浙江省副溶血性弧菌污染水平及贝类海产品风险评估

摘要 ：目的 在研究浙江省各类食品中副溶血性弧菌污染水平的基础上,进行贝类海产品副溶血性弧菌感染风险评估。方法 对2215件市售食品用科玛嘉弧菌显色培养基分离副溶血性弧菌,并用API 20E鉴定条鉴定;用Ross Ranger-Sumner软件进行贝类海产品副溶血性弧菌感染风险评估;用PCR方法进行毒力基因检测。结果 副溶血性弧菌检出率鲜(活)海水产品为43.06 %、生/半生食海产品为32.52 %、鲜活淡水产品为22.22 %、生畜肉为13.52 %、生禽肉为11.44 %、散装熟肉制品为3.44 %、中式凉拌菜为2.98 %、生食蔬菜为2.10 %、鲜奶蛋糕为2.08 %。8月-10月副溶血性弧菌检出率显著高于4月～6月（P=0<0.01,x2=46.445）。农贸市场采集的食品副溶血性弧菌检出率显著高于超市（P=0.001<0.01,x2=10.252）。tdh毒力基因携带率为3.66 %（3／82）,trh基因全部阴性。生食或半生食牡蛎等贝类海产品副溶血性弧菌感染风险系数分别为50（生食）和48（半生食）,每年因食用牡蛎等贝类海产品导致副溶血性弧菌食源性疾病的人数为4.42×104人（生食）和2.21×104人（半生食）,如果烹饪彻底,风险系数降可至零。结论 浙江省各类食品中副溶血性弧菌污染问题突出,防止食品间交叉污染,不生食半生食海水产品,即食食品食用前加热处理是减少副溶血性弧菌食源性疾病发生的最有效方法。     

肠炎血清型沙门菌多重PCR检测方法的建立及应用

摘 要：目的 为临床确诊及基层实验室快速准确鉴定肠炎血清型沙门菌提供实验室支持,同时为沙门菌传统血清学鉴定方法提供技术补充。方法 根据沙门菌菌体抗原A/D1群基因、鞭毛抗原基因（fliC-HG）及肠炎沙门菌特异性基因片段（sdf I）设计引物,建立多重PCR体系并进行反应条件优化。对所建立的体系的特异性进行检测,并将该体系应用于浙江省2009-2010年分离的共计53株样本的检测。结果 建立并优化了肠炎沙门菌检测的多重PCR体系,该体系具有高特异性,可准确快速鉴定肠炎血清型沙门菌,也可区分A群及D群血清群的沙门菌,并能检测鞭毛抗原为HG的沙门菌,对实际样本检测符合率达100%。结论 该体系能正确鉴定肠炎血清型沙门菌,可作为沙门菌传统血清学分型的辅助方法,可弥补商品化血清质量层次不齐的缺陷。并为肠炎沙门菌的监测与实验室诊断提供了一种简单快速、重复性好的新方法。     

Ⅱ型猪链球菌浙江分离株cps2J、ef、mrp基因的克隆及序列分析

目的阐明浙江省猪链球菌分离株的血清型分型,分析其与国内外其他猪链球菌Ⅱ型（SS2）菌株 cps2J、ef、mrp毒力基因的差异。方法参照GenBank上已发表的cps2J、ef、mrp毒力基因序列,设计引物 ,对6株浙江省猪链球菌分离株进行cps2J、ef、mrp全基因克隆及序列测定,并与国内外其他分离株的基 因序列进行比较。结果cps2J、ef、mrp基因的完整开放阅读框（ORF）分别为999bp、2532bp、3771bp,各 自编码333、843、1256个氨基酸。经对cps2J、ef、mrp毒力基因的序列比较与系统进化分析,6株浙江分 离株均分布在SS2发生群中,与国内外其他SS2菌株cps2J、ef、mrp基因核苷酸的同源性均较高,分别为 98.39%～100.0%、99.6%～100.0%和99.4%～100.0%,分离的年代和地区对基因的同源性和系统进化分支影 响不大。结论6株浙江省猪链球菌分离株为2型菌株,cps2J、ef、mrp基因序列非常保守,与GenBank上国 内及欧洲SS2菌株中相应序列有很高的同源性,可能有着相同的起源。     

浙江省1999年钩端螺旋体病监测分析

为了进一步掌握全省钩体病的流行特征和规律 ,提高钩体病防制水平 ,控制本病的流行 ,根据《1999年浙江省钩端螺旋体病预防和控制计划》和《1999年浙江省钩端螺旋体病监测计划》 ,我们开展了钩体病人群病原学、血清学监测和宿主动物间疫情调查 ,现将监测结果分析如下。材料与方法1　资料来源　全省监测点调查资料、各县市疫情报告资料。2　病人检测　对全省各医院临床确诊钩体病病例用ＭＡＴ法检测抗体和无菌采血分离培养病原体。3　动物病原监测　各监测点用夹夜法定期在室外捕鼠 ,鉴定鼠种 ,计算鼠密度 ,用背式法解剖取双肾分离培养病原体…     

