慢性阻塞性肺病大鼠骨骼肌蛋白降解的变化

目的 探讨慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白降解代谢变化的规律.方法 利用熏香烟法制作COPD大鼠模型(COPD组),并设置对照组,每组20只.取伸趾长肌充氧离体孵育,采用高效液相-荧光法测量骨骼肌3-甲基组氨酸(3-MH)和酪氨酸(Tyr)的含量.结果 孵育后,COPD组大鼠Tyr及3-MH的降解率与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.001).结论 COPD大鼠不仅全身骨骼肌总蛋白降解增加,作为机体蛋白质储存库重要组成部分的骨骼肌肌蛋白消耗更为明显.     

用HPLC法和氨基酸分析仪测定多维氨基酸片中18种氨基酸

目的：RP-HPLC法和氨基酸分析仪（amino acid analyzer，AAA）法测定氨基酸含量的比较。方法：采用Agilent高效液相色谱系统和日立835-50氨基酸分析仪测定多维氨基酸片中18种氨基酸的含量。RP-HPLC法采用C18柱和邻苯二甲醛柱前衍生化进行，AAA法采用离子交换色谱柱和茚三酮柱后衍生化进行。结果：HPLC法和AAA法的变异系数分别〈1．5％和3％，最小检测量分别为3pmol和30pmol。HPLC法的测定值与AAA的测定值有相关性。两种测定方法的平均相对偏差为5．74％（0．24％～9．60％）。结论：两种方法都可用于测定氨基酸，但测定结果存在差异。     

HPLC法测定卵磷脂中6个成分的含量

目的:采用HPLC法测定卵磷脂中6个成分的含量。方法:采用LiChrosphere 100 DIOL色谱柱(250 mm×4mm,5μm),以正庚烷∶异丙醇(65∶114)为流动相A,正庚烷∶异丙醇∶水(31∶62∶12)为流动相B,梯度洗脱,流速0.8mL/min,用蒸发光散射检测器进行检测。结果:磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为1.69~33.76μg(r=0.997 9),0.33~6.57μg(r=0.999 6),棕榈酸甘油酯、胆固醇、鞘磷脂和溶血性磷脂酰胆碱的最低检测限分别为0.3、3、10和20 ng。结论:本方法操作简便、准确,可用于卵磷脂中各个成分的测定。     

右旋糖酐铁注射液峰位相对分子质量和重均相对分子质量的HPGPC测定

目的:比较右旋糖酐铁注射液峰位相对分子质量(M_p)和重均相对分子质量(M_w)的测定在质控中的应用。方法:采用凝胶液相色谱法,示差检测器。用 TSKG4000PW(300 mm×7.5 mm)凝胶柱测定右旋糖酐铁的 M_p,流动相是0.1%叠氮钠溶液,流速1.0 mL·min~(-1);用 TSKG3000PW(300 mm×7.5 mm)凝胶柱测定右旋糖酐的 M_w,流动相为0.71%硫酸钠溶液,流速0.5 mL·min~(-1)。采用 GPC 软件计算。结果:进口右旋糖酐铁注射液的 M_p 和 M_w 均符合标准要求,而国产右旋糖酐铁注射液除1个产品的 M_w 符合要求外,其余产品的 M_p 和 M_w 均不符合要求。结论:右旋糖酐铁络合物的 M_p 用于质量控制似乎更合理些。     

188Re(Ⅴ)-DMSA药盒制备及其质量评估

目的研制188Re(Ⅴ)-二巯基丁二酸(DMSA)标记配方并制备药盒,评价药盒的质量.方法酸性环境下,SnCl2·2H2O还原高价态ReO4-为Ⅴ价,并与DMSA反应,制备药盒,以高压液相色谱仪(HPLC)测定该药盒的标记率、标记物的体外稳定性、药盒的稳定性,并与99Tcm(Ⅴ)-DMSA在小鼠体内分布比较.结果药盒标记率为100%,标记物室温放置24 h后标记率＞97%;药盒置-20和4℃条件下3个月后,标记率＞95%;188Re(Ⅴ)-DMSA与99Tcm(Ⅴ)-DMSA在小鼠体内分布相似,在骨骼高浓聚,经肾脏排泄.结论188Re(Ⅴ)-DMSA药盒性能优良.     

