依据药物敏感试验根除幽门螺杆菌的临床疗效随访

目的:在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染的患者中,根据药物敏感试验选择治疗方案与常规一线治疗方案进行临床疗效优劣的随访.方法:在浙江省嘉兴市第一医院内镜室行胃镜检查的患者中,胃镜检查时取材标本2块,分别送检常规组织病理学检查及组织切片染色检测及H.pylori的分离、培养、鉴定:其中H.pylori培养结果阳性的纳入治疗组,仅组织切片染色检测H.pylori阳性纳入对照组.治疗组根据药敏试验结果治疗10 d,对照组根据标准一线治疗方案治疗10d.治疗结束4 wk后的患者进行复查,任选一种复查方式(H.pylori培养或组织切片染色或14C呼气试验),三项之一阴性者可判断H.pylori根除.结果:H.pylori培养结果阳性的纳入治疗组(n=4680),仅组织切片染色检测H.pylori阳性纳入对照组(n=3505).治疗组根据药敏试验结果选用2种敏感度最高值抗生素参与的四联疗法治疗,对照组选用常规四联疗法,治疗结束4 wk后复查评估根除率.最终,治疗组的根除率为91.18%,比对照组根除率73.07%高,且差异有统计学意义(P0.05).结论:依据H.pylori的药物敏感试验选择的治疗方案明显优于标准一线治疗方案.     

辐照后的AlloMNCs诱导NK细胞体外扩增

目的探讨照射后的同种异体外周血单个核细胞(allogeneic PB-MNCs,AlloMNCs)对人自然杀伤细胞(NK)体外扩增的影响,为NK细胞的过继免疫治疗奠定基础。方法 Ficoll密度梯度离心法分离健康成人外周血单个核细胞(PBMCs),30、50和70 Gyγ射线照射后的AlloMNCs作为饲养细胞,分别加入上述PBMCs,在添加细胞因子的X-VIVO15TM无血清培养基中进行培养扩增,同时选择未添加饲养细胞的作为对照组;台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞术检测CD56+CD3-NK细胞纯度;MTT法检测细胞杀伤活性。结果加入饲养细胞的PBMCs在添加了细胞因子的X-VIVO15TM无血清培养基中可培养21 d,30 Gy照射后的AlloMNCs作为饲养细胞时细胞扩增最明显,在第21天时扩增了270.3±10.4倍,CD56+CD3-NK细胞纯度由培养前的(9.7±2.4)%提高到扩增后的(56.5±7.8)%,与无饲养细胞的对照组相比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞杀伤实验表明,当效靶比为10∶1时,添加30Gy照射后的AlloMNCs刺激扩增的NK细胞对K562和HO8910的杀伤率平均达到59.7%、63.2%,分别与对照组的28.3%、32.2%相比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 30 Gy照射后的AlloMNCs可作为饲养细胞在体外促进NK细胞的增殖,为NK细胞的肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。     

应用围术期输血指征评分的非心脏择期手术患者围术期输注红细胞的安全性

目的评估围术期输血指征(POTTS)方案应用于非心脏择期手术的安全性。方法从2012年—2016年按照华西医院提出的《POTTS安全性与有效性试验方案》共纳入1 213名患者的多中心试验中,提取270例非心脏择期手术中输注悬浮红细胞的病例,其中按照POTTS输血方案患者78例(P组,根据患者术中心功能、呼吸、体温及既往心绞痛病史个体化评分确定患者术中最低Hb),按照限制性输血方案患者192例[R组,Hb(70-100)g/L由临床医师评估是否需要输血],比较2组患者低血红蛋白输血、生命体征相关输血指征、急性失血及合并症发生率,输血前估计失血量及Hb,术后30 d死亡率及并发症发生率。结果 P组与R组比较,低血红蛋白相关输血及生命体征相关输血发生率(%)分别87.18 vs 52.08,59.90 vs 83.33(P0.05);输血前低血压发生率为74.4%vs 51.6%(P0.05);P组输血前Hb(g/L)68 vs 78(P0.05);术后30 d死亡率及术后并发症发生率(%)分别为3.85 vs 2.08,11.5vs 8.9(P0.05)。结论在非心脏择期手术中,POTTS方案较限制性输血方案更严格,但同样安全。     

