疏肝健脾、安神和胃法治疗功能性腹泻模型大鼠的作用机制

目的基于心胃相关理论探讨母子分离加直肠刺激法导致功能性腹泻的发病机制来探讨中药疏肝健脾、安神和胃法治疗腹泻的作用途径。方法采用母子分离加直肠刺激法复制大鼠腹泻模型,并显微镜下观察腹泻模型大鼠肠黏膜是否出现器质性改变。给予疏肝健脾、安神和胃中药2 w后观察大鼠小肠推进率;并采用放射免疫法检测大鼠下丘脑、脑干以及肠黏膜的促肾上腺激素释放激素水平及中药中药疏肝健脾、安神和胃法对其影响。结果造模后大鼠小肠推进率较正常组明显增快(P<0.05)。经中药疏肝健脾、安神和胃法治疗2 w后,大鼠小肠推进较模型组降低(P<0.05),与正常组比较无显著性差异。与正常相比,造模后大鼠脑干、下丘脑及肠黏膜促肾上腺激素释放激素含量明显升高(P<0.05);给予疏肝健脾、安神和胃中药2 w,治疗后大鼠脑干、下丘脑及肠黏膜促肾上腺激素释放激素水平与腹泻模型组大鼠相比均有所降低(P<0.05),与正常组及西药对照组比较无显著性差异。结论腹泻模型大鼠脑干、下丘脑及肠黏膜促肾上腺激素释放激素含量表达的升高提示其表达改变与腹泻的发病相关。中药疏肝健脾、安神和胃能降低腹泻大鼠脑干、下丘脑及肠黏膜促肾上腺激素释放激素含量,其作用机制可能是与影响脑肠轴促肾上腺激素释放激素通路有关。     

康泰复方对IBS模型大鼠脑肠轴CRH及肥大细胞的干预作用

目的：探讨肠易激综合征（IBS）的发病机制及康泰复方治疗IBS的作用途径。方法：SPF级SD大鼠110只,雌雄各半,随机分为模型组,康泰复方低、中、高剂量组以及西药组各20只,正常组10只;使用幼鼠母子分离加直肠刺激法复制大鼠IBS模型,造模后各用药组分别予以低、中、高剂量康泰复方以及马来酸曲美布汀片灌胃治疗,连续2周;检测大鼠内脏敏感性,大鼠模下丘脑、脑干促肾上腺皮质激素释放因子（CRH）水平,观测肠黏膜肥大细胞数目、肥大细胞c-fos基因表达情况。结果：造模后大鼠触发抬腹压力与正常组比较明显降低（P〈0.05）,康泰复方治疗后中、高剂量组与模型组比较压力升高（P〈0.05）,与正常组比较无显著性差异,而西药组与模型组比较无显著性差异;造模后模型组大鼠脑干、下丘脑CRH水平以及结肠远端肠黏膜肥大细胞c-fos基因表达与正常组比较明显升高（P〈0.05）,康泰复方中、高剂量组以及西药组与模型组比较,脑干、下丘脑CRH水平以及结肠远端肠黏膜肥大细胞c-fos基因表达均降低（P〈0.05）。结论：IBS模型大鼠脑干、下丘脑CRH含量升高提示其改变与IBS的发病相关;中药康泰复方能降低IBS内脏高敏感性大鼠脑干、下丘脑CRH含量,其作用机制可能与影响脑肠轴CRH通路有关。     

四磨汤口服液对胃肠运动功能障碍模型大鼠胃残留、小肠推进率及结肠P物质的影响

目的：观察四磨汤口服液对胃肠运动功能障碍模型大鼠胃残留率、小肠推进率及结肠P物质（SP）的影响．方法：6f）只大鼠随机分为空白组,模型组,四磨汤口服液高、中、低剂量组以及西药组,按夹尾法配合饥饱失常法造模后给予相应药物灌胃,检测半固体营养糊在体内的胃残留率和小肠推进率,按免疫组化要求染色并观察sP的阳性面积。结果：与空白组比较,模型组大鼠胃残留率明显升高以及小肠推进率显著降低（P〈0．05）;四磨汤口服液高剂量组较模型组大鼠胃残留率降低、小肠推进率增加（P〈0．05）;模型组结肠SP表达水平较空白组显著降低（P〈0.05）;四磨汤口服液高剂量组与西药组结肠SP阳性表达均较模型组增高（P〈0．05）。结论：夹尾法配合不规则喂养可导致大鼠胃肠运动紊乱,四磨汤口服液能促进胃肠运动障碍模型大鼠胃肠蠕动功能的恢复,能够增高胃肠功能障碍大鼠兴奋性神经递质SP的表达,可能是其调整胃肠运动功能障碍的作用机制之一。     

