活性多酚化合物LM49对RAW264.7巨噬细胞极化的影响

目的初步探讨LM49(2,4'三羟基-5,2'-二溴二苯甲酮)对脂多糖(LPS)联合干扰素γ(IFN-γ)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)M1/M2极化的影响及其调控机制。方法四曱基偶氮唑蓝(MTT)法测定LM49对细胞活力的影响;流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Westem-blot法测定LM49(5,10,20μmol·L^-1)与LPS/INF-γ共同作用于RAW264.7细胞后,巨噬细胞亚型标志物的表达情况及对核因子(NF)-κB和JAK/STAT信号通路的影响。结果与LPS/INF-γ造模组相比,LM49显著抑制CD16/32^+细胞数及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL)4和肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA的表达,升高CD206^+细胞数及Arg-1和IL-10 mRNA的表达,且降低巨噬细胞M1/M2的比值;Westem-blot法验证LM49可显著降低TLR4、Myd88、NF-κB和STAT1蛋白的表达量,同时抑制p-JAK2和p-STATl蛋白磷酸化水平。结论LM49通过抑制TLR4-Myd88-NF-κB和JAK2-STAT1信号通路,抑制巨噬细胞Ml型极化及促进巨噬细胞M2型极化,调节巨噬细胞M1/M2的平衡。     

延边汉族和朝鲜族人群脂联素基因与2型糖尿病的关联性研究

目的 本研究分析延边汉族和朝鲜族人群中脂联素基因启动子的单核苷酸多态性(SNPs)与2型精尿病的关联.方法 共有97个延边个体被纳入到本研究中,包括55个汉族(13个正常人和42个2型糖尿病患者)和42个朝鲜族(16个正常人和26个2型糖尿病患者).检测项目包括体重指数(BMI)、空腹血糖(FPG)、总胆同醇(TC)和甘油三酯(TC).PCR和测序用于SNP的筛选.ANOVA和χ~2检验用于数据分析.结果 在延边朝鲜族中TG在2型糖尿病组大于正常组(P=0.033).FPG、TC和TC在延边朝鲜族2型糖尿病组大于延边汉族2型糖尿病组(P=0.038;P=0.037;P=0.047).在延边朝鲜族中-11426A-11377C的单体型频率在2型糖尿病组小于正常组(P=0.043).在延边汉族中BMI与-11426位点的基因型有关,基因型-11426G的BMI小于基因型-11426A(P=0.039).-11426位点从基因型的BMI在延边汉族大于延边朝鲜族(P=0.006).结论 1.延边汉族和朝鲜族之间在2型糖尿病组中FPG、TC和TG存在民族差异.2.在延边朝鲜族中单体型-11426A-11377C可能在2型糖尿病发展过程中被认为是一种保护因素.3.在延边汉族中SNP-11426A>G可能与肥胖有关.     

敲低潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)抑制SK-MEL-28恶性黑素瘤细胞的侵袭和迁移

目的检测潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)在恶性黑素瘤组织及细胞中的表达,及其对恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测95例恶性黑素瘤组织LTBP2的表达,并采用Spearman秩相关法分析LTBP2阳性率与黑素瘤临床病理指标的关系。采用实时定量PCR检测恶性黑素瘤组织和SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的mRNA水平, Western blot法检测SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的蛋白水平。利用小干扰RNA技术沉默SK-MEL-28细胞中LTBP2的表达, Transwell~(TM)实验检测敲低LTBP2后对SK-MEL-28细胞侵袭能力的影响,细胞划痕实验检测对细胞迁移的影响。结果恶性黑素瘤组织中LTBP2阳性率显著高于皮肤良性痣组织, LTBP2阳性率与恶性黑素瘤患者TNM分期、远处转移及淋巴结转移正相关。LTBP2在恶性黑素瘤SK-MEL-28细胞中的表达高于正常黑素HEMa-LP细胞。敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后, SK-MEL-28细胞侵袭和迁移能力降低。结论 LTBP2在皮肤恶性黑素瘤组织和细胞高表达,敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后,抑制SK-MEL-28细胞的侵袭及迁移。     

