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目的:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测早幼粒细胞白血病/维甲酸受体α(PML/RARα)融合基因,筛查变异易位并对变异易位产物测序,以进一步了解变异易位的特点及临床意义。方法:取急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓,RT-PCR检测L亚型和S亚型,发现的变异易位经全自动测序仪测定其碱基序列。结果:11例PML/RARα融合基因表达的患者中,S亚型1例、L亚型8例、变异S亚型合并L亚型2例;变异S亚型产物测序得到206bp的碱基序列,检索证实是一种新的变异易位。结论:发现了一种新的S亚型变异易位,证实同一个体可有S和L二种不同亚型并存;提示PML/RARα融合基因的RT-PCR检测中,识别变异易位有重要意义。 相似文献
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目的探索TSGF和hMAM表达指标对乳腺癌细胞外周血微转移诊断的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作RT-PCR并用-βactin监控;确认的cDNA先作普通PCR扩增,再作荧光定量PCR扩增。血清作TSGF检测。结果64例标本有63例确认转录为cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通PCR后再作荧光定量PCR,乳腺癌hMAM表达阳性率为53.3%、良性乳腺肿瘤和正常对照均无阳性,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤或正常对照组间hMAM表达有显著差异;淋巴结转移组与未转移组,hMAM表达有显著差异。TSGF阳性率为1.6%,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤组及正常对照组间无显著差异。结论二次PCR的灵敏度可成功检出外周血hMAM的表达,而单次PCR法的灵敏度不够;外周血hMAM表达指标可用于监测乳腺癌细胞微转移,但未见TSGF指标对乳腺癌微转移的监测价值。 相似文献
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损伤肝脏条件培养液体外诱导小鼠骨髓单个核细胞分化为肝细胞的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探索小鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs)体外诱导分化为肝细胞的可行性及方法。方法将四氯化碳注射的小鼠肝脏进行培养,收集上清液,用于诱导BMMNCs分化。观察细胞分化中的形态变化;在1、7、14、21d时,逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫荧光反应检测甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)、CK19、肝细胞核因子3β(HNF3β)、酪胺酸胺基转移酶(TAT)和白蛋白(ALB)基因的表达,过碘酸Schiff氏剂反应(PAS)检测细胞糖原合成。结果诱导组细胞呈肝细胞样变化;RT—PCR检测,第7天可见AFP、CK19基因表达,第14天AFP表达增强,第21天减弱;第14天可见ALB、CK18、HNF3β基因表达,且持续到第21天;第21天TAT表达。免疫荧光反应结果显示,第21天ALB、CK18、CK19、AFP表达呈阳性;同时PAS糖原合成反应也出现阳性。结论BMMNCs在损伤肝脏条件培养液诱导下可跨越分化为肝细胞,该方法的建立对分化机制研究有重要意义。 相似文献
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我们以乳腺癌MDA-MB-453细胞株为模型,用小片段RNA(siRNA)特异性抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,了解其促肿瘤细胞凋亡的效果. 相似文献
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四种方法治疗耳廓假性囊肿的临床对比观察 总被引:1,自引:0,他引:1
耳廓假性囊肿是耳科常见疾病之一 ,是一种软骨内的无菌性浆液性渗出性炎症[1] ,若治疗不当 ,会导致化脓性耳廓软骨膜炎甚至耳廓外形严重畸形等恶劣后果。 1994年 8月至 2 0 0 1年 10月间 ,我科对82例耳廓假性囊肿门诊病人分别以穿刺抽液、外敷、手术开窗、微波局部烧灼四种方法治疗 ,并进行随诊和疗效对比观察 ,现报告如下。1 资料与方法1 1 临床资料82例患者中男 5 4例 ,女 2 8例 ;年龄 16~ 6 8岁 ,平均 34 2岁 ;发病时间 1周~ 3个月 ,平均 2 0天。患者均为偶然发现耳廓处局限性隆起伴不适感 ,无明显疼痛及全身症状。1 2 治疗方法 随… 相似文献
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目的检测乳腺癌组织及血清中骨桥蛋白(OPN)表达水平,分析其用于乳腺癌诊断的临床价值。方法应用RT-PCR法检测45例乳腺癌病灶及其癌旁组织的OPN表达水平,分析其与临床病理特征之间的关系;ELISA检测乳腺癌(45例)、乳腺良性肿瘤(19例)以及正常体检女性(26例)血清中的OPN的水平,同时免疫化学发光法检测其血清CA153的浓度,ROC曲线分析OPN、CA153以及二者联合检测对乳腺癌诊断的价值。结果 45例乳腺癌病灶和相应的癌旁组织中OPN mRNA阳性表达率为分别77.78%(35/45)和37.78%(17/45),乳腺癌组OPN mRNA表达量(1.51±0.16)显著高于癌旁组织(1.12±0.10),差异均具有统计学意义(P<0.05);OPN的表达与临床分期,病灶钙化以及腋窝淋巴结转移均具有相关性(P<0.05);与正常对照组和乳腺良性肿瘤组比较,乳腺癌血清中的OPN含量显著升高;Ⅲ期+Ⅳ期血清OPN浓度显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(P<0.05);转移组的OPN含量明显高于未转移组,差异具有统计学意义(P<0.01);血清中的OPN浓度与组织中OPN mRNA表达水平显著相关(r=0.653,t=4.91,P<0.05);OPN、CA153及二者联合检测诊断乳腺癌的灵敏度分别为:73.3%、60.0%和95.6%,特异性分别为82.2%、91.1%和66.7%。结论 OPN在乳腺癌病灶组织中高表达,与乳腺癌临床分期,病灶钙化以及腋窝淋巴结转移相关;血清中OPN浓度与组织mRNA表达显著相关,可能是来源于组织中的骨桥蛋白的分泌;血清OPN可以作为乳腺癌转移诊断的辅助指标,联合CA153检测诊断性能明显优于单独检测,可明显提高灵敏度,对乳腺癌早期诊断具有重要意义。 相似文献