HPLC法测定人尿糖比值

目的采用HPLC法测定尿液中乳果糖和甘露醇的比值(L/M),以评估健康受试者和手术患者的肠通透性。方法尿样经乙腈沉淀蛋白,离子交换树脂除离子,在Kromasile氨基柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上用示差检测器测定尿液中乳果糖和甘露醇的浓度。流动相为乙腈-水(70:30,V/V),流速1 mL·mln~(-1)。结果乳果糖和甘露醇的线性范围为0.1～1.25 g·L~(-1) (r_乳=0.999 2,r_甘=0.999 5),回收率分别为(94.8±2.5)%和(99.1±2.0)%(n=5),日内和日间RSD分别为2.07%～3.45%和4.05%～7.89%、3.44%～5.03%和4.80%～7.37%,最低检出限为0.05 g·L~(-1),健康受试者和手术患者6h的L/M值分别为(0.064±0.024)和(0.132±0.066)。结论该方法可用于评估手术患者的肠通透性改变,但灵敏度不高。     

慢性阻塞性肺病大鼠骨骼肌蛋白降解的变化

目的探讨慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠骨骼肌蛋白降解代谢变化的规律。方法利用熏香烟法制作COPD大鼠模型(COPD组),并设置对照组,每组20只。取伸趾长肌充氧离体孵育,采用高效液相-荧光法测量骨骼肌3-甲基组氨酸(3-MH)和酪氨酸(Tyr)的含量。结果孵育后,COPD组大鼠Tyr及3-MH的降解率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论COPD大鼠不仅全身骨骼肌总蛋白降解增加,作为机体蛋白质储存库重要组成部分的骨骼肌肌蛋白消耗更为明显。     

125I-γ-Ty-Folate的制备及其体外结合特性

目的　制备碘标记叶酸酪氨酸复合物 (12 5I γ Ty Folate)并进行体外结合特性的研究。 方法　叶酸(Folate)与酪氨酸甲酯通过EDC连接 ,水解后生成叶酸酪氨酸复合物 (γ Ty Folate)。12 5I γ Ty Folate采用Iodogen法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,纸层析检测。12 5I Ty Folate与叶酸结合蛋白 β 乳球蛋白 (β lactoglobulin)进行饱和结合实验、蛋白解离实验、竞争结合实验和动力学实验 ,与HeLa细胞进行了饱和实验。结果　12 5I γ Ty Folate的标记率为 5 0 %～ 6 0 % ,纯化后比活度为 5 4 3.8GBq/mmol,放化纯度大于 95 %。BMAX为 2 0 6 .4fmol/mL ,Kd 为3.82 7× 10 -10 mol/L。12 5I Ty Folate与叶酸结合蛋白 β lactoglobulin的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异性 ,12 5I γ Ty Folate与HeLa细胞的结合具有饱和性。 结论　12 5I γ Ty Folate可作为叶酸结合蛋白 β lactoglobulin的特异性配体 ,有望用于叶酸受体超表达肿瘤的筛选及靶向叶酸受体的抗肿瘤药物的筛选     

钇乙二胺四亚甲基膦酸的制备及在小鼠体内的分布

放射性药物用于骨癌病人的治疗已成为一种常规方法 ,钐乙二胺四亚甲基膦酸 (153Ｓｍ ＥＤＴＭＰ)是一种很有效的中晚期骨癌转移病人的镇痛药物 ,但由于153Ｓｍ必须由核反应堆生产而限制了其广泛应用。因90 Ｙ具有与153Ｓｍ相似的化学性质 ,而且有可以由90 Ｓｒ 90 Ｙ发生器直接淋洗而得到的优点。本实验研究钇乙二胺四亚甲基膦酸 (90 Ｙ ＥＤＴＭＰ)的制备方法、标记条件、分离纯化的方法 ,并观察其在小鼠体内的分布以确定90 Ｙ ＥＤＴＭＰ在小鼠体内的药物动力学分布。材料和方法仪器　ＳＮ - 6 82放射免疫γ计数器 (上海核辐光电仪器有限…     

HPLC法测定人尿液中的3-甲基组氨酸

目的采用HPLC法测定人尿液中3-甲基组氨酸(3-MH)的含量。方法尿样经乙腈沉淀蛋白和邻苯二甲醛柱前衍生化,60s内进样,以乙醇胺为内标,测定尿液中的3-MH的含量。结果3-MH的衍生物与尿液中其他杂质的衍生物完全分离。线性范围为10~400μmol·L~(-1)(r=0.9993),平均回收率为94.03%~97.13%(n=5),日内和日间RSD分别<7.80%和8.25%,最低检出浓度达5μmol·L~(-1)。结论该方法灵敏度高,可用于人尿液中3-MH含量的测定。