不同放疗方式联合替莫唑胺治疗脑功能区恶性胶质瘤疗效观察

手术加放疗、化疗的综合疗法是脑胶质瘤的主要治疗手段,生长于脑重要区域和功能区的恶性胶质瘤手术治疗困难,不适当的手术反而导致致残率提高或早期复发.自2006年5月起,采用放射治疗同步口服替莫唑胺并后续单药辅助化疗治疗了53例脑重要区域和功能区恶性胶质瘤,根据放疗方式不同,分为2组,24例行立体定向放射治疗,29例行普通放疗,结果报告如下.     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白对肝癌细胞系Hep3B中侧群细胞的影响

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)分子对肝癌细胞系Hep3B细胞中侧群(SP)细胞的影响。方法雷帕霉素抑制mTOR,流式细胞术分析Hep3B细胞系中SP细胞的比例,软琼脂克隆形成实验检测Hep3B细胞中SP细胞和非侧群(non-SP)细胞成克隆能力。结果 Hep3B细胞中存在SP细胞,经过雷帕霉素处理后,SP比例明显降低。雷帕霉素能够明显降低SP细胞的软琼脂成克隆能力,对non-SP细胞的软琼脂成克隆能力影响不显著。结论 mTOR的活性对Hep3B细胞中SP细胞的维持起重要作用,抑制mTOR的活性使SP细胞比例明显减低,并能显著抑制SP细胞的软琼脂成克隆能力。     

淋巴结转移率对Ⅲ期胃癌术后辅助放疗疗效的评估作用

目的 探讨淋巴结转移率（MLR）对淋巴结清扫不超15枚的Ⅲ期胃癌患者（不含食管胃结合部癌）接受术后辅助放疗疗效的评估作用。方法 严格按照纳入与排除标准,从美国SEER癌症数据库中纳入2010—2016年确诊的淋巴结清扫不超15枚的Ⅲ期非食管胃结合部胃癌患者590例,其中,接受胃癌手术联合辅助化疗的患者291例（手术+化疗组）,接受胃癌手术联合辅助放化疗的患者299例（手术+放化疗组）,对两组患者采用1 ∶1倾向得分匹配（PSM）,回顾性分析MLR对淋巴结清扫不超15枚的Ⅲ期胃癌患者预后影响,并评估不同MLR患者选择术后辅助放疗的意义。结果 根据受试者工作特征曲线（ROC）的分析结果,将0.5定为MLR的截点值。在纳入研究的两组Ⅲ期胃癌患者中,手术+放化疗组中位生存期为23个月,1、3、5年的总生存（OS）率分别为77.1%、33.2%和22.8%。手术+化疗组中位生存期为21个月,1、3、5年的OS率分别为72.2%、33.6%和23.1%,但两组患者的OS差异无统计学意义（P > 0.05）。亚组分析发现,MLR≤0.5患者中手术+放化疗组与手术+化疗组的OS差异无统计学意义（P > 0.05）,而MLR>0.5患者中手术+放化疗组的OS明显优于手术+化疗组（χ²=8.542,P < 0.05）。PSM前多因素Cox回归分析显示,种族、T、N分期、MLR和辅助放疗是影响淋巴结清扫不超15枚的Ⅲ期胃癌患者OS的重要因素（Wald=8.544、7.547、10.925、18.047、10.715,P < 0.05）。两组Ⅲ期胃癌患者经PSM后分析发现,手术+放化疗组和手术+化疗组的OS差异无统计学意义（P > 0.05）,其中MLR≤0.5患者中手术+放化疗组与手术+化疗组的OS差异无统计学意义（P > 0.05）,MLR>0.5患者中手术+放化疗组的OS明显优于手术+化疗组（χ²=6.944,P < 0.05）。PSM后多因素Cox回归分析显示,种族、T、N分期、MLR和辅助放疗是影响淋巴结清扫不超15枚的Ⅲ期胃癌患者OS的重要因素（Wald=7.154、8.023、7.744、17.016、4.149,P < 0.05）。两组Ⅲ期胃癌患者PSM前后的预后分析结果相符。结论 MLR是淋巴结清扫不超15枚的Ⅲ期胃癌术后患者预后的重要影响因素。MLR≤0.5患者的OS未见从术后辅助放疗中获益,而MLR > 0.5患者则建议接受术后辅助放疗以期改善预后。     

