不同类型栓子所致急性缺血大鼠脑组织形态学变化及其蛋白表达差异的研究

目的探讨不同类型栓子所致急性缺血大鼠脑组织形态学变化及其蛋白表达的差异。方法健康无特定病原体雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠120只。粉碎胆固醇晶体,制备胆固醇栓子。取大鼠自体动脉血,凝固烘干后,制成血栓栓子。栓子直径为60~100μm。采用改进的微栓子栓塞法(少量多次注射栓子代替传统的一次性注射)制作大鼠急性缺血模型,以Longa行为学评分1~4分为造模成功,共105只大鼠造模成功。按随机数字表法,将105只大鼠分为胆固醇栓子组(n=35)、血栓栓子组(n=35)和假手术组(n=35)。分别在缺血模型建立成功后6、24 h,对胆固醇栓子组、血栓栓子组各8只大鼠进行Longa行为学评分、水肿率、梗死面积的比较;分别取3组各8只大鼠缺血脑皮质区组织进行伊文思蓝与氯化三苯基四氮唑染色,评估血-脑屏障损伤,观察脑皮质区组织缺血的变化。缺血模型建立成功后24 h,分别对胆固醇栓子组、血栓栓子组各3只大鼠使用串联质谱标记技术及查库鉴定法,检测脑缺血区蛋白表达差异,两组大鼠蛋白表达量变化倍数>1.2或<0.83(且P<0.05)的蛋白质被认为是差异表达蛋白,并对差异表达蛋白进行基因本体和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果(1)假手术组大鼠Logna评分、水肿率及梗死面积结果均为0。大鼠脑缺血模型建立后6、24 h,与血栓栓子组相比,胆固醇栓子组大鼠缺血面积均较小[术后6 h:(9.7±2.3)%比(21.1±7.6)%,t=-4.080;术后24 h:(19.4±3.7)%比(24.8±4.2)%,t=-2.741;均P<0.05],而Longa行为学评分及水肿率的组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)假手术组、胆固醇栓子组、血栓栓子组大鼠模型建立后6 h伊文思蓝浓度分别为(1.26±0.07)、(1.47±0.14)、(1.53±0.15)μg/g,建立后24 h伊文思蓝浓度分别为(1.25±0.05)、(1.56±0.20)、(1.59±0.20)μg/g,伊文思蓝浓度的差异均有统计学意义(F值分别为10.826、10.026,均P<0.01),进一步两两比较分析显示,与假手术组比较,胆固醇栓子组和血栓栓子组脑皮质组织伊文思蓝浓度均增加(均P<0.05);而与胆固醇栓子组比较,血栓栓子组脑皮质组织伊文思蓝浓度的差异均无统计学意义(均P>0.05)。(3)蛋白质谱结果显示,共鉴定得到符合本实验表达倍数标准的差异表达蛋白15种。相较于血栓栓子组,胆固醇栓子组中存在12种表达上调蛋白(如玻连蛋白等)和3种表达下调蛋白(如小凹蛋白等)。基因本体富集分析显示,差异表达蛋白主要集中于磷脂代谢过程,并发挥与细胞因子受体结合的功能。KEGG通路富集分析显示,凝血与补体途径是差异表达蛋白的主要集中通路。结论缺血大鼠模型中,胆固醇栓子组比血栓栓子组缺血面积小,并且二者存在较大的蛋白表达差异。     

基于“以效识性”观点的中药药性再认识

通过对药性形成过程和现代药性认识方式的思考,本课题组提出"以效识性"观点,以此观点为核心,文章从四气、五味、归经3个方面,以"有其效而无其气""有其效而无其味"及"有其效而不归其经"为纲对2020年版《中华人民共和国药典》一部所载中药中存在"有其效而无其性"现象的中药的药性进行了再认识,并提出了基于"以效识性"观点的中药药性再认识的研究思路。"以效识性"观点为中药药性的再研究奠定基础,为新发现中药的药性认识提出科学方法。     

“医学寄生虫学”分布式多媒体资源库的建立

介绍医学高等院校“医学寄生虫学”分布式多媒体资源库建立的过程,包括资源库设计、多媒体素材收集加工、利用BT技术构建资源库等,并对其使用效果进行分析.     