化合物Ib对阿霉素肾病大鼠干预效果的实验研究

目的了解血管紧张素受体拮抗剂化合物Ib对大鼠阿霉素肾病综合征病理及相关临床指标的干预作用及可能机制。方法采用阿霉素肾病(AN)模型,将70只大鼠分为阿霉素肾病组、化合物Ib(5 mg/kg,10 mg/kg,20 mg/kg)组和坎地沙坦酯治疗组,检测大鼠给予药物治疗后24 h尿蛋白排泄量、血清总蛋白、白蛋白及总胆固醇等血生化指标变化,并设正常对照组。结果化合物Ib(5 mg/kg,10 mg/kg,20 mg/kg)可明显降低造模大鼠24 h尿蛋白含量,增加血总蛋白及白蛋白含量,降低总胆固醇含量。结论化合物Ib对阿霉素肾病大鼠的肾脏具有保护效应,减轻肾损伤,降低蛋白尿。     

PARP1对黑素瘤细胞克隆形成的影响及其作用机制

目的:探究聚二磷酸腺苷核糖多聚酶1［poly (ADP-ribose) polymerase 1,PARP1］对黑素瘤细胞克隆形成的影响及可能的作用机制。方法:在黑素瘤A2058细胞系中利用小干扰RNA干涉PARP1表达水平,利用平板克隆形成实验观察干涉PARP1对黑素瘤细胞克隆形成的影响。提取PARP1干涉片段及对照片段转染细胞的总RNA进行全基因组表达谱芯片检测。Realtime RT-PCR对部分差异性基因进行验证。应用DAVID数据库对差异性基因进行GO及KEGG通路富集分析。Realtime RT-PCR对富集分析结果中可疑靶基因进行验证。结果:干涉PARP1表达可显著抑制黑素瘤细胞克隆形成。全基因组芯片结果显示干涉PARP1表达可引起128个基因表达上调,77个基因表达下调。通过Realtime RT-PCR对部分差异表达基因进行验证,结果表明与芯片筛选结果一致。GO和KEGG富集分析结果显示PARP1调控的差异性表达基因在生物学功能及参与的信号通路中存在部分交集,即MAPK信号通路及其正向调控机制。双特异性磷酸酶5（DUSP5）作为MAPK通路中的抑制分子,Realtime RT-PCR证实干涉PARP1可促进其表达水平升高。结论:干涉PARP1可能通过促进DUSP5表达从而抑制MAPK信号通路活性,进而发挥抑制黑素瘤细胞克隆形成的作用。     

TLRs的负性调节因子

20世纪90年代．美国著名的免疫学家Janeway提出了关于固有免疫系统病原体的模式识别理论。该理论认为。微生物病原体及其产物共有某些非特异性高度保守的分子结构,如脂多糖（LPS）,     

带状疱疹患者临床严重程度与淋巴细胞亚群和免疫球蛋白亚型的相关性

目的探讨带状疱疹患者临床症状严重程度与淋巴细胞以及免疫球蛋白相关指标的相关性,为带状疱疹的预后预测和诊治提供新的思路。方法选择2016年9月-2017年3月于皮肤科入院治疗的带状疱疹患者91例,根据临床症状分为轻中度组(41例)和重度组(50例),检测患者入院时各亚型T淋巴细胞百分比,对免疫球蛋白进行分型检测。结果重度患者CD4+/CD8+指标(2.46±0.83)高于轻中度患者(2.01±0.91)。重度带状疱疹患者Ig E含量(59.78±41.74)IU/m L低于轻中度患者(83.14±51.38)IU/m L,其余Ig A、Ig M、Ig G含量两组间差异均无统计学意义(P0.05)。重度患者的Ig G2含量(4.40±1.93)g/L高于轻中度患者(3.59±1.52)g/L。探索Ig G亚型间比值关系,轻中度患者的ln(Ig G1/Ig G2)指标(0.787±0.341)高于重度患者(0.641±0.307),同时ln(Ig G3/Ig G4)指标(-0.146±0.102)高于重度患者(-0.274±0.115)。结论带状疱疹患者临床症状严重程度与淋巴细胞以及免疫球蛋白抗体之间存在一定的关系,积极探索更加敏感的指标鉴别诊断带状疱疹以及预测其预后,具有十分重要的意义。     