ZEB1通过上调ATM表达调控胃癌细胞AGS的放射敏感性

目的 探究锌指结构E-box结合蛋白1（ZEB1）对胃癌细胞AGS放射敏感性的影响并探究其可能的作用机制。方法 通过不同剂量（0、2、4、6、8 Gy）X射线照射AGS细胞,蛋白质印迹法（Western blot）实验观测细胞中ZEB1的表达量;取对数生长期AGS细胞,将过表达ZEB1、ZEB1干扰表达质粒以及相应的对照质粒（pcDNA3.1）和阴性对照干扰质粒转染至AGS细胞中,分别记为过表达ZEB1组、沉默ZEB1组、对照组和阴性对照组,细胞克隆实验检测过表达和沉默ZEB1对AGS细胞存活率的影响;流式细胞术实验检测细胞的凋亡率;Western blot检测细胞损伤相关组蛋白H2A（H2AX）、磷酸化H2AX（γ-H2AX）以及毛细血管扩张突变基因（ATM）表达量。结果 ZEB1在AGS细胞中的表达对放射剂量具有依赖性（F=58.57,P<0.05）;过表达ZEB1能够提高AGS细胞的存活,抑制γ-H2AX表达（t=12.18,P<0.05）,并阻碍细胞的凋亡（t=7.27,P<0.05）,并随时间上调ATM表达量（F=165.70,P<0.05）;沉默ZEB1降低AGS细胞的存活,增加γ-H2AX表达（t=12.88,P<0.05）和细胞的凋亡（t=8.36,P<0.05）,随时间下调ATM表达量（F=44.80,P<0.05）。结论 ZEB1通过上调ATM表达调控胃癌AGS细胞放射敏感性。     

化疗联合术后放疗对宫颈小细胞神经内分泌癌生存的影响——基于SEER数据库的回顾性研究

目的 探讨化疗联合术后辅助放疗对早期和中晚期（Ⅰ~Ⅱ_A和Ⅱ_B~Ⅳ）宫颈小细胞神经内分泌癌（SCNEC）患者生存的影响及其预后因素分析。方法 首先利用SEER数据库搜索并筛选出2004—2016年接受化疗的SCNEC患者269例,然后根据治疗方案分为4组：化疗+术后放疗组、化疗+手术组、化疗+放疗组及单纯化疗组,采用Kaplan-Meier曲线分别比较Ⅰ~Ⅱ_A期和Ⅱ_B~Ⅳ期患者在4种治疗方案下的总生存（OS）情况,采用Log-rank检验及Cox回归分析评估不同临床病理因素对预后的影响。结果 对于Ⅰ~Ⅱ_A期患者,化疗+术后放疗组、化疗+手术组、化疗+放疗组及单纯化疗组的5年OS率分别为39.9%、71.7%、24.5%和0,与化疗+术后放疗组相比,化疗+手术组的预后更好（HR 0.403,95% CI：0.112~1.112,P=0.047）。对于Ⅱ_B~Ⅳ期患者,化疗+术后放疗组、化疗+手术组、化疗+放疗组及单纯化疗组的5年OS率分别为35.2%、24.3%、17.7%和0,其中化疗+手术组、化疗+放疗组及单纯化疗组（HR 1.726,95% CI：0.944~3.157;HR 1.605,95% CI：0.968~2.661;HR 5.632,95% CI：3.143~10.093,P<0.05）的预后差于化疗+术后放疗组。另外,与年龄≤60岁、肿瘤直径<4 cm的情况相比,年龄>60岁（HR 7.868,95% CI：3.032~20.415;HR 1.465,95% CI：1.006~2.435,P<0.05）、肿瘤直径≥4 cm（HR 2.576,95% CI：1.056~6.287;HR 1.965,95% CI：1.026~3.766,P<0.05）的Ⅰ~Ⅱ_A期和Ⅱ_B~Ⅳ期患者的预后均较差。结论 化疗联合术后辅助放疗未能改善早期（Ⅰ~Ⅱ_A）SCNEC患者的OS,但可显著改善中晚期（Ⅱ_B~Ⅳ）患者的OS,年龄、肿瘤大小和治疗方案是影响其预后的独立危险因素。     