藿朴夏苓汤对脾胃湿热证Th1/Th2平衡的影响

目的：探讨藿朴夏苓汤调节脾胃湿热证Th平衡的趋势方向。方法方便收集2015年6月＿2016年6月广州医科大学附属第二医院中医门诊慢性胃病脾胃湿热证患者,随机分为中药组与西药组,每组30例;采用酶联免疫吸附试验(ELISA﹚检测患者服药前后外周血细胞因子IFN-γ、IL-4水平表达变化。结果慢性胃病脾胃湿热证治疗中药组总有效率为93.3%,西药组总有效率为90.0%;治疗前各组外周血IFN-γ、IL-4表达差异无统计学意义(P﹥0.05﹚;经治疗后,慢性胃病脾胃湿热证患者外周血IFN-γ水平明显下降(P﹤0.05﹚,其中中药组(47.91±17.06﹚较西药组(60.35±16.12﹚下降更明显(P﹤0.05﹚;IL-4水平上升,其中中药组较西药组上升,但差异无统计学意义。结论藿朴夏苓汤具有介导Th1免疫优势,调节中医正邪平衡,可作为临床中医选方用药的依据。     

四磨汤对功能性排便障碍模型大鼠CRH、脑肠肽SP、及肥大细胞的干预作用

目的 探讨功能性排便障碍（functional constipatioⅡnal disorder FC）发病的可能机制,并尝试解释中药四磨汤治疗功能性排便障碍的作用途径.方法 110只小鼠被随机分为6组：正常对照组,西药组,模型组,中药低剂量组,中药中剂量组,中药高剂量组.治疗2周后,测定各组大鼠的下丘脑部、脑干部位的肾上腺皮质激素释放因子（Corticotropin-releasing hormone,CRH）水平、脊髓腰段的P物质（substanceP,SP）含量,采用免疫组化法观察肠粘膜肥大细胞活化状态（c-fos基因表达情况）及中药四磨汤对其影响.结果 功能性排便障碍模型大鼠经四磨汤灌胃治疗2周后,与未用药的模型组相比,大鼠内脏的敏感性明显降低（P＜0.05）.与正常组相比,功能性排便障碍模型组大鼠脑干部、下丘脑部位的CRH水平明显升高,大鼠脊髓腰段的SP含量降低,肠粘膜c-fos基因表达总阳性显色细胞数总数降低,两组比较P ＜0.05,差异具有统计学意义;与模型组相比,中药高、中、低剂量组、西药组大鼠脑干部、下丘脑的CRH水平均有所降低,大鼠脊髓腰段的SP含量升高,肠粘膜c-fos基因表达总阳性显色细胞数升高,两组间比较P＜0.05,差异具有统计学意义.结论 功能性排便障碍模型大鼠脑干、下丘脑CRH含量、脊髓P物质表达的改变提示与功能性排便障碍的发病相关.中药四磨汤能降低功能性排便障碍模型大鼠脑干、下丘脑CRH含量、升高脊髓P物质含量与c-fos基因表达水平,其作用机制可能是与影响脑肠轴通路有关。     

四磨汤对便秘型肠易激综合征模型大鼠的干预作用

【目的】观察四磨汤对便秘型肠易激综合征(IBS-C)的干预作用及可能的机制。【方法】选用SPF级SD大鼠,将其随机分为正常组,模型组,中药高、中、低剂量组(剂量分别为3.6、1.8、0.9 g·kg-1·d-1),阳性对照组(马来酸曲美布汀,剂量为0.1 g·kg-1·d-1);采用夹尾激怒联合直肠刺激法复制大鼠IBS-C模型,给药后测定各组大鼠下丘脑、脑干部位的肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin-releasing hormone,CRH)水平,腰段脊髓P物质(substance P,SP)含量,肠黏膜肥大细胞活化状态(c-fos基因表达情况)。【结果】经四磨汤治疗2周后,与模型组比较,中药高、中、低剂量组大鼠内脏高敏感性均显著降低(P0.05)。与正常组比较,模型组大鼠脑干和下丘脑部位的CRH含量显著升高,脊髓SP含量显著降低,肠黏膜c-fos基因表达总阳性显色细胞数显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,阳性对照组,中药高、中、低剂量组大鼠脑干和下丘脑CRH水平均显著降低,大鼠脊髓SP含量显著升高,肠黏膜c-fos基因表达总阳性显色细胞数显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。【结论】四磨汤治疗IBS-C的作用与其降低大鼠脑干、下丘脑CRH含量,升高脊髓P物质含量与c-fos基因表达水平,影响脑—肠轴通路有关。     

康泰胶囊对肠易激综合征内脏高敏感性大鼠背根神经元兴奋性的影响

【目的】观察康泰胶囊对肠易激综合征(IBS)内脏高敏感性大鼠结肠背根神经元(DRG)兴奋性的作用,探讨康泰胶囊治疗IBS的作用机制。【方法】选用SD大鼠,随机分为正常组、模型组、康泰胶囊组(剂量为6.06 g/kg)、匹维溴铵组(剂量为50 mg/kg),除正常组外,其他组大鼠均采用慢性不可预计条件应激法复制内脏高敏感性IBS模型,根据腹部回缩反射(AWR)结果评估模型内脏敏感程度,分离模型大鼠背根神经元,应用膜片钳全细胞记录技术测定背根神经元的基电流强度和2倍基电流刺激下神经元反应,观察康泰胶囊对内脏高敏感IBS大鼠结肠背根神经元电生理特性的影响。【结果】康泰胶囊可以显著降低模型大鼠AWR评分(P<0.05或P<0.01),显著升高结肠DRG的基强度(P<0.01),显著减少2倍基强度刺激产生的动作电位数(P<0.01)。【结论】抑制应激引起的内脏高敏感IBS大鼠结肠背根神经元兴奋性增高可能是康泰胶囊治疗IBS的作用机制之一。     

