柯萨奇病毒-腺病毒受体在结肠癌组织中的表达及意义

目的：柯萨奇病毒-腺病毒受体（coxsackie and adenovirus receptor，CAR）介导腺病毒与靶细胞之间的粘附，是腺病毒转染靶细胞的限速因子。本文分析CAR在瘤旁上皮组织、结肠肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中的表达．为设计腺病毒载体基因治疗方案提供依据。方法：采用免疫组织化学方法检测62例结肠癌组织中CAR的表达．分析CAR表达与临床病理特征的关系。结果：与瘤旁上皮组织相比，肿瘤组织普遍存在CAR表达下调．但CAR在原发灶和淋巴结转移灶的表达水平无明显差异。CAR的表达水平与患者年龄及肿瘤大小相关。结论：结肠癌组织中存在CAR表达下调，提示在设计腺病毒载体基因治疗方案时应充分考虑CAR表达变化对疗效的影响.     

ⅢB期结肠癌组织中高迁移率族蛋白1的表达及其临床意义

目的探讨ⅢB期结肠癌组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达与淋巴细胞浸润的关系及其临床意义。方法收集1999年1月-2002年5月在中山大学肿瘤防治中心行手术切除的72例ⅢB期结肠癌标本,采用免疫组织化学染色及免疫双染技术分析HMGB1的表达和淋巴细胞浸润情况。收集2009年8-10月接受手术的10例Ⅲ期结肠癌患者的新鲜组织标本,采用流式细胞术分析组织中CD3+、CD45RO+T细胞的比例。分析HMGB1表达水平、表达部位与淋巴细胞浸润的关系及其与患者5年生存率的相关性。以72例ⅢB期结肠癌患者的5年生存率作为因变量,以各项临床特征、结肠癌组织HMGB1表达水平和表达部位、CD3+和CD45RO+T细胞的浸润密度等作为自变量,采用Cox比例风险回归模型筛选影响预后的独立危险因素。结果ⅢB期结肠癌组织间质中可见不同程度CD3+、CD45RO+T细胞浸润,CD3和CD45RO均表达于细胞膜。流式细胞术分析可见,72%的CD45RO+细胞同时表达CD3。ⅢB期结肠癌组织HMGB1的表达率为90.3%(65/72),其中81.5%(53/65)为核型表达(仅表达在细胞核),18.5%(12/65)为核质共表达。核型HMGB1表达者的CD45RO+T细胞浸润密度高于核质共表达者。ⅢB期结肠癌组织中CD45RO+T细胞的浸润密度是影响患者生存的独立危险因素;HMGB1表达强度和表达部位与患者预后无关,但随访24个月以后,HMGB1核型表达者的5年生存率明显高于HMGB1核质共表达者(P<0.001)。结论ⅢB期结肠癌患者出现HMGB1核质共表达时组织中淋巴细胞的浸润减少,患者长期生存率降低,提示HMGB1表达方式可作为反映局部晚期结肠癌患者预后的标志之一。     

RNAi沉默GALNT7基因对宫颈癌细胞恶性行为的影响

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7（polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 7．GALNT7）基因对宫颈癌细胞生长、侵袭及迁移能力的影响。方法利用RNA干扰技术沉默GALNT7（siR—GALNT7）,以非特异性序列（pSilencer2．1）转染细胞作为阴性对照,转染宫颈癌细胞Heh和C33A细胞,采用MTT实验、集落形成实验、Transwell侵袭实验以及细胞划痕实验来检测干扰GAL-NT7基因后宫颈癌细胞生长、侵袭以及转移能力的变化。结果Western Blot检测结果显示,转染siR—GALNT7质粒的实验组中两种宫颈癌细胞中GALNT7的蛋白表达水平明显降低,与转染siR—Ctrl的对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞生长活性分别下降了19％和22％,与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞的集落形成能力分别下降了56％和52％,与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞侵袭能力分别下降了48％和54％,与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa细胞迁移能力下降了约30％,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论RNA干扰在体外明显降低了宫颈癌细胞中GALNT7基因的表达,同时抑制了宫颈癌细胞的生长侵袭以及迁移能力．GALNT7基因有可能成为宫颈癌基因治疗的重要靶点。     

吲哚胺2,3-双加氧酶在结肠癌及其区域淋巴结中的表达与临床意义

目的：探讨吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）在结肠癌及其区域淋巴结中的表达及其临床意义.方法：通过免疫组织化学染色法检测IDO在110例结肠癌原发灶、癌旁正常结肠上皮组织和区域淋巴结的表达，分析IDO表达与患者临床病理特征的关系.结果：IDO在结肠癌原发灶的表达水平与癌旁正常结肠上皮组织相似，其表达强度与患者的年龄、性别、TNM分期和5年生存率无关.在无转移的区域淋巴结中，IDO主要表达于树突样细胞，区域淋巴结强表达IDO患者的5年生存率较低（31.8%）.结论：在结肠癌细胞转移到区域淋巴结前，区域淋巴结中IDO的表达已使其处于免疫抑制状态，从而为肿瘤转移创造了有利条件，而肿瘤细胞是否表达IDO并不影响肿瘤的转移能力.     

