siRNA下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞MMP-9的表达及侵袭能力的影响

目的 观察下调Astrocyte elevated gene-1(AEG-1)基因对神经母细胞瘤细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达以及细胞侵袭能力的影响.方法 根据RNA干扰原理,设计合成AEG-1 siRNA.通过荧光定量RT-PCR和Western blotting观察神经母细胞瘤细胞中AEG-1基因mRNA和蛋白下调情况;采用Western blotting观察下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞中MMP-9蛋白表达的影响;通过侵袭实验(Transwell法)观察下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞侵袭能力的影响.结论 采用AEG-1 siRNA转染神经母细胞瘤细胞,下调细胞内AEG-1的mRNA和蛋白表达(P＜0.05)后MMP-9蛋白表达抑制率分别为63.1%和58.9%.此外下调AEG-1表达使细胞侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 AEG-1基因下调使神经母细胞瘤细胞中MMP-9的蛋白表达明显减少、活性明显减弱,同时使细胞的侵袭能力降低.由此可见AEG-1在肿瘤细胞的侵袭转移中可能扮演重要角色,将会成为神经母细胞瘤基因治疗的新靶点.

Abstract：

Objective To investigate the effect of astrocyte elevated gene-1 (AEG-1)siRNA induced inhibition of invasion in neuroblastoma cells.Methods A small interference RNA(siRNA) targeting to AEG-1 mRNA(AEG-1 siRNA) was constructed and transfected into neuroblastoma cells with Lipofectamine 2000.A non-specific siRNA(control siRNA) and non-treatment were used as negative control group and blank group.The expression of AEG-1 mRNA was detected by RT-PCR.The proteins of AEG-1 and MMP-9 were detected by Western blotting.Cell invasion after AEG-1 knockdown was observed by Transwell assay.Results Compared with the control group,the expression of AEG-1 mRNA and protein were significantly decreased in the cells transfected with AEG-1 siRNAs(P＜0.05).AEG-1 knockdown by siRNA markedly decreased the expression of MMP-9 protein by 63.1% in neuroblastoma cells and the ability of cell invasion (P＜0.05).Conclusions The expression of AEG-1 mRNA is down-regulated by AEG-1 siRNA in neuroblastoma cells.Moreover,knockdown of AEG-1 expression in human neuroblastoma cells significantly inhibits the expression of MMP-9 protein and cell invasion.Therefore,AEG-1 may play a key role for MMP-9 activity and cell invasion,making it a potential target gene for gene-therapy in neuroblastoma.     

OxLDL/LOX-1系统及NF-κB通路在糖尿病血管内皮功能障碍中的作用机制

腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型(DM组),结果显示糖尿病大鼠2周时氧化低密度脂蛋白(oxLDL)水平已高于正常对照大鼠[(2.87±0.40对2.27±0.36)μg/dl,P＜0.05],血管舒张反应迟钝;6周时oxLDL水平更高[(4.32 ±0.66) μg/dl,P＜0.01],乙酰胆碱诱导的血管环舒张最大百分比(Rmax)明显降低(P＜0.01),糖尿病大鼠主动脉植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1( LOX-1)、NF-kB、内皮细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白及mRNA表达明显高于正常对照大鼠(P＜0.01),糖尿病大鼠LOX-1 mRNA表达水平与外周血oxLDL水平、NF-kBp65、ICAM-1 mRNA表达水平正相关,与Rmax呈负相关.提示OxLDL/LOX-1系统可能通过激活NF-kB,上调ICAM-1的表达,导致糖尿病早期内皮功能障碍.     

全胃肠外营养联合施他宁治疗胰外瘘19例报告

胰外瘘系胰腺疾病术后的常见并发症 ,以往对于胰外瘘的治疗 ,主要采取手术治疗的方法。但再次手术危险性大 ,处理困难。我们根据生长抑素加肠外营养能明显抑制胰腺外分泌功能的理论基础[1] ,采用生长抑素十四肽施他宁和全胃肠外营养 (ＴＰＮ)联合治疗胰外瘘 ,取得良好疗效 ,报告如下。1　资料与方法1·1　一般资料　我院于 1994年至 1999年间共收治胰外瘘患者 19例 ,其中男性 12例 ,女性 7例 ,年龄 2 6～ 4 9岁 (平均 4 2 0岁 )。急性出血坏死性胰腺炎术后8例 ,胰腺外伤修补术后 4例 ,胰腺假性囊肿外引流术后 3例 ,胰岛素瘤切除术后 1例 ,…     