浙江省鼠中巴尔通体rpoB基因系统进化分析

目的初步了解巴尔通体在浙江省鼠群中携带状况及流行特征,为制定预防措施提供依据。方法 2009年8月于浙江省磐安县捕鼠101只,提取其肝、脾DNA后,选择巴尔通体属rpoB基因进行PCR扩增,并对所得产物进行测序及进一步的系统进化分析。结果 2009年在磐安县捕获的101只鼠中肝脾标本检出巴尔通体rpoB基因阳性1例,其中黄胸鼠中巴尔通体分离率为4.3%;此分离株与格雷汉巴尔通体（GenBank序列号：AB426694.1）处于同一进化分支上（自展值为96%）。结论在浙江省鼠群中存在巴尔通体感染,分离株种属为格雷汉巴尔通体。     

浙江省272份食品沙门氏菌检测结果

沙门氏菌是肠杆菌科中的一大类重要致病菌 ,极易污染食品、水源及其它物品 ,造成摄食者急性腹泻 ,甚至暴发食物中毒。为了了解我省各类食品中沙门氏菌的污染情况、分布特点及耐药性 ,为更好地预防食源性疾病及指导临床合理用药提供依据 ,2 0 0 0～ 2 0 0 1年对猪肉、鸭肉、水产品等六类食品2 72份样品进行沙门菌检测的基础上做了耐药性检测 ,并与部分食物中毒分离株进行比较 ,现将结果报道如下。材料与方法1　标本采集　样品分别采自杭州市各大农贸市场、大型奶制品厂及相关食品生产单位 ,包括生肉、熟肉、生奶、乳制品、水产品、冷冻食品共…     

SARS冠状病毒CT基因型发现及相关特征

目的 研究SAPS冠状病毒基因型及相关特征。方法 对杭州市首例SAPS病人分离的SAPS冠状病毒ZJ01株进行全基因组测序，并在GenBank数据库登录。记录号：AY297028，版本号：gi：30910859。整个全基因组由29715bp组成。使用GeaBank数据库中最新登陆的SARS病毒的基因组进行序列比对、突变点分析和多态性分析、特殊片段的系统进化分析。结果 发现在ZJ0l株的9391、17555、21712、22213和27819位点，分别是T、T、G、T和T核苷酸碱基，和CenBank数据库中的其他SARS冠状病毒株比较，除第l、2、4和5突变位点(C：G：C：C／T1 T1 T2 T)之外，发现在21712位点(第3个)A／G突变也参于这一遗传标识。因此我们提出5个突位点将17株病毒分为两种基因型的新概念，即C：G：A：C：C与T：T：G：T：T两型，简称C型和T型。ZJ01病毒株属于T基因型．在中国大陆内地是首次发现和发表。突起蛋白基因片断的进化树分析，广州的GZ01 C基因型株进化距离和其他病毒株相差甚远；比较而言，和C基因型BJ0l、CUHK-Wl病毒株较为接近，其次是T基因型的Fl和F2组。5个突变位点(C：G：A：C：C／T：T：G：T：T)的两个发生在编码突起蛋白(S)的基因中，分别是A／G和C／T突变，由此引起的突起蛋白(S)氨基酸变化是Asp／Gly(天门冬氨酸／甘氨酸)和Thr／Ile(苏氨酸／异亮氨酸)。结论 这些基因型特征和变异是否会引起生物学及临床症状的差异是非常值得重视的。     

SARS病毒分离与病原学研究

目的 从浙江省首发的3例临床诊断SARS患者样本中分离SAPS病毒，并进行病毒核酸、免疫学检测和形态学观察。方法 采集3例SARS患者发病期的含漱液，接种Veto、Veto-E6、RD、Hep-2、MK单层细胞，观察细胞病变、免疫荧光法检测病毒抗原和RT-PCR法检测病毒核酸。抗原阳性的培养物作电镜形态学观察。结果 从3例患者的2份含漱液中分离到2株SAPS病毒，并发现Vero和RD两种细胞对SARS病毒敏感。在接种病毒后的3天左右可出现典型的细胞病变，两株病毒已在Vero和RD细胞上传代5代；在电镜下观察到SAPS病毒颗粒。结论 分离的2株病毒确定为SARS冠状病毒。并能在Veto细胞上稳定传代；建立的间接免疫荧光技术可用于SAPS实验室诊断及流行病学调查等。     

用分值计算法对选择性培养基质量进行比较

肠道选择性培养基是分离、培养肠道致病菌首选培养基，其质量优劣直接影响肠道致病菌检出。目前各检验机构使用的肠道选择性培养基均从市场购入，因此，购买优质的培养基是保证检验质量的先决条件，本次实验从市场购买SS等6种培养基，采用分值计算法进行质量比较，现将结果报告如下。     

健康教育用于糖尿病患者的体会

我科自2001年3月定为淄博市重点中医专科——糖尿病科．几年来，为达到提高糖尿病患者生活质量，延长患者生命的目的，对他们进行了系统的健康教育，并把教育项目、教育内容制定成标准教育计划，取得了很好的效果，现介绍如下．