不同证型慢性胃炎患者外周血淋巴细胞HSP70、NF-~κB的表达研究

目的 探讨脾胃湿热、脾气虚证外周血淋巴细胞热休克蛋白70(HSP70)和核因子-κB(NF-κB)的表达及其与Hp感染的关系。方法 选择86例2008年6月—2009年2月就诊于广州中医药大学第一附属医院脾胃科门诊的慢性胃炎患者。其中脾胃湿热证67例(湿重于热30例,湿热并重27例,热重于湿10例)、脾气虚证19例,另选择广州中医药大学健康教职工和学生志愿者12名作为对照组。采集各组外周血,采用安速幽门螺旋杆菌(Hp)血清快速法检测Hp感染;采用流式细胞仪检测HSP70、NF-κB表达。结果 脾胃湿热与脾气虚证Hp感染率分别为37.31%和36.84%(P>0.05)。与对照组比较,脾胃湿热证热重于湿组淋巴细胞HSP70表达降低,脾胃湿热证热重于湿组及脾气虚证组NF-κB表达升高(P<0.05)。脾胃湿热、脾气虚证Hp阳性组NF-κB表达均高于对照组(P<0.05);脾气虚证Hp阳性组HSP 70表达高于同证型Hp阴性组(P<0.05)。此外, HSP70、NF-κB表达与Hp感染相关系数分别为-0.023和0.027 (P>0.05)。结论 慢性胃炎患者外周血淋巴细胞NF-κB在脾胃湿热证热重于湿、脾气虚证表达的升高可能反映了中医理论中“内邪”的致病作用;HSP70在脾气虚证HP阳性表达的升高,及在脾胃湿热证热重于湿表达的降低可能反映了“正气抗邪”、“邪盛正虚”的作用;Hp可能并非引起脾胃湿热证、脾气虚证发生的唯一“外邪”因素。     

慢性胃炎脾胃湿热证与外周血Th1/Th2平衡的研究

目的探讨慢性胃炎脾胃湿热证与外周血Th1/Th2平衡的相关性。方法收集慢性胃炎脾胃湿热证患者51例(包括湿重于热22例,热重于湿9例,湿热并重20例),另设健康志愿者10名为健康对照组。采用安速Hp血清快速检测法判定Hp感染率,液相蛋白芯片技术检测血清Th1型细胞因子γ干扰素(inter-feron-γ,IFN-γ)、白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)和Th2型细胞因子IL-4、IL-10表达。结果脾胃湿热证组患者Hp感染率(41.18%,21/51)明显高于健康对照组(10.00%,1/10),差异有统计学意义(P0.05)。湿重于热、热重于湿和湿热并重各亚型组Hp感染率分别为45.45%(10/22)、22.22%(2/9)和45.00%(9/20),其中湿重于热、湿热并重亚型组与健康对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。脾胃湿热证患者外周血IFN-γ、IL-12、IL-4及IL-10表达与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05),但脾胃湿热证IFN-γ和IL-12表达呈增高的趋势,而IL-4表达则呈下降的趋势。脾胃湿热证各亚型组比较,均呈现湿热并重组IFN-γ、IL-12、IL-4表达以及IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-4比值较湿重于热组、热重于湿组升高的趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论慢性胃炎脾胃湿热证的发生可能与Th1/Th2平衡改变相关,"湿"和"热"邪可能是介导Th1型细胞因子免疫反应的病理因素。     

脾胃虚实证大鼠局部与整体Th平衡的研究

目的探讨脾胃虚实证候大鼠模型胸腺、脾脏、外周血Th1/Th2平衡的相关性。方法将60只SPF级SD大鼠随机分为3组,其中一组为脾虚组,一组为湿热组,一组为正常组,每组20只,雌雄各半,采用酶联免疫吸附法(ELISA)技术对大鼠模型血浆、胸腺、脾脏组织Th1/Th2细胞因子水平进行检测。结果在胸腺方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,IL-4表达和IFN-γ/IL-4比值升高,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达和IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。在脾脏方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05);湿热组的IFN-γ表达升高,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显上升(P0.05)。在外周血方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达明显下降(P0.05),IL-4表达升高,IFN-γ/IL-4比值下降,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。结论脾虚组和湿热组在脾脏的IL-4表达均表现出下降趋势,IFN-γ/IL-4比值呈升高趋势,脾脏的Th1/Th2平衡在不同证型中可能均向Th1漂移。胸腺、脾脏、外周血等不同组织的IFN-γ/IL-4比值在脾胃虚实证候的呈现不同,提示不同部位的细胞因子表达差异性与不同证候的相关性,这可能是脾胃虚实证候的发病机制之一。