不同放疗方式联合替莫唑胺治疗脑功能区恶性胶质瘤疗效观察

手术加放疗、化疗的综合疗法是脑胶质瘤的主要治疗手段,生长于脑重要区域和功能区的恶性胶质瘤手术治疗困难,不适当的手术反而导致致残率提高或早期复发.自2006年5月起,采用放射治疗同步口服替莫唑胺并后续单药辅助化疗治疗了53例脑重要区域和功能区恶性胶质瘤,根据放疗方式不同,分为2组,24例行立体定向放射治疗,29例行普通放疗,结果报告如下.     

苦参注射液对食管癌Ec-9706细胞作用机制的研究

目的探讨苦参对人类食管癌Ec．9706细胞凋亡的影响。方法将体外培养的人类食管癌Ec-9706细胞分为阴性对照组、苦参0．5mg／ml组,苦参1mg／ml组分别培养24、48、72h后收集细胞,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测抑制率,绘制生长曲线,吖啶橙染色观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫组织化学法测细胞周期蛋白CyclinD1的表达。结果苦参注射液对Ec．9706细胞有抑制作用,0．5、1mg／ml苦参24、48、72h对Ec-9706细胞抑制率为（38．64-2．74）％、（52．9±3．56）％、（81．3±1．79）％;（47．84-1．59）％、（69．44-2．36）％、（85．6±1．56）％。与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。吖啶橙染色发现细胞凋亡率增加,细胞核固缩。细胞周期结果显示G0／G1期细胞增多,S期细胞减少,CyclinD1蛋白表达量降低,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论苦参促进Ec-9706细胞凋亡,并阻滞于G0／G1期,其主要机制可能与CyclinD的低表达有关。     

沙利度胺抑制小鼠T淋巴瘤的实验研究

目的观察沙利度胺对小鼠T淋巴瘤的抑制作用。方法 32只BALB/C小鼠皮下接种鼠T淋巴瘤白血病细胞（EL-4细胞）建立模型,第2天随机分成4组,每组8只：①阴性对照组：小鼠8只,生理盐水灌胃25 mL/（kg.d）;②低剂量组：小鼠8只,沙利度胺灌胃50 mg/（kg.d）共14 d;③中剂量组：小鼠8只,沙利度胺灌胃200 mg/（kg.d）共14 d;④高剂量组：小鼠8只,沙利度胺灌胃400 mg/（kg.d）共14 d。每2日测肿瘤直径,计算体积,用药后15 d处死小鼠,分离肿瘤,计算抑瘤率。第2批小鼠同样方法处理,记录平均生存期。用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。RT-PCR法测TNF-αmRNA表达。结果各组瘤重较阴性对照组减小,抑瘤率分别为17.75%,36.73%,42.04%,差异有统计学意义（P〈0.05）。各组生存期与阴性对照组相比延长,差异有统计学意义（P〈0.05）。沙利度胺各组肿瘤坏死因子表达下调,凋亡细胞增多,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论沙利度胺能抑制小鼠T淋巴瘤生长,延长荷瘤小鼠平均生存期,而抑制TNF-α的表达,诱导凋亡可能是其机制之一。     

