRNA和蛋白的表达量显著降低(P0. 01),5%LWDHP含药血清组细胞内DDAH2 mRNA表达量明显升高(P0. 01)。结论 LWDHP可以通过抗氧化保护作用,一定程度上调节ROS-DDAH2-ADMA的表达,抑制OS,改善IR。     

熊果酸对顺铂致毒小鼠耳蜗瞬时感受器电位香草酸受体1表达的影响

目的：研究熊果酸（ursolic acid ,UA）对顺铂（cisplatin ,CDDP）致毒小鼠耳蜗瞬时感受器电位香草酸受体1（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）表达的影响。方法60只健康BALB／c小鼠随机分成对照组（腹腔注射等量生理盐水）、UA组（腹腔注射熊果酸80 mg／kg）、CDDP组（腹腔注射CDDP 4．5 mg／kg）和CDDP＋UA组（一侧腹腔注CDDP 4．5 mg／kg ,同时对侧腹腔注射熊果酸80 mg／kg）,每组15只。各组动物均连续腹腔注射给药5天,每天1次,给药前及停药后24 h行ABR检测,然后应用免疫组织化学染色、显微图像分析及蛋白质印迹技术观察小鼠耳蜗中TRPV1的表达。结果 CDDP组小鼠耳蜗TRPV1表达和ABR阈移均较对照组明显增加（P＜0．05）,UA＋CDDP组小鼠ABR阈移及TRPV1表达较CDDP组明显降低（P＜0．05）,且TRPV1表达变化与ABR阈移改变高度相关（｜r｜＞0．7,P＜0．05）。结论 UA可抑制CDDP所致TRPV1的高表达,有效降低CD_DP的耳毒性,改善听功能。     

抗霉素产生菌的诱变育种及发酵研究

抗霉素产生菌Streptomyces sp.FIM-04114,经紫外-氯化锂复合处理,筛选得到一株高产菌No.1-095,其抗霉素摇瓶发酵效价为170mg/L,且遗传稳定性良好.经发酵过程工艺优化,菌株N0.1-095摇瓶发酵效价达220mg/L,较出发菌株FIM-04114提高了63.0%.在50L自动发酵罐上发酵,抗霉素效价为206mg/L.     

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用

目的建立新生昆明小鼠离体顺铂耳毒性模型,研究顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤及凋亡作用。方法分离生后3d的昆明小鼠耳蜗基底膜,在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度顺铂对小鼠耳蜗毛细胞的损伤,同时应用Hoechst 33258染色技术检测耳蜗毛细胞的凋亡。结果不同浓度顺铂均可使小鼠耳蜗毛细胞发生凋亡的形态学变化。顺铂浓度为4mg·L-1时,耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。随着顺铂浓度的增高(8～64mg·L-1),耳蜗毛细胞缺失率和凋亡率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.01)。结论应用新生昆明小鼠能建立可靠的离体顺铂耳毒性模型;顺铂可导致耳蜗毛细胞凋亡,提示凋亡可能是顺铂耳毒性机制之一。     

氯膦酸二钠脂质体改善高血压小鼠血管内皮细胞功能及心肌肥厚

目的探讨巨噬细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)高血压引起内皮细胞功能障碍和心肌肥厚中的作用及机制。方法 C57BL/6小鼠随机分为正常+PBS组、正常+氯膦酸二钠脂质体(CL)组、AngⅡ+PBS组和AngⅡ+CL组。通过尾静脉注射PBS或CL,采用植入式胶囊渗透泵灌注AngⅡ。采用小鼠尾套法测量小鼠治疗前、治疗第7天、第14天收缩压;通过HE染色法观察小鼠心肌细胞肥厚程度;血管环张力实验检测血管内皮依赖性舒张功能;Western blot检测磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS)、p-ERK1/2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、生长转化因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白的变化。结果与正常组+PBS组比较,AngⅡ+PBS组动脉收缩压增加了44%(P0.05)、巨噬细胞在心脏组织中的浸润增加了54%(P0.05),心肌重量增加29%(P0.05),单个心肌细胞面积增加了48%(P0.05),血管舒张功能降低了35%(P0.05)。与AngⅡ+PBS组相比,AngⅡ+CL组动脉收缩压下降了25.28%(P0.05)、单个心肌细胞面积减小了38.83%(P0.05)、血管内皮舒张功能改善了12.63%(P0.05)。Western blot检测显示,AngⅡ+CL逆转了p-e NOS、p-ERK1/2、TNF-α、IL-1β、TGF-β1及纤维连接蛋白的表达(P0.05)。结论在AngⅡ高血压小鼠中氯膦酸二钠脂质体能改善血管内皮细胞功能,抑制心肌肥厚和重塑,其机制可能与降低心肌组织巨噬细胞浸润和巨噬细胞来源的炎症因子诱导的炎症以及增加p-e NOS有关。     

低频电刺激脚桥核对苍白球内侧部神经元自发放电的影响

【摘要】目的 通过观察低频电刺激帕金森病（Parkinsons’s disease ,PD）模型大鼠脚桥核（pedunculopontine nucleus ,PPN）对苍白球内侧部（GPi）神经元放电的影响,探讨低频电刺激PPN治疗PD的作用机制。 方法 将30只SD大鼠随机分为对照组和PD模型组各15只。大鼠脑右侧黒质致密部注入6-羟基多巴胺建立PD模型,采用细胞外单位记录方法,利用7管玻璃微电极记录观察低频电刺激、微电泳谷氨酸（Glu）及其受体阻断剂MK-801、γ-氨基丁酸（GABA）及其受体阻断剂荷包牡丹碱（BIC）对大鼠GPi神经元放电频率的影响。 结果 低频电刺激PPN,对照组及PD组大鼠GPi神经元反应均以抑制为主,且平均放电频率均较刺激前降低（P＜0.01）;微电泳Glu和BIC对神经元有兴奋作用,而微电泳MK-801和GABA对神经元有抑制作用。在微电泳BIC的兴奋作用的基础上低频电刺激PPN使神经元放电频率明显降低,而在微电泳MK-801抑制作用的基础上低频刺激PPN使神经元放电频率进一步降低。结论 低频电刺激PPN可抑制GPi神经元活动,可能是通过调节投射到GPi神经元的Glu和GABA神经通路实现的。