薯蓣皂苷对人结肠癌细胞凋亡的作用及机制研究

目的:探究薯蓣皂苷（Dioscin）诱导人结肠癌HCT-116细胞、RKO细胞凋亡的作用及机制。方法:通过将体外培养的HCT-116细胞和RKO细胞分为对照组和不同浓度的药物组,采用CCK-8实验分析Dioscin对细胞增殖的抑制作用,可见分光光度法检测细胞LDH活性的变化;借助DNA含量检测法、Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测细胞凋亡情况;DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧簇（ROS）含量的变化;采用荧光探针法和可见分光光度法分别检测细胞超氧化物含量及细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化,Western 印迹法检测凋亡相关蛋白的表达情况。结果: 在24 h、48 h处理时间下,与对照组相比,HCT-116细胞Dioscin组（2、4、6、8、10 μmol/L）、RKO细胞Dioscin组（5、10、15、20、25 μmol/L）都明显抑制了结肠癌细胞的增殖活性（均P＜0.05）,且HCT-116、RKO细胞经Dioscin处理后,细胞膜破坏,细胞LDH释放量较对照组增多（P<0.05,P<0.01）;与对照组相比,Dioscin作用HCT-116、RKO细胞后,DNA含量暴露增多（P＜0.05,P＜0.001）,细胞凋亡率上调（P＜0.001,P＜0.01）,ROS水平升高（P<0.05,P<0.001）,超氧化物含量增多（均P<0.001）,SOD表达降低（P＜0.05,P＜0.001）;Western 印迹结果表明,与对照组相比,Dioscin可以抑制HCT-116、RKO细胞蛋白p-Akt（P<0.01,P<0.001）、Nrf2（均P<0.001）、Bcl-2（均P<0.001）的表达,促进蛋白cleaved Caspase-9（P<0.001,P<0.01）的表达。结论:薯蓣皂苷可能通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路激活氧化应激反应,从而抑制结肠癌细胞生长,促进其凋亡。     

活体亲属供肾移植（附二例报告）

目前终末期肾功能衰竭的发病率逐年增加,同种异体肾移植术已成为治疗的主要手段之一。由于器官来源短缺,活体供肾移植能够部分解决供体不足的问题。活体亲属供肾移植因为长期存活率高,在国外已广泛开展,而国内报道较少。我院于2000年5月和7月成功实施2例,结果如下。 1 临床资料 1.1 一般资料 例1女,17岁,主因慢性肾小球肾炎、慢性肾功能衰竭10个月,常规血液透析6个月,于2000年4月15日入院。检查血型A型,主要组织相容性抗原(HLA)A_(30,-),B_(13,60)DR_(7,15)DQ_(2,6),群体反应性抗体(PRA)3％,淋巴细胞毒交叉配合试验1％。供者,男,45岁,为受者父亲,自愿捐肾,检查血型A型,HLA A_(2,30)B_(13,51)DR_(7,16)DQ_(2,5)。平素身体     

胰头癌根治性胰十二指肠切除术若干问题的思考

作者在为胰头癌施行根治性胰十二指肠切除术的过程中,依据实践,结合文献复习,针对目前的某些热点问题,提出应避免主动性姑息性胰十二指肠切除术.提倡淋巴结廓清至少应达二站淋巴结,建议将肝十二指肠韧带骨骼化清扫和腹膜后组织切除作为根治性胰十二指肠切除术的常规手术步骤,无论有无证据支持第13组淋巴结(胰头后淋巴结)已发生转移,均应对可切除胰头癌进行限制性腹膜后组织切除.显露肠系膜上动脉并辨清钩突下缘和左侧缘与动脉的关系,是保证钩突切除完整性的技术要点.术前评估血管成像等影像学资料,可提高主动性联合血管切除的手术比例.胰肠吻合方式的选择,手术者的经验非常重要,从自己熟悉和熟练的二三种方法中选择最适合患者的方式,作者更偏向于胰肠端侧双层套入吻合法.并认为能量外科技术平台(电外科工作站)应用应慎重,仍须积累更多的经验再做评价.