华南地区黑色素瘤癌基因突变谱分析

  目的  研究华南地区黑色素瘤的癌基因突变谱, 为黑色素瘤分子靶向治疗策略的优化提供理论依据。  方法  本研究收集中山大学肿瘤防治中心2000年3月至2009年4月黑色素瘤病理组织蜡块86例, 其中肢端黑色素瘤28例、黏膜黑色素瘤28例、非慢性阳光损伤型黑色素瘤30例, 采用Sequenom平台(OncoCarta Panel v1.0和MassARRAY体系)研究黑色素瘤癌基因的突变谱。  结果  有38.4%(33/86)的黑色素瘤病灶可见基因突变, 突变的基因包括BRAF (16.3%)、NRAS (10.5%)、KIT (5.8%)、EGFR (4.7%)、HRAS (2.3%)、KRAS (2.3%)、MET (2.3%)和PIK3CA (1.2%)。其中BRAF突变型患者与野生型相比发病年龄早[(45.7±15.3)岁vs.(55.9±12.7)岁, P=0.01], NRAS突变型患者与野生型相比溃疡表现率高(88.9% vs.48.1%, P=0.049)。  结论  本研究是对华南地区黑色素瘤癌基因突变谱的综合分析, 有利于进一步指导华南地区黑色素瘤的个体化治疗。      

中国黑色素瘤患者对大剂量干扰素辅助治疗的耐受性观察*

目的:观察中国人对4 周大剂量干扰素IFN α-2b（甘乐能）方案辅助治疗恶性黑色素瘤的耐受性。方法:回顾性分析2007年9 月至2009年5 月在本院诊治的29例高危恶性黑色素瘤（AJCC分期为Ⅱb～Ⅲc 期）患者,采用大剂量干扰素IFN α-2b 4周治疗方案,每天剂量为（2 200～3 375U 单位）,每周连续静脉输注5 天,休息2 天,共用4 周,观察不良反应以及早期进展情况。不良反应评定采用美国国家癌症研究所常用毒性评定标准NCI 2.0 版本。结果:全部29例患者接受大剂量干扰素治疗,患者平均接受干扰素的治疗强度为17.63U 单位/（m2·d）。 全部患者均接受毒性反应评价,2 例患者未完成4 周干扰素治疗,其中1 例因术后伤口愈合不良仅进行了1 周治疗,而另1 例因重度疲劳无法完成第4 周治疗;其余27例患者均完成4 周大剂量干扰素治疗。不良反应主要以一过性骨髓抑制为主,69%（20/29）曾经出现3～4 度中性粒细胞下降者,常规处理后迅速恢复,另有62%（18/29）患者出现1～2 度肝转氨酶升高,无肝毒性相关性死亡。26例患者接受随访超过3 个月,5 例在干扰素治疗开始3 个月内进展者,分别为局部复发1 例,区域淋巴结转移2 例,患肢皮下过路转移1 例,远处转移1 例。结论:中国人能耐受大剂量干扰素IFN α-2b 辅助治疗,但大剂量干扰素似乎不能有效抑制亚临床病灶。      

天津6 085名健康成人静脉血细胞分析的参考区间调查

目的:调研天津地区健康成人静脉血细胞的参考区间,为建立可行、实用的血细胞参考区间提供数据支撑。方法:研究对象为在天津医科大学总医院健康管理中心进行体检的成年人,参照CLSI C28-A3文件的标准,排除血液病、甲状腺疾病和肾病等可能会影响血细胞参数的疾病,于清晨采集空腹静脉血,用日本sysmex XN9000血细胞分析仪及配套试剂在2 h内进行血细胞分析（包括WBC、RBC、Hb、PLT、HCT等参数）,从采样到分析过程严格质量控制工作;采用统计软件包SAS 9.3对数据进行统计分析,实验结果与现行的国家行业标准及其它地区的参数进行比较。结果:本研究共筛选出6 085名健康体检者,年龄19~96岁,其中男2 853名,平均年龄44.2岁;女3 232名,平均年龄45.8岁。血细胞主要参数参考区间:WBC男（3.6~9.1）×109/L,女（3.3~8.8）×109/L,RBC男（3.6~5.9）×1012/L,女（3.9~5.2）×1012/L,PLT男（146~348）×109/L,女（158~371）×109/L,Hb男（139~176）g/L,女（117~153）g/L,HCT男（41~52）%,女（36~46）%;男性WBC、RBC、Hb和HCT均高于女性（P<0.05）,而PLT小于女性（P<0.05）,并且随着年龄增长,该5项参数均有下降趋势;本研究所得WBC较现用行业标准偏低,而RBC、Hb、PLT和HCT均较行业标准高。结论:本研究结果表明天津地区的血细胞分析参考区间与现行国家行业标准、其他地区有所差异,性别和年龄对血细胞参考区间有所影响,提示建立适合本地区的血细胞分析参考区间非常必要,并且注意性别和年龄组的差异。     

PYK2介导H460肺肿瘤细胞失巢凋亡抗性的机制

【目的】研究蛋白激酶PYK2对悬浮状态下的肺癌细胞H460失巢凋亡抗性的作用和PYK2的下游通路蛋白。【方法】RNA干扰实验采用逆转录病毒载体介导的稳定表达系统降低PYK2蛋白的表达;细胞悬浮培养实验用polyHEMA培养方法;用PARP 断裂带和DAPI荧光染色检测细胞凋亡情况;细胞侵袭能力用侵袭小室实验;磷酸化蛋白激酶水平用免疫印记实验检测。【结果】用RNA干扰沉默能够降低H460细胞中PYK2蛋白的表达。抑制PYK2的表达能够降低悬浮培养H460细胞增殖能力和促进细胞凋亡增加。此外,沉默PYK2的表达能使肿瘤细胞侵袭能力下降, 并降低磷酸化Paxillin和Src的水平,但不能降低磷酸化JNK、AKT和ERK的水平。【结论】 PYK2信号通路在H460肺癌细胞失巢凋亡抗性中起重要作用,Paxillin和Src可能是PYK2的下游通路蛋白。