MUC16介导卵巢癌细胞免疫逃逸NK细胞杀伤的研究进展

过继性自体NK细胞免疫治疗临床应用的效果不明显可能与肿瘤在恶化过程中对NK细胞的免疫逃逸有关,MUC16作为一种表达于卵巢癌上皮细胞表面的跨膜黏蛋白可能参与了卵巢癌细胞对NK细胞杀伤作用的免疫逃逸.因而了解MUC16介导卵巢癌细胞免疫逃逸NK细胞杀伤作用的相关性研究很重要.     

宫颈锥切术对妊娠的影响

随着宫颈疾病三阶梯诊断流程的开展,越来越多的宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和早期宫颈癌患者被筛查出来.宫颈锥切术作为一种诊断和治疗方法,因可以保留患者的生育功能而被广泛用于临床,同时新辅助化疗技术的应用扩大了该术式的适用人群,但宫颈锥切术对妊娠的相关影响一直存在争议.宫颈锥切术可能会引起宫颈狭窄、宫颈形态改变、感染等并发症,但对生育能力和分娩方式无明显影响.流产、早产、胎膜早破、低出生体质量儿等妊娠不良结局主要与锥切的术式、高度及体积、至妊娠的间隔时间有关,目前对锥切后是否行预防性宫颈环扎应持谨慎态度.     

IL-15基因修饰的NK细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤作用

目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc细胞的增殖情况,51Cr释放法检测NK-ustc细胞对K562和原代卵巢癌细胞的杀伤活性。建立人裸鼠荷卵巢癌模型,随机分为NK-ustc治疗组(模型鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞)和培养基对照组,同时设空白对照组(正常裸鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞),观察各组裸鼠体重、腹围及生存期。结果:1、2、4、8、16 Gy辐照后NK-ustc细胞的增殖率分别为(62.1±9.8)%、(41.3±8.7)%、(14.6±4.1)%、(0.1±0.03)%和(0.2±0.04)%。当效靶比为10∶1时,0、8 Gy辐照后NK-ustc细胞对K562的杀伤率分别为(45.4±8.9)%和(43.1±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐...     

荧光原位杂交技术检测宫颈病变中C-MYC基因的表达及其意义

目的:探讨c-myc原癌基因在宫颈病变中的表达及其临床意义。方法:筛选114例宫颈细胞涂片,按最终病理学结果分组,其中正常宫颈20例,CINⅠ20例,CINⅡ25例、CINⅢ25例、宫颈癌24例;同时选取上述病例的宫颈病理切片,均用FISH方法检测c-myc基因的表达情况。结果:①C-myc基因在不同细胞学分级中即ASCUS、LSIL、HSIL和SCC宫颈脱落细胞中的阳性表达率为0.0%、20.8%、38.9%、61.2%、95.2%,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。②C-myc基因在不同病理学分级中即正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌脱落细胞中的阳性表达率分别为0.0%、10.0%、44.0%、72.0%、90.2%,其组间差异有统计学意义(P<0.01)。③在宫颈病理切片组织中C-myc基因阳性表达率在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组织中依次为0.0%、20.0%、56.0%、80.0%、95.0%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:c-myc基因在各级CIN和宫颈癌的脱落细胞及组织中均有异常扩增,其扩增率随着宫颈病变程度增加而增加,提示c-myc基因异常扩增在宫颈病变筛查中具有一定的价值和意义。     