须癣毛癣菌肉芽肿1例

患者女,76岁,左前臂斑块伴疼痛1年。皮肤科情况:左前臂远端皮肤见鹅蛋大小红色斑块,边缘肿胀,边界清楚,浸润感明显,有淡黄色分泌物渗出,表面皮温升高,触痛明显。皮损组织病理示:真皮内弥漫性的淋巴细胞、组织细胞、中性粒细胞及多核巨细胞呈肉芽肿样浸润;银染:可见分枝状菌丝和孢子。真菌培养分离出须癣毛癣菌。诊断:须癣毛癣菌肉芽肿。     

葛花、枳椇子及其配伍对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的保护作用及机制

目的 探讨葛花、枳椇子及其配伍对急性酒精性胃黏膜损伤的改善作用,为进一步开展葛花、枳椇子及其配伍防治酒精致多脏器损伤奠定基础。方法 采用多次灌胃给予56%红星二锅头白酒（15 mL·kg^-1）建立小鼠急性酒精性胃黏膜损伤模型,将120只ICR雄性小鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组（0.026 g·kg^-1）、葛花-枳椇子（配伍）高、中、低剂量组（29.2、14.6、7.3 g·kg^-1）、葛花组（19.5 g·kg^-1）、枳椇子组（19.5 g·kg^-1）共8个组,每组15只,动物适应性喂养1周后,按10 mL·kg^-1预给相应药物3 d,从第4天开始,给药1 h后按15 mL·kg^-1灌胃二锅头白酒,空白组给予相同体积去离子水,记录小鼠醉酒和醒酒时间,连续给药给酒3 d,末次给药1 h后摘眼球处死;气相色谱仪测定各组小鼠血清中乙醇体积分数,紫外-可见分光光度计检测各组小鼠胃黏膜中乙醇脱氢酶（ADH）活性;苏木素-伊红（HE）染色观察胃黏膜病理变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清中炎症因子含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测核转录因子-κB（NF-κB）p65和NF-κB抑制蛋白α（IκBα）mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量升高（P<0.05）,胃黏膜组织NF-κB p65 mRNA表达升高（P<0.01）,IκBα mRNA表达降低（P<0.01）;与模型组比较,奥美拉唑组、配伍高、中剂量组、葛花组醉酒时间延长（P<0.05）,配伍高、中剂量组醒酒时间缩短（P<0.05）,配伍高剂量组血清中乙醇体积分数降低（P<0.05）,奥美拉唑组、配伍高、中剂量组胃黏膜中ADH活性升高（P<0.05）,配伍各剂量组、葛花组肉眼损伤评分降低（P<0.05）,奥美拉唑组、配伍各剂量组、葛花组病理损伤评分降低（P<0.01）,各给药组血清中IL-6表达降低（P<0.05）,奥美拉唑组、配伍各剂量组、枳椇子组血清中IL-1β表达降低（P<0.05）,配伍高、中剂量组血清中TNF-α表达降低（P<0.05）,各给药组胃黏膜组织NF-κB p65 mRNA表达降低（P<0.05）,奥美拉唑组、配伍各剂量组胃黏膜组织IκBα mRNA表达增加（P<0.05）;与高剂量组比较,配伍低剂量组与枳椇子组醉酒时间缩短（P<0.01）,葛花、枳椇子组醒酒时间延长（P<0.01）,配伍中、低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中乙醇体积分数升高（P<0.05）,配伍中、低剂量组、枳椇子组肉眼损伤积分增加（P<0.05）,配伍中、低剂量组、葛花组、枳椇子组病理损伤积分增加（P<0.01）,配伍低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中IL-1β含量升高（P<0.01）,葛花组与枳椇子组胃黏膜组织IκBα mRNA表达量降低（P<0.05）;与配伍中剂量组比较,枳椇子组醉酒时间缩短（P<0.05）,葛花组醒酒时间延长（P<0.05）,葛花组、枳椇子组病理损伤积分增加（P<0.01）,配伍低剂量组、葛花组、枳椇子组血清中IL-1β含量升高（P<0.05）;与配伍低剂量组比较,枳椇子组病理损伤积分增加（P<0.05）。结论 葛花、枳椇子及其配伍能起到对小鼠急性酒精性胃黏膜损伤的防治作用,可能与抑制胃黏膜NF-κB信号通路的表达有关,且配伍高剂量组药效最佳。     

