小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

小分子干扰核糖核酸抑制乳腺癌细胞端粒酶逆转录酶表达提高阿霉素化疗的敏感性

人端粒酶逆转录酶(bTERT)是端粒酶活性的限速酶[1].抑制hTERT表达可有效抑制端粒酶活性[2],增加化、放疗的敏感性[3].本研究旨在研究hTERT基因表达被干扰后,阿霉素化疗敏感性的变化.     

端粒酶hTERT基因反义核酸对前列腺癌细胞PC3端粒酶活性的抑制作用

目的探讨hTERT基因的两端部分硫代修饰反义寡核苷酸（ASPS—ODN）对前列腺癌细胞PC3端粒酶活性的抑制作用。方法采用端粒重复序列扩增法及TRAP-PCR-ELISA法检测前列腺癌细胞的端粒酶活性；采用RT-PCR方法检测hTERT基因mRNA的表达水平；以免疫组化通过流式细胞仪检测hTERT基因蛋白水平的变化。结果hTERT基因的两端部分硫代修饰ASPS—ODN作用于PC3细胞48h，其端粒酶活性下降，作用72h，其端粒酶活性受到抑制。结论通过hTERT基因的两端部分硫代修饰ASPS—ODN特异性抑制hTERT基因mRNA的表达，可降低前列腺癌细胞PC3端粒酶活性。     

直肠癌组织hTERT和c-myc表达的临床研究

端粒酶与细胞恶变、肿瘤的发生发展密切相关[1],而端粒酶催化亚基(hTERT)可能在端粒酶活性调节中起重要作用[2].目前研究发现c-myc的过度表达对激活hTERT基因可能起关键作用[3].本研究应用免疫组织化学法检测直肠癌、癌旁组织、腺瘤性息肉及正常直肠黏膜组织中hTERT和c-myc的表达,探讨两者在直肠癌发生、发展中的作用.     

小RNA干扰对氟他胺耐受性前列腺癌细胞LNCaP端粒酶活性的影响机制研究

目的探讨hTERT基因的两端各三个碱基硫代修饰反义寡核苷酸(AS PS-ODN)对氟他胺耐受性前列腺癌细胞LNCaP端粒酶活性的影响机制。方法采用TRAP-PCR-ELISA法检测氟他胺耐受性前列腺癌细胞的端粒酶活性;采用RT-PCR方法检测hTERT基因mRNA的表达水平;以免疫组化通过流式细胞仪检测hTERT基因蛋白水平的变化。结果 hTERT基因的两端各三个碱基硫代修饰反义寡核苷酸(AS PS-ODN)作用于LNCaP细胞48h,其端粒酶活性下降,作用72h,其端粒酶活性受到抑制。结论通过hTERT基因的两端各三个碱基硫代修饰反义寡核苷酸(AS PS-ODN)特异性抑制hTERT基因mRNA的表达降低氟他胺耐受性前列腺癌细胞LNCaP端粒酶活性,为氟他胺耐受性前列腺肿瘤的基因治疗提供新思路。     

靶向人端粒酶逆转录酶基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定

人端粒酶逆转录酶(hTERT)是端粒酶活性的主要调控因子,对细胞的恶性转化、肿瘤的发生发展意义重大,目前已成为肿瘤基因治疗的理想靶标[1].我们应用RNA干扰技术设计和构建有效靶向hTERT基因的真核表达质粒,并加以鉴定.     

野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶mRNA转录的影响

目的 研究野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA转录及端粒酶活性的影响。方法 将含人野生型p53基因的pcDNA3—p53转染人胃癌细胞系BGG—823，通过半定量逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测转染后细胞hTERT基因mRNA的转录，聚合酶链式反应结合酶联免疫吸附(PCR ELISA)方法检测端粒酶活性。结果 转染野生型p53基因后48、72h BGC-823细胞的hTERT基因mRNA转录量由对照组的( )下降为( )和( )；转染前BGC—823细胞表达高水平的端粒酶活性(3．049)，而转染48、72h后的端粒酶活性分别为1．678和0．757。结论 野生型p53基因能够显著抑制人胃癌细胞hTERT基因mRNA的转录，通过下调hTERT、基因mRNA的转录来抑制胃癌细胞的端粒酶活性。     

