重庆市肺结核患者异烟肼与丙硫异烟胺耐药状况分析

目的 了解重庆市结核分枝杆菌异烟肼(INH)、丙硫异烟胺(Pto)及其交叉耐药情况,为重庆市耐药结核病的防控提供参考。方法 根据重庆市2015-2017年39个区县培养阳性菌株的传统药敏试验结果,收集288例INH或Pto任意耐药菌株,分析其耐药情况。结果 288例菌株中,INH耐药菌株285例,Pto耐药菌株19例,交叉耐药菌株16例。复治患者INH 或Pto的耐药率均高于初治患者,年龄15~44岁患者Pto耐药率显著高于INH组。Pto耐药组Pre-XDR-TB及Ofx耐药率显著高于INH组。交叉耐药菌株中,年龄15~44岁组交叉耐药率较高,且 MDR-TB发生率高达93.8%。结论 重庆市INH与Pto耐药情况已较为严重,医生在为INH耐药患者制定化疗方案时应根据药敏结果,应谨慎选择Pto进行替代治疗,以避免更多耐药的发生。     

Genotype MTBDR plus快速检测耐多药结核病的临床应用

目的评价Genotype MTBDR plus快速检测耐多药结核病的临床应用价值。方法对涂阳肺结核患者痰标本和临床分离菌株分别用传统比例法药敏试验和Genotype MTBDR plus进行异烟肼和利福平耐药性检测,以比例法药敏试验为金标准对Genotype MTBDR plus检测结果进行比较分析。结果在368例涂阳痰标本中,比例法药敏试验与Genotype MTBDR plus检测异烟肼、利福平耐药率比较,差异均无统计学意义(P均0.05);两种方法检测异烟肼和利福平的一致率分别为95.38%(351/368)和97.55%(359/368)。在85例临床分离菌株中,比例法药敏试验与Genotype MTB-DR plus检测异烟肼、利福平耐药率比较,差异均无统计学意义(P均0.05)。两种方法检测异烟肼和利福平一致率分别为92.94%(79/85)和96.47%(82/85)。与比例法药敏试验比较,Genotype MTBDR plus检测涂阳痰标本和菌株中异烟肼的灵敏度分别为76.32%(29/38)、78.57%(11/14),特异性分别为97.58%(322/330)、95.77%(68/71));检测利福平的灵敏度分别为93.55%(29/31)、91.67%(11/12),特异性分别为97.92%(330/337)、97.26%(71/73)。结论 Genotype MTBDRplus能快速检测结核分枝杆菌对异烟肼、利福平的耐药性,和传统药敏试验比较具有较高的一致性和特异性,是目前快速诊断耐多药结核病的一种较为理想的检测方法,适宜在有条件的实验室开展。     

重庆市耐多药肺结核可疑患者药敏结果分析

目的：通过分析重庆市耐多药肺结核（multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB）可疑患者药敏结果,为重庆市耐多药结核病的发现及控制提供参考和依据。方法：2014年7月至2016年2月重庆市39个区县573例MDR-TB可疑患者痰培养阳性分离株,采用比例法进行4种一线抗结核药物和6种二线抗结核药物的药敏试验,对药敏结果进行统计分析。结果：573例MDR-TB可疑患者的MDR-TB检出率为25.0%,明显高于单耐药结核病（single drug-resistant tuberculosis,SDR-TB）检出率（9.6%）及多耐药结核病（poly drug-resistant tuberculosis,PDR-TB）检出率（8.0%）（P<0.001）。高危人群MDR-TB检出率为26.6%（130/488）,明显高于新患者的15.3%（13/85）（P=0.026）。高危人群中,复治失败患者MDR-TB检出率最高,为42.1%（16/38）,其次为初治失败患者,为40.0%（18/45）。结论：重庆市耐多药肺结核可疑患者MDR-TB检出率高,耐多药肺结核防控形势严峻。高危人群尤其是复治失败和初治失败患者应该作为耐多药肺结核筛查的重点人群。     