Abstract：

According our practice of raical pancreaticoduodenectomy for pancretic head carcinoma and combined with these reviews, we suggested the active and palliative pancreaticoduodenectomy should be aviod. Skeletonization of hepatoduodenal ligament and the retroperitoneal resection should be the routine procedure in pancreticoduodenectomy, and at least invovle two regional lymph nodes. In addition, regardless of the metastase of No 13 lymph node, ristricted retroperitoneal resection for resectable pancretic carcinoma was needed. Exposured the superior mesenteric artery and distinguished inferior of uncinate process of pancrease with the artery, were the key point of the uncinate process of pancrease resection. Preoperative evaluation of angiography and other images, the ratio of activeness and combination with vessel resection would be improved. The style of pancreaticojejunostomy could be selected by the experience of the operator, we are apt to the double-deck invaginated pancreaticojejunostomy. Additionally, utilization of the electronic surgical workstation, should be careful and also need to accumulate more experience.     

体外持续肝脏灌注常温保存和HTK液低温保存无心跳供肝效果的比较

目的 比较应用组氨酸-色氨酸-酮戊二酸(HTK)液低温保存和体外持续肝脏灌注(ECLP)系统常温保存无心跳供肝的效果.方法 按保存方法不同将供肝随机分为A组和B组:供肝切取后,A组用HTK液在低温下保存10 h;B组用ECLP系统在常温下用稀释的自体血液持续灌注10 h.两组供肝再经过60 min冷缺血期后,连接ECLP系统用稀释的自体血液再灌注4 h.观察再灌注后1、2、3、4 h四个时间点的胆汁分泌量,门静脉和肝动脉的压力,肝脏耗氧率的变化,灌注液中丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖水平以及灌注后供肝的常规病理和超微病理变化.结果 B组再灌注后1、2、3、4 h时间点的胆汁分泌量,门静脉和肝动脉的压力,灌注液中ALT、LDH和葡萄糖水平,以及2、3、4 h时间点的耗氧率与A组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);B组供肝的病理损害程度较A组轻.结论 供肝切取后10 h内,利用ECLP系统持续灌注常温保存比用HTK液单纯低温保存在维持无心跳供肝的功能和生理活性方面效果更好.     

猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应的免疫学及病理学变化

目的观察猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应时的免疫学及病理学变化。方法采用猪到猕猴腹腔内异位心脏移植模型,检测发生超急性排斥反应者的血液中补体、天然抗体及T淋巴细胞亚群的变化,并对移植心脏进行免疫组化(测定C3、C4、C5b9、IgG及IgM的沉积)及病理学分析。结果发生超急性排斥反应时,血清补体C3、C4的含量、总补体活性及抗猪内皮细胞天然抗体均有一定程度的下降;CD4 /CD8 T淋巴细胞的比率也有所下降;移植心脏中均有补体C3、C4、C5b9的沉积,IgG及IgM也均有沉积,但IgG和IgM沉积强度的差异无统计学意义;病理学改变主要为心肌间质弥漫性出血、水肿,毛细血管内普遍淤血。结论补体通过经典途径激活参与猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应;超急性排斥反应时受者血中天然抗体水平明显下降;CD4 T淋巴细胞可能参与异种移植超急性排斥反应过程并有所消耗;发生超急性排斥反应的移植物突出病理表现为间质出血。     