糖尿病大鼠心肌胶原代谢的变化及与MMP-2/TIMP-2表达的关系

目的  探讨不同时期1型糖尿病大鼠心肌间质胶原代谢的动态变化及其与基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-2（MMP-2/TIMP-2）表达的关系。方法     Wistar大鼠随机分为正常对照4周组和12周组,糖尿病4周组和12周组。糖尿病模型以腹腔注射60mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱发建立。喂养4周和12周后测定大鼠心肌胶原含量、MMP-2/TIMP-2血清含量和心肌活性、基因和蛋白表达。结果  与同期正常对照组相比,糖尿病组大鼠心肌间质胶原明显增多（P＜0.01）,MMP-2活性、基因和蛋白表达明显减弱（除DM4周组MMP-2活性P＜0.05外,P均＜0.01）,TIMP-2血清水平和mRNA表达显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,且随病程延长进一步加剧。MMP-2血清水平和TIMP-2蛋白表达在病程4周时升高不明显(P＞0.05),12周时明显升高（P＜0.05,P＜0.01）。心肌胶原容积分数与MMP-2、TIMP-2血清水平呈正相关（r=0.565,P＜0.01;r=0.415,P＜0.05）,与MMP-2活性、基因和蛋白表达呈负相关（r=-0.797,-0.704,-0.613;P＜0.01）,与TIMP-2基因、蛋白表达呈正相关（r=0.609,0.620;P＜0.01）。结论  糖尿病大鼠存在心肌间质重塑,且随病程延长而加重。MMP-2/TIMP-2表达失衡可能是糖尿病心肌间质重塑的重要原因。血清MMP-2和TIMP-2可作为糖尿病心肌病早期预测的可能指标。     

新生儿血小板减少320例临床分析

目的 分析新生儿血小板减少的病因、治疗及预后.方法 选择2005年1月至2010年12月住院治疗的320例新生儿血小板减少患儿的临床资料,对其病因、临床表现、转归进行分析.结果 在同期住院新生儿中,新生儿血小板减少的发病率为13.5％.病因以感染为首位,144例(45％),围生期窒息55例(17.2％),胎盘功能不全42例(13.1％),新生儿溶血病32例(10％),免疫性血小板减少13例(4.1％),其他28例(8.8％),原因不明者6例(1.9％).320例新生儿血小板减少中,死亡15例,病死率为4.69％.结论 新生儿血小板减少的常见原因是感染、围生期窒息和胎盘功能不全,预后与病因相关,多数预后良好.     

大连市中山区2001～2003年新生儿、婴儿、幼儿死因分析

本文对大连市中山区 2 0 0 1～ 2 0 0 3年新生儿、婴儿、幼儿死因进行分析、为今后儿童保健工作提供科学依据。     

炎性乳腺癌误诊2例报告

我院于 1 993年和 1 998年收治 2例炎性乳腺癌患者 ,一例误诊为急性乳腺炎 ,一例误诊为乳腺脓肿 ,报告如下。　　例 1 :女 ,2 8岁 ,因左侧乳房肿块、疼痛及红肿一月 ,来我院就诊。入院查体 :体温 38.2℃ ,脉搏、呼吸及血压均正常。左侧乳房较右侧明显肿大、红肿 ,局部皮温增高 ,压痛明显 ,尤以外下象限处为著。可扪及外下象限处局部乳房组织较硬 ,与周围组织界限不清。同时左侧腋下淋巴结可扪及肿大。患者系产后 3月 ,哺乳期妇女 ,疼痛以哺乳时为重。查血常规提示ＷＢＣ 9.8×1 0 9 Ｌ ,Ｌ 0 .4 4,Ｎ 0 .56,入院后诊断为急性乳腺炎 ,抗炎治…     

应用促排卵药后葡萄胎与胎儿共存附两例报告及文献复习

1病例资料 例1 患者，26岁，G1P0，因停经5个多月，阴道流血2天入院。末次月经2004年9月19日，未感胎动。平素月经正常，孕前曾服用克罗米芬促排卵。B超示胎儿双顶径5．0cm，股骨长3．3cm，胎盘位于宫底，子宫内胎儿周围探及大片状强回声光斑，其中充满大小不等的小泡状暗区，呈蜂窝状，CDFI未见血流信号，子宫肌壁完整，厚度均匀，胎儿胎盘显示清晰，回声正常。B超诊断：单胎中孕合并葡萄胎。入院查体T36．4℃，P75次／min，R20次／min，BP145／90mmHg，     

止血带和双侧子宫动脉上行支结扎在剖宫产时困难的子宫肌瘤切除术中的应用

剖宫产子宫肌瘤切除术已有多篇文献报道,对于单发、偏浆膜下及直径较小的肌瘤在剖宫产时切除并不增加术中、术后出血量和术后病率,是安全可行的。但巨大肌瘤、多发肌瘤、粘膜下肌瘤及宫颈、下段等特殊部位的肌瘤,可增加术中术后出血和术后病率。"困难处理的肌瘤"若在剖宫产术中