肿瘤特异性hTERT启动子与Survivin启动子在肺癌A549细胞中的转录活性研究

目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据.方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基凶;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别构建3种启动子调控的、以红色荧光蛋白CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-H-RED、pGL-LH-RED和pGL-S-RED.将重组质粒用脂质体分别转染A549和MRC-5细胞,72h后用Imagepro-Plus6.0分析3种启动子在相同时间内启动红色荧光蛋白的表达水平.结果:重组质粒在A549细胞中观察到了红色荧光,在MRC-5细胞中无红色荧光.pGL-S-RED质粒在A549细胞巾表达最强,pGL-LH-RED次之,pGL-H-RED最弱,3种质粒在A549细胞中的荧光强度(IOD)分别为201.17、171.70和136.34.结论:所克隆的hTERT启动子和Survivin启动子均表现出肿瘤特异性,其中Survivin启动子在肺癌A549细胞中具有最好的启动效应,可望开发成为肺癌靶向性基因治疗工具.     

重庆地区耐多药结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药基因突变的特征分析

分析重庆地区分离的耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)菌株pncA和rpsA基因突变特征及其与吡嗪酰胺(PZA)耐药的相关性。     

2010-2013年三峡库区六区（县）结核病耐药情况分析

我国是27个耐多药结核病负担国家之一,耐药结核病患者尤其是耐多药患者例数众多,已经严重影响到结核病疫情的控制。据全国第五次结核病流行病学抽样调查报告显示,我国西部地区涂阳肺结核患病率105/10万,明显高于其他地区,也高于全国水平,全国耐多药率达6.8%。重庆市地处我国西部,地区发展不平衡,其中三峡库区山区多、贫困人口多、交通不便,结核病疫情不容忽视。虽然重庆市在2005年开展了结核病耐药监测,但只涉及异烟肼（H）、     

重庆市耐多药结核分枝杆菌gyrA与rrs基因突变特征分析

目的分析重庆市耐多药结核分枝杆菌gyrA、rrs基因突变特征及其与氧氟沙星(ofloxacin,Ofx)、卡那霉素耐药(kanamycin,Km)的关系。方法对89株耐多药结核分枝杆菌的Ofx耐药相关基因gyrA和Km耐药相关基因rrs进行序列测定,分析其基因突变特征。结果89株MDR结核分枝杆菌中有50株对Ofx耐药,其中46株(92.00%,46/50)gyrA基因发生突变,突变位点包括74、89、90、91和94位密码子;22株耐Km菌株中,19株(86.36%,19/22)发生rrs基因突变,突变类型均为A1401G。Ofx、Km耐药株的gyrA、rrs基因突变率明显高于相应敏感株的基因突变率,两者之间的差异有统计学意义(χ²=62.937,P<0.001;Fisher双侧P<0.001)。结论gyrA基因90、91、94位密码子突变是重庆市耐多药结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制;rrs基因A1401G突变则是Km耐药的主要原因。     

重庆地区结核分枝杆菌异烟肼和丙硫异烟胺耐药及其交叉耐药相关基因突变研究

目的 研究结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼(INH)和丙硫异烟胺(Pto)的耐药情况,分析INH耐药相关基因(katG、inhA、ahpC、kasA)及与Pto交叉耐药相关基因的突变特点。方法 对233株INH耐药MTB临床分离株(37株对Pto同时耐药)的katG、inhA、ahpC、kasA基因进行扩增及序列分析。结果 耐异烟肼菌株中未发现katG完全缺失,223株 (96.5%)耐药株katG存在点突变、插入,其中 2个突变位点未见报道。195株 (83.6%)耐药株的第 315位点突变;189株 (81.1%)耐药株第463位点突变(R463L),其中166株 (71.2%)与第 315位点联合突变;在其他位点发生突变的菌株4株,包括D448G 1株、D419H 1株和2株同义突变。 11株(4.72%) INH耐药菌株中inhA点突变,包括S94A 1株、I194T 1株,C-15T 9株。37株Pto耐药的菌株中,8株点突变且均为inhA C-15T(4株为inhA单基因点突变C-15T,4株发生katG S315T和inhA C-15T的双基因联合突变)。全部耐药菌中有1株为ahpC基因突变,未发现有kasA基因突变。结论 进一步证实katG315和inhA-15基因位点突变与MTB对INH耐药密切相关;INH与Pto存在着交叉耐药,但耐药率较低,Pto耐药的发生与inhA-15位点突变密切相关。     