肝脏体外灌流中直接灌流与间接灌流效果的比较研究

目的在体外肝脏灌流（ECLP）实施技术研究中，对直接灌流和间接灌流孰优孰劣一直存在争议。本实验拟就临床应用对这两种方法进行评价。方法实验动物供体均为普通健康长白猪，体重在20～30kg，雌雄不拘。一组受体是普通健康长白猪，标准与供体相同；另一组受体是普通健康狗，体重在20～30kg，雌雄不拘。随机分为2组，直接灌流受体为肝衰猪，间接灌流受体为肝衰狗：A组（直接灌流组，n=5）体外肝脏与受体间直接进行血液交换；B组（间接灌流组，72-4）体外肝脏用猪血液进行ECLP循环，受体血液自循环，两个循环间的血液通过中空纤维管进行物质交换。A、B两组进行ECLP灌流时间均为4h，肝衰时间为8h，8h后处死。观察体外肝脏和受体一般情况，体外肝脏的胆汁生成量、耗氧率等，受体的血氨、肝脏酶谱和血凝情况等指标。结果A、B两组在体外肝脏的胆汁生成量、耗氧率和受体方面均没有明显的差异（P〉0．05）。结论虽然直接灌注和间接灌注两者在体外肝脏的存活和灌注效果方面没有明显的差异，但考虑到间接灌注在异种灌注中具有伦理学压力较小的诸多优点，而临床应用又以异种灌注为主，故临床应用时仍推荐应用间接灌注。     

胰腺质地与胰肠吻合方法的选择

胰肠吻合在胰腺外科手术中具重要地位,广泛应用于胰十二指肠切除术、胰腺外伤、胰腺移植等手术方式,胰肠吻合的成功与否直接影响病人的预后。胰肠吻合之所以特殊,在于对合组织的不同质地。影响胰肠吻合成功的因素中包括术者经验、病人全身情况和局部因素。局部因素中组织血运、     

中西医疗法预防结直肠腺瘤复发的研究进展

该文通过对近5 年中医药和阿司匹林在预防结直肠腺瘤复发中的方法、方剂、推荐剂量和用药时长以及相关不良事件进行了相关文献系统综述和随机对照试验的结果分析。     

趋化因子配体16对人胰腺癌细胞株PANC1生物学行为的影响

目的探讨趋化因子配体16（CXCL16）对人胰腺癌细胞PANC1生物学行为的影响。方法取对数生长期的人胰腺癌细胞PANC1,分别加入50、1013、200ng／ml的重组人CXCL16（rhCXCL16）和抗CXCL16抗体处理4h,以不加rhCLCL16作为对照。采用MTT法检测细胞增殖,采用Mqrtigel基质检测细胞的黏附率,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。结果100ng／ml rhCXCL16处理PANC1细胞后,细胞增殖、对基质的黏附率、侵袭和迁移能力分别为0．264±0．021、（91．4±8．6）％、1．246±0．216、1．361±0．276,其中细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力均显著高于对照组的（20．6±3．2）％、0．259±0．013、0．199±0．008（P〈0．01）,对细胞的增殖不影响;2130ng/ml rhCXCL16处理后,细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力进一步提高到（92．1±6．3）％、1．511±0．174、1．600±0．208（P〈0．05）。结论CXCL16可诱导人胰腺癌细胞PANC1增强对基质的黏附性、侵袭性和迁移性。     

大鼠心脏移植排斥反应时细胞间粘附分了—1的表达及霉酚酯对其的抑制作用

目的 探讨大鼠同种异位心脏移植排斥反应期间移植心组织细胞间粘附分子－1（ICAM－1）的表达霉酚酯酯（MMF）对移植心ICAM－1表达和排斥反应的抑制作用。方法 建立大鼠心脏腹腔移植模型。设Wistar 到Wistar大鼠的同系心脏移植对照组、SD大鼠到Wistar大鼠的同种移植组和同种移植MMF治疗组。采集移植心组织标本行免疫组织化学和组织病理学检查,应用多媒体彩色图文分析系统对移植心组织ICAM－1的表达进行定量检测。结果 对照组移植心组织ICAM－1表达较弱;同种移植组在排斥反应期间移植心组织毛细血管内皮细胞ICAM－1的表达强度和数量明显增加,且伴有大量淋巴细胞浸润;MMF治疗组移植心仅微弱表达ICAM－1,同时少有淋巴细胞浸润;检测移植心组织ICAM－1的表达改变比普通组织病理学检查可以提早2－3d发现排斥反应。结论 ICAM－1的表达水平与排斥反应的发生和发展有关;MMF能显著抑制移植心ICAM－1的表达和淋巴细胞的浸润,明显延长移植物的存活。