靶向hTERT 人工miRNA 表达框架的构建及其对HepG2 细胞端粒酶活性的抑制作用

目的：构建针对hTERT基因的人工miRNA表达框架,并验证其对HepG2细胞端粒酶活性的抑制作用。 方法：应用融合PCR技术针对不同位点设计并构建3个靶向hTERT的人工miRNA表达框架,对各表达框架鉴定后,将其单独或两种共转染HepG2细胞,采用TRAP-银染法和TRAP-二聚体蝎形探针荧光定量PCR法检测细胞端粒酶活性。 结果：3个针对hTERT基因的人工miRNA表达框架均成功构建,单独或共转染HepG2细胞后,HepG2细胞的端粒酶活性均被不同程度的抑制,且两种表达框架共转染的抑制作用明显大于单独转染,差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论：靶向hTERT基因的人工miRNA表达框架能有效而特异抑制HepG2细胞端粒酶活性,多位点联合抑制是一种有效的实验方案。     

肝外胆管癌及癌旁胆管组织中hTERT蛋白表达和临床病理学联系

端粒酶激活是肿瘤发生的重要事件，85％以上的人类肿瘤细胞或组织可表达端粒酶活性。端粒酶活性又是由端粒酶逆转录酶(hTERT)调节的，后者又是端粒酶活性的限速决定因素，其表达与端粒酶活性相关。关于福尔马林固定-石蜡包埋胆管癌组织中hTERT蛋白和基因表达的研究甚少。本文对收集的肝外胆管癌以及癌旁胆     

hTERT基因与端粒酶活性调节

目的 介绍端粒酶催化亚单位（hTERT)基因及评价其在端粒酶活性调节中的意义。方法 复习近4年相关文献,并作综述报道。结果 hTERT属逆转录酶系,hTERT基因的表达调控可分为转录调控与转录后加工;hTERT是调控端粒酶活性的主要因素,其调控可分为转录调控和转录后mRNA选择性剪接调控。结论 在众多调控端粒酶活性的因素中,hTERT的调控起关键作用。     

RNA干扰技术对大肠癌细胞人端粒酶逆转录酶基因的抑制作用

目的 观察RNA干扰对大肠癌细胞中人端粒酶逆转录酶基因(hTERT gene)的抑制效应.方法 大肠癌细胞株HT-29分为Control组、N-hTERT组、Lipofectamine组和sihTERT组;将靶向于hTERT基因的小干扰RNA,转染大肠癌细胞;分别检测大肠癌细胞转染前后的端粒酶活性,hTERTmRNA和蛋白水平,细胞生长增殖和凋亡情况.结果 sihTERT转染大肠癌细胞效率为60%;sihTERT组的端粒酶活性值、hTERT mRNA表达、hTERT蛋白表达、细胞凋亡率分别为0.73±0.14、0.47±0.08、0.37±0.07、49.5%,sihTERT组与其他三组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 靶向于hTERT的siRNA能特异性沉默大肠癌细胞hTERT基因,下调hTERT基因mRNA及蛋白表达水平,降低端粒酶活性,抑制癌细胞生长增殖从而促进大肠癌细胞凋亡.     

大肠癌端粒酶各组分表达及其与端粒酶活性的关系

目的：研究端粒酶的3种组分与其活性的关系,探讨端粒酶激活的关键因素。方法：采用TRAP法检测大肠癌组织及相邻正常黏膜组织中端粒酶活性,用RT－PCR检测端粒酶3种组分的表达。结果：在64例（85．33％）癌组织中检测到端粒酶活性,正常黏膜中没有端粒酶活性,两者差异有显著性（P＜0．01）;hTR和TP1基因的表达在癌组织和正常黏膜没有差别,hTERT在癌组织中的表达要明显高于正常黏膜,差别具有显著性（P＜0．01）,hTERT基因表达强度与端粒酶活性密切相关。结论：大肠癌端粒酶活性表达具有肿瘤特异性,hTERT在癌组织中的表达明显高于正常粘膜,大肠癌中端粒酶活性和hTERT基因表达强度密切相关,hTERT基因表达可能是端粒酶激活的关键因素。