重庆地区耐多药结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物耐药的相关基因特征分析

目的 分析重庆地区耐多药结核分枝杆菌对氟喹诺酮类(FQs)药物耐药的相关基因特征,以及与结核分枝杆菌基因型的相关性。 方法 收集2015年1月至2017年6月重庆市39个区(县)967例耐多药结核病(MDR-TB)可疑患者的所有耐多药(MDR)结核分枝杆菌临床分离株229株,通过微孔板Alamar blue显色法检测4种FQs药物[氧氟沙星(Ofx)、左氧氟沙星(Lfx)、莫西沙星(Mfx)、加替沙星(Gfx)]的耐药性,用PCR测序方法对FQs药物耐药相关基因gyrA、gyrB进行分析,并采用实时荧光定量熔解曲线方法进行北京基因型鉴定。 结果 在229株MDR菌株中,94株(41.0%,94/229)对任一FQs药物耐药。其中,Ofx耐药率最高(41.0%,94/229);Lfx、Mfx耐药率居中,分别为31.4%(72/229)、30.6%(70/229);Gfx耐药率最低(20.1%,46/229)。94株对FQs耐药菌株中,81株(86.2%,81/94)发生gyrA基因突变,第94位密码子突变最常见(60.6%,57/94);10株(10.6%,10/94)发生gyrB基因突变。7株gyrA基因双位点突变均显示为高水平耐药;9株gyrA与gyrB联合突变中,2株为高水平耐药。重庆地区对FQs耐药菌株中北京基因型80株(85.1%,80/94),其中,现代北京基因型占60.0%(48/80)。 结论 重庆地区MDR结核分枝杆菌 对FQs耐药的菌株以现代北京基因型为主,其耐药相关基因突变主要发生于gyrA基因。     

重庆市复治涂阳肺结核患者耐药分析

目的 通过了解重庆市复治涂阳肺结核患者对抗结核药物的耐药情况,为改进重庆市肺结核病的防治措施提供参考和建议。方法 收集重庆市39个区县2016年5月至2017年10月期间复治涂阳患者培养阳性的菌株,并采用对硝基苯甲酸培养法鉴定结核分枝杆菌复合群。共收集428例复治涂阳肺结核患者菌株,采用传统的比例法进行8种抗结核药物的药敏试验,并对复治涂阳肺结核患者菌株耐（多）药情况进行分析。8种抗结核药物包括：异烟肼（INH）、利福平（RFP）、链霉素（Sm）、乙胺丁醇（EMB）、氧氟沙星（Ofx）、卡那霉素（Km）,阿米卡星（Am）和卷曲霉素（Cm）。结果 纳入的428例复治肺结核患者总耐药率为45.09%,以青年组耐药率最高,达57.14%,显著高于老年组（36.59%,P=0.002<0.017),但与中年组比较差异无统计学意义（43.52% P=0.022(>)0.017）;复治肺结核患者耐多药率为27.10%,其中青年组耐多药率（41.96%）显著高于中年组（24.35%）和老年组（17.89%, P<0.05);复治肺结核患者广泛耐药率达3.74%,耐Ofx及耐任一种二线注射类抗结核药物（包括Km、Am和Cm）的比例分别为16.12%和6.31%;复治肺结核患者对4种一线抗结核药物的耐药率顺位为：利福平（33.18%）、异烟肼（32.94%）、链霉素（28.74%）、乙胺丁醇（9.11%）。复治涂阳肺结核患者耐一种抗结核药物的耐药率为10.28%,对8种抗结核药物全部耐药的比例为1.17%。复治涂阳肺结核患者耐药状况不同性别之间差异无统计学意义。结论 重庆市复治涂阳肺结核患者的耐药形势严峻,其中青年是耐多药结核病发生的危险人群,应根据本市情况制定科学合理的结核病防治方案,减少耐药结核病的产生和传播。