克罗恩病56例临床分析

为探讨克罗恩病（CD）的临床特点和诊治情况,回顾分析56例CD患者的临床资料,按照维也纳分类标准进行临床分类。结果显示,56例CD患首的男女之比为2．11：1,年龄13～68岁。根据维也纳分类标准进行分类,56例CD患者中诊断时年龄〈40岁（A1）者36例（64．3％）,≥40岁（A2）者20例（35．7％）;病变位于末端回肠（L1）者22例（39．3％）,结肠（L2）者12例（21．4％）,回结肠（L3）者21例（37．5％）,上消化道（L4）者1例（1．8％）;无狭窄、穿孔（B1）者25例（44．6％）,发生狭窄（B2）者17例（30．4％）．发生穿孔（B3）14例（25．0％）。A1型中病变位于末端回肠者占44．4％,A2型中病变位于回结肠者占45．0％。狭窄发生率在L1及L2中的比例相近（36．4％vs33．3％）,而穿孔发生率L1明显高于L2（31．8％vs8．3％）。结肠镜下可见节段性病变、黏膜充血水肿、溃疡、铺路石样改变等;胶囊内镜下表现为不规则溃疡、线样溃疡、阿弗他溃疡等。活检标本的肉芽肿检出率为33．3％,手术标本为74．1％。27例患者接受手术诊治．手术率为48．2％。结果表明,简单易仃的维也纳分类标准遁用于我国CD人群的分类。CD的诊断较困难,手术率高,需重视发病早期胶囊内镜和回结肠镜检查的重要作用,减少手术发生,延缓患者首次手术时间。     

IL-15基因修饰的NK细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤作用

目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc细胞的增殖情况,51Cr释放法检测NK-ustc细胞对K562和原代卵巢癌细胞的杀伤活性。建立人裸鼠荷卵巢癌模型,随机分为NK-ustc治疗组(模型鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞)和培养基对照组,同时设空白对照组(正常裸鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞),观察各组裸鼠体重、腹围及生存期。结果:1、2、4、8、16 Gy辐照后NK-ustc细胞的增殖率分别为(62.1±9.8)%、(41.3±8.7)%、(14.6±4.1)%、(0.1±0.03)%和(0.2±0.04)%。当效靶比为10∶1时,0、8 Gy辐照后NK-ustc细胞对K562的杀伤率分别为(45.4±8.9)%和(43.1±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐照后NK-ustc细胞治疗组荷瘤小鼠的中位生存期为75 d,对照组为39 d(P<0.05),空白对照组小鼠全部存活。结论:γ射线照射可有效抑制NK-ustc细胞增殖,但保留该细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤活性。     

不同刺激因子组合诱导NK细胞体外扩增及其功能的研究

目的探讨不同刺激因子组合对人自然杀伤细胞(NK细胞)体外扩增及其功能的影响。方法 VarioMACS分选健康成人外周血单个核细胞(PBMC)中的NK细胞,依据添加刺激因子的不同分为A组(IL-2)、B组(IL-2+IL-15)、C组(IL-2+IL-15+饲养细胞),饲养细胞为30 Gyγ射线照射后的同种异体外周血单个核细胞(allogeneic PB-MNCs,AlloMNCs),未添加任何刺激因子的细胞的作为对照组,在干细胞生长培养基(SCGM)中进行培养扩增14 d,第1天添加PHA及OKT3,第5天离心洗去;台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞术检测分选及扩增前后CD56+CD3-NK细胞纯度;改良的MTT法检测NK细胞对K562、HO8910及PBMC的杀伤活性。结果经VarioMACS免疫磁珠阴性分选后NK细胞纯度由分选前的(9.2±2.9)%提高到(93.5±3.2)%,培养14 d后,除对照组NK细胞纯度降低外,其余组与扩增前无明显差异(P>0.05)。细胞扩增倍数分别为17.2±1.7、51.3±6.6和82.4±9.8倍,均显著高于对照组(5.7±1.2)(P<0.01)。实验组组间比较,C组明显高于A组和B组(P<0.01)。细胞杀伤实验表明,当效靶比为10∶1时,各组的杀伤活性显示为C组>B组>A组>对照组,C组扩增的NK细胞对K562及HO8910的杀伤率可分别达到(70.1±8.9)%和(64.6±6.2)%,显著高于对照组、A组(P<0.01)和B组(P<0.05),对PBMC的杀伤率仅为(4.2±1.2)%。结论经VarioMACS分选获得的NK细胞,在体外使用SCGM培养基培养,添加IL-2、IL-15和照射后AlloMNCs作为刺激因子,可获得高效扩增和有效活化的NK细胞,为NK细胞的肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增高纯度NK细胞的方法。