日本毛连菜降血糖作用的实验研究

目的:研究日本毛连菜对正常小鼠及糖尿病模型小鼠血糖的影响.方法:尾静脉注射四氧嘧啶50 mg·kg-1,72 h后血糖高于11.1 mmo1·L-1为糖尿病模型.小鼠随机分为6组:正常组、模型组、消渴丸组(0.75 g·kg-1·d-1)、日本毛连菜低、中、高剂量组(1.5,3,6 g·kg-·d-1),ig给予药物14 d,测定空腹血糖,并进行了日本毛连菜急性毒性实验.结果:给药14 d后,日本毛连菜水提物低、中、高剂量组的血糖值分别达到(7.52±1.47),(7.33±2.99),(7.79±1.84) mmo1·L-1,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).急性毒性实验表明最大给药量为120 g·kg-1.结论:日本毛连菜对实验性高血糖小鼠有明显降糖作用,且毒性较小.     

CD24分子调节百日咳毒素诱导小鼠急性肝损伤的实验研究

目的:探讨CD24分子对百日咳毒素诱导急性肝损伤的影响及其可能的分子机制。方法:建立百日咳毒素诱导小鼠急性肝损伤的实验模型,观察anti-CD24中和抗体(200μg/mouse)和百日咳毒素(200 ng/mouse)联合注射组小鼠的生存率,H&E染色观察小鼠肝组织损伤,血清化学方法检测小鼠谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)等肝功能的生化指标,ELISA方法检测小鼠血清中TNFα-的含量,流式细胞仪分析anti-CD24中和抗体对百日咳毒素诱导小鼠kupffer细胞(存在于肝脏中的巨噬细胞,KC)凋亡率的影响。结果:一定剂量的anti-CD24中和抗体和百日咳毒素联合注射组(实验组)生存率显著低于对照组;H&E染色观察实验组小鼠肝出血程度明显高于对照组,实验组小鼠ALT、AST等肝功能生化指标显著高于对照组(P<0.05);ELISA检测实验组小鼠血清中TNFα-明显升高(P<0.05);流式细胞术分析表明:anti-CD24中和抗体导致小鼠kupffer细胞坏死百分数增加。结论:CD24分子抑制百日咳毒素诱导的小鼠急性肝损伤。     

日本毛连菜水洗部位降血糖、调节血脂作用研究

目的：探讨日本毛连菜水洗部位降血糖及调节血脂药理作用。方法：采用肾上腺素致小鼠生理性高血糖,以及四氧嘧啶致小鼠糖尿病等模型,观察日本毛连菜水洗部位对模型动物血糖、血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）的影响;采用比色法分析水洗部位的化学成分。结果：与模型组比较,日本毛连菜水洗部位低剂量显著降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖值（P〈0.05）,高剂量显著降低肾上腺素致糖尿病小鼠血糖值（P〈0.05）,给药组小鼠三酰甘油、低密度脂蛋白含量显著下降（P〈0.05）,高密度脂蛋白含量显著升高（P〈0.05）;水洗脱部位含多糖4 097 mg/100 g生药材,含黄酮913 mg/100 g生药材。结论：日本毛连菜水洗部位对糖尿病小鼠具有显著降血糖作用,同时可以调节糖尿病小鼠血脂水平。