姜黄素增强人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1放射敏感性的研究

目的 研究姜黄素对人乳头瘤状甲状腺癌细胞TCP-1放射敏感性的影响,并探索姜黄素可能作用的信号通路,为甲状腺癌放射增敏剂的开发提供新的思路。方法 使用姜黄素和放射性碘处理人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1,CCK-8法检测细胞增殖,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,western blot检测p50、p65、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达变化。使用NF-κB信号通路抑制剂PDTC抑制NF-κB信号通路活性,检测细胞增殖、克隆形成和凋亡变化。结果 姜黄素和放射性碘处理人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1后,细胞增殖率下降,克隆形成减少,凋亡上升,凋亡抑制蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调,并呈浓度依赖性。这些结果表明姜黄素可增加TPC-1细胞的放射敏感性。碘放射后TPC-1细胞NF-κB通路活化,姜黄素可以抑制碘放射后TPC-1细胞NF-κB通路的激活。使用抑制剂抑制NF-κB通路的活性,细胞增殖下降,克隆形成减少,凋亡上升,放射敏感性升高。结论 姜黄素可能靶向NF-κB信号通路,通过抑制NF-κB信号通路活性调节甲状腺癌细胞的放射敏感性。     

人滋养层细胞表面抗原2的表达在卵巢癌侵袭转移中的作用及其机制

目的探讨人滋养层细胞表面抗原2(Trop2)在卵巢癌侵袭和转移中的作用及其分子机制。方法通过对Cancer Cell Line Encyclopedia(CCLE)和The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库进行数据挖掘,分析Trop2表达的临床意义。采用Western blot法检测卵巢癌细胞系A3O、A1780和SKOV3中Trop2蛋白的表达。采用Trop2-shRNA构建SKOV3-shRNA细胞模型,以定量逆转录聚合酶链反应检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞中SKOV3 mRNA的表达,以细胞计数盒8法检测SKOV3-shRNA组和SKOV3-NC组细胞的增殖,以流式细胞仪检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞的细胞周期和凋亡,以Transwell实验检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞的侵袭和迁移,以Western blot法检测SKOV3-shRNA和SKOV3-NC组细胞中AKT、p-AKT、β-catenin、caspase3、bcl-2、E-cadherin和vimentin蛋白的表达。结果 Trop2 mRNA在卵巢癌中高表达,其表达高低与肿瘤分期有关,也与患者预后有关。与A3O细胞比较,A1780和SKOV3细胞高表达Trop2蛋白(P<0.05)。SKOV3-NC组和SKOV3-shRNA组中Trop2 mRNA的相对表达量分别为1.18±0.24和0.42±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。SKOV3-NC组细胞的活力明显高于SKOV3-shRNA组(P<0.05)。SKOV3-NC和SKOV3-shRNA组G₀/G₁期细胞的比例分别为(38.67±4.22)%和(60.24±8.17)%,SKOV3-shRNA组细胞阻滞于G₀/G₁期(P<0.05)。SKOV3-shRNA组细胞的凋亡率为(26.32±1.81)%,明显高于SKOV3-NC组[(6.54±1.32)%,P<0.05]。SKOV3-shRNA组和SKOV3-NC组SKOV3细胞的迁移细胞数分别为(1 255.83±108.44)个/视野和(1 679.71±213.92)个/视野,侵袭细胞数分别为(242.49±52.09)个/视野和(473.54±73.11)个/视野,与SKOV3-NC组比较,SKOV3-shRNA组的迁移和侵袭细胞数均明显减少(均P<0.05)。SKOV3-shRNA细胞中p-AKT、bcl-2、vimentin、β-catenin表达下调,caspase3、E-cadherin表达上调,总AKT没有明显变化。结论 Trop2的表达与卵巢癌分期和预后有关,Trop2可通过激活AKT/β-catenin信号通路促进卵巢癌细胞增殖和转移,沉默Trop2的表达可以抑制卵巢癌进展。