妊娠糖尿病中西医临床治疗的思考

近年随着经济生活水平的不断提高,妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病率呈逐年上升趋势,已经严重威胁孕产妇及新生儿的健康及生命。妊娠糖尿病的发病机制尚不十分清楚,目前认为与胰岛素抵抗及分泌不足、遗传易感、炎性反应、代谢紊乱等关系密切。妊娠糖尿病诊断标准,24～28周孕妇空腹8 h以上,直接口服葡萄糖75 g,行口服葡萄糖耐量试验,空腹血糖5.1 mmol·L~(-1),餐后1 h血糖10.0 mmol·L~(-1),餐后2 h血糖8.5 mmol·L~(-1)即可明确诊断。西医治疗上主要是依据饮食、运动、药物、教育、监测为原则,根据血糖情况选择妊娠B级安全药物胰岛素治疗为主,辅以膳食纤维补充剂等。中医将妊娠糖尿病归为"消渴病"范畴,是因素体禀赋不足,孕后多食滋补厚腻之品,或怒或思或愁,情志失常,造成体内阴液亏虚而发病。中医主要通过食疗、传统功法以及中药的干预进行防治,改善妊娠结局。因此,早期筛查、诊断,中西医综合治疗,实现辨证论治的个体化方案,有助于提高疗效,降低妊娠糖尿病的发病率,减少低血糖的发生,有效改善妊娠糖尿病患者母婴的不良结局及预后。     

国医大师吕仁和从肝论治慢性肾脏病经验探微

慢性肾脏病病因病机错综复杂,虽其病位在肾,但涉及五脏六腑功能失调,其病理基础为各种原因造成的肾络微型癥瘕形成,影响肾脏各种功能。国医大师吕仁和教授治疗慢性肾脏病,从肾出发,又不囿于肾脏,有其独特的临床经验。文章则总结了吕仁和教授从肝论治慢性肾脏病的经验。吕仁和教授认为其理论基础在于"肝肾同源",其主要治疗思路有三:疏肝理气调肝气郁结、清利湿热祛肝经之邪、滋水涵木养肝阴不足。文章总结了吕仁和教授从肝论治慢性肾脏病的用药特点。     

海藻-甘草含药血清对M22诱导的Nthy-ori-3-1细胞增殖的作用研究

目的 探讨海藻-甘草含药血清对人甲状腺正常细胞Nthy-ori-3-1增殖的作用,为进一步研究海藻与甘草配伍抗甲状腺肿大的作用机制奠定基础。方法 体外培养Nthy-ori-3-1细胞,使用不同浓度的促甲状腺激素受体人单克隆抗体M22作用于Nthy-ori-3-1细胞不同时间,观察M22作用的最佳浓度及时间。制备海藻-甘草含药血清,M22刺激细胞24 h后,分别给予5%、10%、15%、20%海藻-甘草含药血清干预24 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡情况;透射电镜观察细胞形态;免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain3,LC3)表达情况;Western blotting检测Beclin1蛋白表达。结果 M22明显刺激Nthy-ori-3-1细胞增殖,0.125μg/mL的M22作用24 h时促增殖作用最佳（P<0.01）。经海藻-甘草含药血清干预后,细胞增殖明显抑制（P<0.05、0.01）,细胞呈现明显的凋亡形态学变化,G0/G1期细胞比例明显升高（P&l...     

基于安全性、有效性评估中药配伍禁忌的研究现状与思考

中药配伍禁忌作为中医理论的重要组成部分,是关乎中药临床安全有效的关键问题。虽其由来已久,但能否同用争议颇多,暂无统一定论。近年关于中药配伍禁忌的相关研究逐渐增多,对其认识亦不断提升。文章从安全性和有效性两方面,对中药配伍禁忌的研究现状进行探讨。中药配伍禁忌的安全性相关实验提示其成分变化影响其毒性或药效,与临床不良反应事件的发生密切相关;实验和临床研究显示配伍后有增效或治疗作用。建议今后加强中药配伍禁忌成分变化研究、重视不良反应监测、基于临床建立模型开展实验、基于真实世界开展临床研究,从多学科、多领域、多技术交叉融合探究其中科学内涵,以期为临床安全、有效、合理运用配伍禁忌药物提供参考。